一、电阻抗法测定精子浓度（论文文献综述）
赵良友[1]（2020）在《桦褐孔菌醇提物的毒性评价及其代谢组学研究》文中认为目的:桦褐孔菌[Inonotus obliquus（Fr.）pilat]属真菌门（Fungus）、担子菌亚门（Basidiomycotina）、层菌纲（Hymenomycetes）、多孔菌目（Aphyllophorales）、锈革孔菌科（Hymenochaetales）、褐卧孔菌属（纤孔菌属）（Inonotus）,是一种珍稀名贵的药用真菌,主要寄生于白桦、银桦、榆树、赤杨等阔叶树的树皮下或上述树木砍伐后的枯干上,属生长于寒带的珍贵木腐菌。目前,国内外学者对桦褐孔菌在抗肿瘤、免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化、抗疲劳等多方面的药理学作用进行了初步研究,但针对桦褐孔菌的生物安全性及其毒性、毒理机制的研究仍停留在一般毒性评价水平,缺乏对毒性机制的探讨,且与桦褐孔菌毒性关系密切的小分子代谢产物和代谢通路的改变等机制信息尚未明确,因此有必要开展进一步的毒性机制研究。本研究在应用传统毒理学研究方法的同时结合代谢组学技术,通过桦褐孔菌醇提物重复给予SD大鼠的毒性特点,探寻其毒性靶器官,并利用代谢组学技术等系统毒理学方法研究了桦褐孔菌醇提物的毒性机制。本研究,一方面,利用传统毒理学方法,研究桦褐孔菌醇提物重复给药的毒理学效应,揭示桦褐孔菌醇提物的潜在靶器官,其主要内容包括:桦褐孔菌醇提物对SD大鼠体重、摄食量和脏器系数的影响、临诊血液学、血清生化学和尿液相关指标的影响、及器官组织病理学变化的影响等;另一方面,利用现代代谢组学技术,从小分子代谢产物分析入手探讨桦褐孔菌醇提物的毒性作用机制;最后将传统毒理学研究结果和代谢组学研究结果有机的进行整合并加以分析,从而获得桦褐孔菌醇提物的毒性作用特点和毒性机制信息。通过本研究的实施,首先,将获得有关桦褐孔菌醇提物重复给药的毒性特点和毒性机制等毒理学资料;其次,将为建立桦褐孔菌醇提物的安全性评价标准提供科学依据,为探索桦褐孔菌醇提物毒理学的研究方法积累实践经验。方法:根据ICR小鼠单次灌胃给予桦褐孔菌醇提物毒性试验LD50为5865mg/kg体重,人临床拟用日剂量:1000mg/d（13mg/kg体重）及国家食品药品监督管理局2014年5月颁发的《药物重复给药毒性试验技术指导原则》,桦褐孔菌醇提物按大鼠给药容积（1ml/100g体重）及每天给药频率（1次/天）折算设计三个剂量组,分别为500、1000、2000mg/kg/d（约为临床拟用日剂量的38.5、77、154倍）,一个溶剂对照组（同体积的纯水）。每组20只SD大鼠,雌雄各10只,每日灌胃给药1次,每周给药7天,连续给药十三周。试验期间对大鼠的外观、行为、体重、摄食量等各项指标进行检测,分别于给药十三周结束进行血液学、血液生化学及尿常规等各项指标检测,并进行组织病理学检查和代谢组学研究。结果:（1）桦褐孔菌醇提物对SD大鼠临诊主要症状的影响与对照比较,桦褐孔菌醇提物各给予雄性SD大鼠,其摄食量均不同程度减少,其中给药后2～4、6、7和9～13周差异显着（P<0.05）或极显着（P<0.01）。高剂量给予雄性SD大鼠,其体重不但不同程度的低于未给药的对照大鼠,而且程度不同的低于桦褐孔菌醇提物低剂量和中剂量给予大鼠,其中给药后第2、4和10～13周差异显着（P<0.05）。桦褐孔菌醇提物各给予SD大鼠,其脾脏脏体比均显着（P<0.05）高于对照大鼠。桦褐孔菌醇提物给予雄性SD大鼠脏体比除肾上腺外,其余被检器官脏体比均程度不同的较对照大鼠有所增加。睾丸和附睾脏体比,桦褐孔菌醇提物各给药SD大鼠均显着（P<0.05）或极显着（P<0.01）高于对照大鼠,且高剂量雄性大鼠睾丸脏体比又明显（P<0.05）高于低剂量和中剂量给予大鼠;桦褐孔菌醇提物给予雌性SD大鼠,其子宫脏体比中剂量和高剂量组均显着（P<0.05）或极显着（P<0.01）高于对照组和低剂量组,且高剂量组又明显（P<0.05）高于低剂量组。桦褐孔菌醇提物各给予SD大鼠被检脏器的脏脑比均不同程度的较对照大鼠增加,其中肝脏脏脑比明显（P<0.05）高于对照大鼠。雄性SD大鼠睾丸脏脑比,高剂量给予大鼠显着（P<0.05）高于中剂量大鼠;雌性SD大鼠子宫脏脑比,中剂量和高剂量给予大鼠均显着（P<0.05）或极显着（P<0.01）高于对照和低剂量给予大鼠。（2）桦褐孔菌醇提物对SD大鼠临诊主要理化指标的影响除桦褐孔菌醇提物高剂量给予雄性SD大鼠,其尿液白细胞和p H两项指标与中剂量给予大鼠比较显着性降低（P<0.05）,桦褐孔菌醇提物高剂量给予雌性SD大鼠高剂量组,其尿液白细胞数量与对照大鼠比较显着（P<0.05）降低外,其余各组之间未见显着差异（P>0.05）。桦褐孔菌醇提物给予雄性SD大鼠,其血液RBC、WBC数量随给药剂量的增大呈增加趋势,而MONO百分数随给药剂量的增大呈降低趋势;雌性SD大鼠给予桦褐孔菌醇提物后,其血液MCV、MCH、RET值随给药剂量增加显着增高,NEUT百分比桦褐孔菌醇提物高剂量组明显高于对照组和中剂量组,LYMPH百分比桦褐孔菌醇提物高剂量组程度不同的低于对照、低剂量和中剂量给予组,MONO百分比随给药剂量增加明显降低。桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠,其血液凝血因子均未见统计学差异（P>0.05）。桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠,其血清TG和CHOL含量虽然低于对照大鼠,且其值变化与桦褐孔菌醇提物剂量呈现一定的负相关,但均未见统计学差异（P>0.05）。桦褐孔菌醇提物各给予大鼠,其血液TBIL、TP、ALB值低于对照大鼠,其中,除高剂量给予雄性SD大鼠TBIL值、中剂量和高剂量给予大鼠ALB值显着（P<0.05）低于对照大鼠外,其余各组之间统计学差异均不显着（P>0.05）。桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠,高剂量给予大鼠,其血清CK值显着（P<0.05）低于其余各组大鼠,而AST值显着（P<0.05）低于对照大鼠,其余均未见统计学差异（P>0.05）。桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠,其血清Crea含量与对照组比较均有不同程度的降低,其中低剂量给予雄性SD大鼠明显降低（P<0.05）,高剂量给予雌性SD大鼠降低尤为显着（P<0.01）;与对照大鼠比较,桦褐孔菌醇提物给予雄性SD大鼠,其血清Urea含量均呈现不同程度的增加,其中高剂量给予大鼠显着（P<0.05）或极显着（P<0.01）高于对照、低剂量和中剂量给予大鼠。桦褐孔菌醇提物低剂量给予雄性SD大鼠,其血液Glu含量明显（P<0.05）低于对照大鼠,桦褐孔菌醇提物高剂量给予大鼠,其血液Glu含量不但极显着（P<0.01）低于对照大鼠,而且也明显（P<0.05）低于低剂量和中剂量给予大鼠,其余未见显着性差异（P>0.05）。（3）桦褐孔菌醇提物对SD大鼠器官组织病理学变化的影响桦褐孔菌醇提物中剂量和高剂量给予SD大鼠,与对照组比较,其肝脏可见不同程度的炎性细胞浸润、胆小管上皮肿胀、肝细胞萎缩等组织病理改变;高剂量给予大鼠,其肾脏同样可见不同程度的炎性细胞浸润、肾小管上皮肿胀、间质增生等;桦褐孔菌醇提物中剂量和高剂量给予雄性大鼠,其前列腺呈现不同程度的炎性细胞浸润;雌性大鼠的子宫腺体和内膜均增生等。（4）桦褐孔菌醇提物对ICR小鼠精子形态及其运动的影响桦褐孔菌醇提物给予ICR小鼠后,各给药组和对照组小鼠的精子畸形率均极显着（P<0.01）低于阳性药组,其余各组之间未见统计学差异（P>0.05）。经计算机辅助精子分析仪检测,与对照小鼠相比较,桦褐孔菌醇提物给予ICR小鼠的精子活动能力各项被检指标均未见统计学差异（P>0.05）,各给药组之间亦未见差异性改变（P>0.05）。（5）桦褐孔菌醇提物对ICR小鼠染色体突变的影响微核试验显示:阳性对照组与桦褐孔菌醇提物各给药组、阴性对照组比较,其染色体微核率极显着（P<0.01）增多,其余均未见统计学差异（P>0.05）。（6）桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠后潜在生物标志物代谢轮廓变化SD大鼠应用桦褐孔菌醇提物后,依据S-plot和VIP-plot结果,选取VIP>1的差异变量,再利用t检验对筛选得到的差异变量进行组间分析,只有P<0.05的差异变量才被认为是潜在的生物标志物,通过比对这些潜在生物标志物的峰面积发现:39个差异性代谢产物存在于尿液潜在的干预靶点中,其中8个上调、31个下调,经Meta PA识别显着富集通路分析,该类靶点参与了精氨酸生物合成、甘油脂代谢、磷脂酰肌醇信号系统、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、嘧啶代谢、初级胆汁酸生物合成、氨基酰-t RNA生物合成、甾体激素生物合成等10个代谢通路的调节;38个差异性代谢产物存在于血清潜在的干预靶点中,其中15个上调、23个下调,经Meta PA识别显着富集通路分析,此类靶点参与了甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、糖基磷脂酰肌醇（GPI）-锚定生物合成、甘油脂代谢、戊糖和葡萄糖酸相互转化、鞘脂代谢、磷脂酰肌醇信号系统、初级胆汁酸生物合成等10个代谢通路的调节;存在于肝脏潜在的44个差异性代谢产物干预靶点中,20个上调,24个下调,经Meta PA识别显着富集通路分析,该类靶点参与了甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、糖基磷脂酰肌醇（GPI）-锚定生物合成、甘油脂代谢、类固醇激素生物合成、鞘脂代谢、磷脂酰肌醇信号系统、谷胱甘肽代谢、花生四烯酸代谢等10个代谢通路的调节;存在于肾脏潜在的28个差异代谢产物干预靶点中,11个上调、17个下调,经Meta PA识别显着富集通路分析,该类靶点参与了甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、初级胆汁酸生物合成、牛磺酸和牛磺酸代谢、α-亚麻酸代谢、糖基磷脂酰肌醇（GPI）-锚定生物合成、鞘脂代谢、花生四烯酸代谢等8个代谢通路的调节。结论:1.桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠,使SD大鼠脂质代谢和肝脏微循环代谢相关通路发生变化。2.桦褐孔菌醇提物给予ICR小鼠,未发现生殖毒性和遗传毒性。3.亚慢性毒性试验结合代谢组学研究表明,肝脏和肾脏为桦褐孔菌醇提物的主要靶器官。
张晓玉[2]（2020）在《基于智能手机和微流控芯片的环境与生物样品的检测方法研究》文中提出微流控技术因其具有低成本、低消耗、易携带、集成化、自动化等特点成为近年来受到广泛关注的分析技术之一,而随着智能手机、平板电脑等便携设备的不断普及和发展,将其用于分析与检测逐渐成为分析方法的新趋势之一。本工作目的是建立一种基于智能手机的微流控检测平台,并应用于环境污染物和生物样品中酶含量的检测,本论文主要分为以下四章:第一章:本章主要分为三节,第一节对微流控技术进行了概述,主要介绍了微流控技术的发展历程、微流控芯片制造材料、制作方法及其在食品安全、疾病诊断等多个领域的应用;第二节对基于智能手机的检测平台进行了概述,主要介绍了智能手机作为检测平台的原因、分析方法特点和基于智能手机的传感器在分析检测中的应用;第三节对基于智能手机和微流控芯片的比色分析进行了概述,并介绍了该方法在环境、食品安全和生物样品中的应用。第二章:本工作搭建了一个低成本、检测时间短的便携化微流控智能手机检测平台,并基于该平台建立了一种高效快速的测定室内空气中甲醛含量的方法。与大部分利用电子传感芯片的商品化甲醛检测器不同的是,本工作是基于4-氨基-3-联氨-5-巯基-1,2,4-三氮杂茂（AHMT）和甲醛的特异性化学显色反应进行测定的,能够避免其它气体的干扰。通过实验获得了最佳测试条件:AHMT体积为50μL,高碘酸钾用量为15μL,反应时间为5 min。利用该方法对空气中的甲醛含量进行了检测,其线性范围为62.6 mg/L-132 mg/L,检出限2.33 mg/L,并且通过不同型号手机对同种溶液的考察,证明了该方法的普适性,并与国家标准检测方法进行了对照,结果一致。第三章:本工作对自行搭建的低成本智能手机检测设备和微流控芯片进行了改进。通过考察微流控芯片的通道形状、长度和前处理方法对检测灵敏度的影响,确定了检测效果最佳的条件。利用透镜将上一个工作所用的分离式检测平台改进为一体式的检测设备,缩小了设备的体积并降低了设备的成本。随后对改进后的检测平台的性能进行了评估,结果表明检测灵敏度得到了提高,且检测效果不受待测体系颜色的影响,可以将该设备应用于不同物质的比色检测中。第四章:碱性磷酸酶（ALP）活性是很多疾病的指示信号,测定血清中的ALP活性可判断个体的健康状况。本工作利用自行搭建的一体化检测平台实现了碱性磷酸酶的活性检测。由于p-NPP在碱性条件下能被ALP催化成对硝基苯酚,产物为淡黄色溶液,通过考察不同反应条件对实验的影响,选择了反应的最佳条件:反应时间为15 min,终止液用量（即为氢氧化钠溶液）为50μL。利用智能手机和微流控芯片对血清中的碱性磷酸酶活性进行了检测,线性范围为0.132 mmol/L-0.992 mmol/L,检出限为9.13μmol/L,回收率为85.32%-95.02%,并与商用试剂盒进行了对照,结果一致。
孙一鑫,王丽,史新宇,孙秀翠,林云英[3]（2019）在《体脂率对继发不育男性精液质量及体外受精结局的影响》文中研究指明目的探究男性体脂率对继发不育患者精液质量及体外受精结局的影响。方法采用历史性队列研究方法分析2016年1月至2018年1月就诊于潍坊医学院附属医院生殖医学中心的1 853名继发不育的男性。根据体脂率（BFP）分为低脂肪组（BFP<15%,n=90）、普通组（15%≤BFP<20%,n=458）、轻度肥胖组（20%≤BFP<25%,n=765）、肥胖组（BFP≥25%,n=540）,收集各组患者的精液常规参数及精浆锌（ZN）浓度化验指标,计算各组受精率、优质胚胎率以及精子低渗肿胀试验（HOS）、精浆弹性硬蛋白酶（PMN）正常比例,分析各组间差异,并对各项参数间的关系进行皮尔逊相关性分析。通过多元逐步回归分析得出影响受精率、优质胚胎率及精子前向运动百分率（PR）的主要因素。结果 （1）低脂肪组优质胚胎率、精液量均显着低于其余三组（P<0.05）;肥胖组受精率显着低于其余三组（P<0.05）;肥胖组PR、精子活动率显着低于普通组（P<0.05）;轻度肥胖组、肥胖组HOS正常比例显着低于普通组（P<0.05）。（2）相关性分析表明,受精率与精液量呈负相关,与精子浓度、精子形态呈正相关（P<0.05）;优质胚胎率与精子浓度、PR、精子活动率、精子形态、精浆锌浓度呈正相关（P<0.05）;BFP与精液量呈负相关（P<0.05）。（3）多元回归分析显示,受精率的独立影响因素为年龄、非前向运动精子百分率（NP）、精子浓度、精液量（P<0.05）;优质胚胎率的独立影响因素为年龄、HOS、精子浓度（P<0.05）;PR的独立影响因素为BFP、精子活动率、NP、HOS、年龄、体重（P<0.05）。结论体脂率过高或者过低,均会对精液质量及体外受精结局产生不良影响,此可能为其不育的原因之一。
伍思霞[4]（2018）在《静电场暴露非热效应动物实验研究》文中研究指明随着特高压直流输电技术的快速发展,直流输电电压等级不断升高,输电线路周围的环境静电场水平也随之升高,静电场是否会对人体产生不利影响备受公众关注。由于目前尚无国家或国际标准给出静电场暴露标准限值,相关环境问题投诉处理工作困难重重。考虑到中国在特高压直流输电方面工程体量大、技术水平高,国际电工委员会（IEC）、世界卫生组织（WHO）等机构多次倡议由我国主导开展特高压直流输电线路静电场暴露标准限值研究。根据电磁环境标准制定相关准则,动物实验依据是制定静电场标准限值必不可少的依据之一,然而目前静电场非热效应相关的动物实验研究较为缺乏,为推进静电场标准限值制定工作,亟需深入开展相关动物实验研究。本研究分别在已建成投运的±800kV特高压直流输电线路下以及实验室可控条件下开展静电场暴露非热效应动物实验,根据静电场暴露特性以及不同环境特点,分别研究建立了实际输电线下和实验室可控条件下静电场非热效应动物实验造模方法,从方法学角度为今后静电场暴露动物实验研究提供实验设计参考。在确定造模方法基础上,分别在以上两种环境下开展动物实验,并以实验室研究为重点,研究不同暴露强度（名义80kV/m、50kV/m、40kV/m）和暴露时间（7d、14d、21d、35d、49d）下静电场对实验动物生长、行为、血液、肝脏、肾脏、生殖功能等方面的影响,探索静电场潜在的非热效应,同时进一步通过转录组测序技术,从分子生物学水平探究静电场非热效应的生物作用机制,主要研究结论如下:（1）血液方面影响研究结果表明,名义80kV/m（实际55.3±2.7kV/m）静电场暴露可导致小鼠白细胞数量显着降低,从而影响小鼠免疫功能,其机制可能与长期应激导致的神经内分泌功能异常有关。静电场作为一种外环境异常胁迫因子,可能引起小鼠应激反应,导致下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）激活,皮质酮等应激激素分泌增加,而皮质酮可引起淋巴细胞凋亡,最终导致白细胞数量减少。此外,名义50kV/m、40kV/m（实际34.1 ±1.7kV/m、27.1 ±1.4kV/m）静电场暴露对小鼠白细胞数无显着影响,表明静电场对受体免疫功能的影响与暴露强度密切相关。（2）肝脏影响研究结果表明,短期静电场暴露会导致小鼠肝脏受损,且与暴露强度密切相关,主要表现为个别肝功能指标显着升高,伴随肝脏氧化应激指标异常,说明破坏氧化还原体内平衡可能是静电场非热效应的机理之一。随着暴露时间的增加,肝脏损伤可逐渐恢复,表明一定时间后小鼠可对外界静电场产生适应,这可能与机体的自我调节机制有关。（3）肾脏影响研究结果表明,名义80kV/m静电场暴露会影响小鼠肾脏功能,表现为暴露35d后,小鼠血清肌酐（CREA）含量显着升高,暴露结束后电镜结果显示实验组小鼠肾小球部分足突融合成片状,偶见基底膜增生,表明较高强度静电场暴露可能会对小鼠肾小球的滤过作用产生影响。（4）雄性生殖影响研究结果表明,名义80kV/m静电场暴露可造成小鼠睾丸生精细胞内线粒体脊缺失,呈现空泡化,但这一改变并不影响小鼠精子的运动能力,其原因可能与支持精子运动的大部分能量来自于细胞质中的糖酵解过程而非线粒体的呼吸作用有关。（5）转录组测序研究结果表明,名义80kV/m静电场暴露49天后,和对照组小鼠相比,实验组小鼠肝脏和睾丸分别有198、174个基因表达量发生了显着变化,其中有20个基因在肝脏和睾丸中表达均发生了显着变化,表明这些基因可能普遍参与了静电场非热效应的发生过程。KEGG分析结果表明,对囊泡循环相关的物质传递过程的影响和对MHC分子介导的免疫应答过程的影响可能是静电场非热效应的两大内在生物作用机制,可一定程度上解释静电场作用下受体白细胞数量下降这一实验结果。本研究立足于国内外特高压直流输电技术快速发展,但尚未制定静电场暴露限值相关国际或国家标准这一实际,对静电场长期暴露非热效应及其作用机制展开研究,研究成果可从动物实验依据角度为直流输电线路静电场暴露标准制定提供科学支撑。
焦瑞宝[5]（2015）在《弱精症患者精子运动参数及DNA碎片化指数特征研究》文中提出目的 了解弱精症患者精子运动参数和精子核DNA碎片化指数的变化情况,探讨精子前向运动率（PR）与精子活率、精子速度及精子运动轨迹特征参数的关系,研究精子DNA碎片化指数与精液常规参数、运动参数的相关性。为治疗和预防男不育症提供基础资料。方法收集41例弱精症（精子浓度≥15×106/ml,PR<32%）和48例活力正常男性不育患者（精子浓度≥15×106/ml,PR≥32%）的精液,常规检测参数和计算机辅助精子质量检测系统测定精子运动速度、运动轨迹特征参数；采用吖啶橙荧光染色分别检测上述两组所有89例男性不育患者的精子核DNA碎片化指数；将精液标本制片行diff-quick染色,采用计算机辅助精子形态分析系统分析200个以上精子,并对结果进行人工校正。分析比较弱精症和活力正常男性不育患者精液常规参数、精子运动参数和精子核DNA碎片化指数；对弱精症组和活力正常不育症组前向运动率（PR）与精子活动率、精子运动速度、运动轨迹特征参数进行线性相关和线性回归分析；采用多元线性回归模型的回归系数具体分析弱精症组和活力正常不育症组的前向运动率与其他精子质量参数的相关性；并探讨精子核DNA碎片化指数与精子常规参数、精子运动参数之间的相关性。结果弱精子症患者的精子浓度为69.0±49.1×106/ml、精子总数为203±159×106、活动率为60.8±15.7%、前向运动率（PR）为21.1±8.0%、平均路径速率（VAP）为10.7±2.Sμm/s、曲线速度（VCL）为20.6±4.9μm/s、直线速度（VSL）为6.3±2.2μm/s、直线性（LIN）为29.9±8.1%、摆动性（WOB）为51.4±5.8%、前向性（STR）为57.2±10.4%、头侧摆幅度（ALH）为0.53±0.12μm、鞭打频率（BCF）为3.20±0.85Hz和平均角位移（MAD）为14.2±3.2°显着低于活力正常不育患者的精子浓度98.8±38.2×106/ml（P<0.05）、精子总数281±171×106（P<0.05）、活动率82.0±7.9% （P<0.01）、PR45.1±8.5%（P<0.01）、VAP18.5±3.0μm/s（P<0.01）、 VCL30.7±5.3μm/s（P<0.01）、VSL12.0±2.3μm/s（P<0.01）、LIN39.6±7.0（P<0.01）、WOB60.5±5.0%（P<0.01）、STR65.1±7.2%（P<0.01）、ALH0.72±0.13μm （P<0.01）、BCF5.07±0.81Hz（P<0.01）和MAD17.8±2.5°（P<0.01）;而DNA碎片化指数（DFI）为17.9±12.5%,显着高于活力正常不育症组的8.5士6.4%,（P<0.01）。弱精症组PR与精子活率、VAP、VCL、VSL、ALH、LIN、WOB、MAD、 BCF、STR的相关系数分别为0.753、0.857、0.632、0.950、0.521、0.813、0.840、0.578、0.727、0.781,线性回归方程分别为y=1.480x+29.505,y=0.304x+4.267, y=0.383x+12.529,y=0.261x+0.748,y=0.008x+0.369,y=0.823x+12.554, y=0.613x+38.505,y=0.231x+9.270,y=0.078x+1.563,y=1.010x+35.866,相关性分析显示,相关有显着性（P<0.001）；活力正常不育症组PR与精子活率、VAP、 VCL、VSL、ALH、LIN、WOB、BCF的相关系数为0.571、0.868、0.632、0.843、0.440、0.319、0.431、0.682,线性回归方程为y=0.531x+58.051,y=0.311x+4.511, y=-0.393x+13.030,y=0.228x+1.765,y=0.007x+0.407, y=0.264x+27.695 y=0.254x+49.043,y=0.065x+2.130,相关性分析显示,相关有显着性（P<0.05）,而与STR、MAD的相关系数为0.182、0.271,线性回归方程为y=0.154x+58.102, y=0.080x+14.243,相关性分析显示,相关没有显着性（P>0.05）。弱精症组DFI、与PR、VAP、VCL、VSL、BCF的相关系数分别为-0.423、-0.380、-0.335、-0.374、-0.401,相关性检验显示,相关有显着性（P<0.05）；与年龄、精子浓度、精液量、精子总数、精子活率、ALH、LIN、WOB、MAD、STR和正常形态率的相关系数分为0.080、-0.053、0.174、0.046、-0.299、-0.221、-0.291、-0.289、-0.297、-0.302、0.176,相关没有显着性（P>0.05）。活力正常不育症组DFI与精子总数相关系数为0.446,相关显着性（P<0.05）；与年龄、精子浓度、精液量、精子活率、PR、VAP、VCL、VSL、ALH、LIN、WOB、MAD、BCF、STR、正常形态率的相关系数分别为0.116、0.129、0.337、-0.136、-0.222、-0.198、-0.088、-0.232、0.029、-0.156、-0.210、0.030、-0.178、-0.106、-0.168,相关性检验显示,相关没有显着性（P>0.05）。结论弱精子症患者除了表现为常规检查中的精子活力低下外,还伴有精子浓度及总数下降,精子运动特征性参数下降以及精子核DNA碎片化指数的增加；精子运动参数与前向运动率存在高度的相关性,是对精子运动能力详细的评价指标；精子核DNA碎片化指数只与弱精症患者精子活率、精子运动速度呈负相关,与其他精液参数呈弱相关,可作为一个评价精子质量的独立指标。
韩刚[6]（2012）在《GLP条件下临床病理学规范化建设与实践》文中认为规范性建设是药物安全性评价（GLP）存在的根本条件之一，规范性建设水平更是GLP水平的具体体现。临床病理学作为药物安全性评价之组成部分，在药物毒性评价、时效特点观察等方面起着举足轻重的作用。因此，如何保证临床病理学的数据达到国际互认，从而有力支持我国GLP突破国际技术壁垒，走向世界并最终达到国际认证已成为我们迫切需要解决的课题。由于我国GLP起步较晚，且限于国内的环境和条件，临床病理学在硬件和软件等多方面与国际先进水平有较大的差距。随着我国GLP的飞速发展和硬件的改善，一大批自动化分析仪器的装备和普及，以及一系列指标的测定方法的标准化，使临床病理学的标准化建设成为可能。本研究即以ISO15189和ISO17025为基础，在硬件、软件层次上针对上述不足之处开展临床病理学的规范化建设，提升本中心GLP规范性建设水平，期望为国内GLP临床病理实验室的标准化做初步的探索和尝试，为达到国际GLP临床病理实验室的数据互认打下坚实的基础，为最终实现与国际GLP临床病理实验室的接轨提供依据。硬件建设是临床病理学标准化建设的基础，也是与国际实验室接轨的必要条件。本实验室受重大新药创制大平台资金的支持，按OECD和FDA等GLP法规和指导原则的要求，购买了生化分析仪、免疫分析仪、流式细胞仪、PCR等一批先进高端仪器，并达到常规的主要检测仪器均有备份仪器，使本实验室的硬件条件基本满足了OECD和FDA等GLP法规的要求，满足了药物评价研究发展的要求，也为生物技术药物的安全性评价提供了保证。在大批高端仪器设备装备的基础上，自仪器的日常管理入手，在仪器购置、安装、使用、人员培训、维护、维修、SOP制定等环节制定符合现代GLP要求的管理制度。建立仪器设备的计量检定管理制度和期间核查制度，并按要求对天平、移液器等进行定期的计量和期间核查。建立了完善的大型仪器的验证制度，并对7180自动生化仪、SYSMEX XT-2000iv血液分析仪、Real-time PCR仪和免疫分析仪进行了安装验证、操作验证和性能验证，并每年进行性能验证。保证了仪器的良好运行，检测结果的准确可靠。本研究以ISO15189和ISO17025为基础，建立了临床病理学组织管理体系、人员分工和培训体系、质量控制体系，并建立了分析前、分析中和分析后的全程质量控制模式，对临床病理学分析标准化的统一，对提高我国GLP研究水平，进一步建立健全动物实验室的室内和室间质量控制体系具有一定的意义。实验室数据信息化管理系统的采用是提高数据采集及处理的信息化水平的关键措施。本中心与京师利源共同开发了Easy GLP信息管理系统，其是基于Windows平台，采用PHP4语言编写的基于MySQL4.0.26数据库的管理系统。本研究对Easy GLP按电子数据管理法规要求进行了安装、操作和系统验证，并进行了数据的比对。结果表明该系统安装正常，界面良好，各种菜单操作正常，各级权限管理良好，数据修改痕迹验证有效，可同时满足用户小于100时访问服务器上的需求。通过数据比对表明，Easy GLP实验室数据管理系统采集的临床病理学数据和仪器产生的原始数据完全一致，部分t检验数据与SAS软件包统计数据比对除因二者采用的比较方法不同可能出现少量假阳性结果外，其余统计结果基本一致，表明Easy GLP实验室信息管理系统可以保证数据的准确可靠，统计分析结果的准确权威，保证数据的定期备份和安全，可以大幅度的提高GLP研究的工作效率，是基本符合21CFR Part11电子数据法规管理要求的信息管理系统。实验动物背景数据的建立是临床病理实验室标准化的条件之一，也是国际实验室数据互认的重要标准之一。本研究调取2年内本实验室GLP课题研究中SD大鼠、Beagle犬、恒河猴等安全性评价研究中最常用实验动物对照组正常动物的基本临床病理学数据，按不同种属、年龄和性别进行统计分析，并确定各指标的正常参考值，基本建成了临床病理实验动物的背景数据，为国际实验室数据互认提供了依据。以上研究表明，本实验室在硬件和软件两方面按照国际GLP法规和指导原则的要求进行了加强和提高，初步完成了临床病理实验室的标准化建设，为本中心的GLP标准化建设提供了帮助，为国内临床病理实验室的标准化提供了一定的参考，为临床病理学打破国际技术壁垒做出了探索，为与国际接轨并最终达到数据互认打下了一定的基础。
李飞[7]（2010）在《成年男性唯支持细胞综合症睾丸相关蛋白的筛选、鉴定及初步功能研究》文中认为研究背景男性不育一直是困扰全世界的医学难题。随着社会经济的不断发展,男性的生育力却呈现不断下降的趋势,精子的数量和质量都在降低。已婚夫妇的不孕不育率高达10%,其中无精子症是男性不育的常见原因之一。无精子症的病因概括起来分为两大类型：一是睾丸本身的生精功能障碍又称为原发性无精子症或非梗阻性无精子症；二是睾丸的生精功能正常,但由于输精管道的阻塞,精子不能排出体外,这类又称为梗阻性无精子症。原发性无精子症按生精障碍程度不同又可分为唯支持细胞综合症（Sertoli cell-only syndrome SCOS）、生精细胞发育完全阻滞、Klinefelter综合症、生精功能低下等常见病理类型。其中唯支持细胞综合症是睾丸自身生精功能障碍的一个重要类型,在原发性无精子症中占有很大的比例,临床上以第二性征正常的双侧睾丸变小、无精子症、血卵泡刺激素（FSH）升高为特点。其病理特点：睾丸曲细精管生精细胞完全缺失,生精上皮仅由支持细胞组成,同时伴有管周组织轻重不等的纤维化和间质增生。以前对唯支持细胞综合症认识不足,随着睾丸活检和细胞学技术的广泛应用,其诊断率明显提高,但具体病因及发病机制不明确,治疗方法大多是经验式,治疗效果并不令人满意,相当数量的患者最终无法获得自己的后代。显然,唯支持细胞综合症临床治疗方式的突破及治疗效果的改善有赖于基础研究的重大进展,有赖于对唯支持细胞综合症机制的阐明。睾丸是男性最重要的性器官之一,具有产生精子,分泌雄激素等功能。目前对睾丸功能的研究大多停留在单基因水平和基因组水平,在揭示睾丸基因组的精细结构的同时,也凸现出基因数量的有限性和基因结构的相对稳定性,与睾丸功能及相关疾病多变性和复杂性之间存在着巨大反差,促使人们认识到：基因只是遗传信息的载体。所以有必要在生命活动的直接执行者蛋白质领域上加强对成年男性唯支持细胞综合症睾丸的功能的研究。随着人类基因组图谱的完成,一个以“蛋白质组”（proteome）为研究对象的生命科学新时代已经到来。蛋白质组是一个在时间和空间上动态变化着的整体,其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白组成成分、表达水平与修饰状态以及蛋白质之间的相互作用与联系,从而揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。1975年,O’Farrell等建立了双向凝胶电泳技术（two-dimensional electrophoresis,2-DE）。直至现在双向凝胶电泳技术（2-DE）仍然是目前蛋白质组学研究首选的蛋白质分离技术。因睾丸活检取材相对较困难,收集大量无精患者的睾丸活检标本工作量大,另外人睾丸组织标本涉及医学伦理学相关事宜,需要与患者签定知情同意书。迄今为止,国内外关于成年男性唯支持细胞综合症睾丸组织蛋白组学研究的文献尚未发现。成年男性唯支持细胞综合症睾丸组织蛋白组学的研究策略有助于获得成年男性唯支持细胞综合症相关重要功能蛋白。我们遵循医学伦理学原则并尊重患者的知情权,在获得南方医科大学南方医院伦理委员会批准后开展了成年男性无精子症睾丸活检组织标本的收集工作,并得到了多数患者的配合。建立规范和明确的成年无精男性睾丸活检组织标本收集流程,收集成年无精男性睾丸活检组织标本,依据病理诊断结果进行分组,组织库保存备用；提取成年男性唯支持细胞综合症组和生精功能正常组睾丸组织总蛋白,利用双向凝胶电泳联合质谱鉴定技术进行了成年男性唯支持细胞综合症组和生精功能正常组的比较睾丸组织蛋白组研究；筛选,鉴定成年男性唯支持细胞综合症相关重要蛋白质,并对其中的HnRNPL和PRPS2进行免疫组织化学和Western Blotting实验研究其初步功能。目的在于筛选,鉴定成年男性唯支持细胞综合症相关重要蛋白质并进一步研究其和唯支持细胞综合症发生机制的密切关系。研究方法1.样本收集成年无精子症男性睾丸活检组织样本的收集与分组：每例睾丸活检切取组织约5 mm×3mm×4mm大小,取材后立即置入冻存管中后,液氮保存.依据病理诊断结果进行分组。患者自愿捐献并签定知情同意书。本研究经南方医院伦理道德委员会批准。到开展实验为止,我们已收集样本102例,其中生精功能正常或基本正常的睾丸组织61例,轻度生精功能障碍7例,中度生精功能障碍4例,重度生精功能障碍3例,唯支持细胞综合症20例,生精细胞发育不完全阻滞4例,生精细胞发育完全阻滞1例,Klinefelter综合症2例。2.蛋白标记物的筛选2.1睾丸活检组织总蛋白的提取：随机抽取出生精功能正常组和唯支持细胞综合症组睾丸组织标本各10例,采用液氮循环冻融法提取样本总蛋白：取出冻存的睾丸组织标本,室温放置溶解,液氮冷冻,研磨成粉末后加入3～5倍体积的裂解液（7 mol／L尿素,2 mol／L硫脲,65mmol/L二硫苏糖醇,40%CHAPS,0.5% IPG缓冲液,复合蛋白酶抑制剂）后匀浆,混悬液室温放置1h以使蛋白充分溶解,14000×g 4℃离心1h,收集上清,Bradford法测定蛋白浓度,分装100μL／管,保存于-80℃冰箱备用。2.2双向凝胶电泳分离总蛋白：蛋白样品用含7M尿素,2 M硫脲,4.0%CHAPS,65 mM DTT和0.5% IPG buffer的上样缓冲液共300μL充分混合,用17cm IPG干胶条采取被动泡涨13h,等电聚焦条件为250 V 3h,500 V 1h,1000 V 1h,5 000 V 3h,10 000 V 60 KVh,500 V 3h。聚焦完毕后将胶条以胶面朝上的方式置于2.0% DTT平衡液中15 min,然后再置于2.5%碘乙酰胺平衡液中15 min,取出后放在用电泳缓冲液湿润的滤纸上以吸去表面多余的液体后,将平衡后的胶条移至0.75 mm厚浓度为10.0%的均一SDS-PAGE胶上端进行二向电泳,条件为12 mA／胶30 min,24 mA／胶恒流,直至溴酚蓝达胶底线。2.3银染40.0%乙醇,10.0%冰醋酸固定2次,每次15 min;30.0%乙醇,0.2%Na2S2O3,6.8%乙酸钠敏化30min;蒸馏水洗3次,每次5 min;2.50‰AgNO3染色20min;蒸馏水洗2次,每次1 min;2.5%Na2CO3,0.04‰甲醛显影至蛋白质点清晰;立即加入5.0%冰醋酸终止10 min；蒸馏水洗3次,每次5min;最后用30.0%乙醇,4.6%甘油保存。2.4凝胶图像扫描及分析凝胶通过UMAX PowerLook 1100投射扫描仪进行扫描获取2-DE凝胶图像,利用Melanie 4分析软件对图像进行分析,产生差异表达蛋白点数据信息。3.相关蛋白在临床无精患者睾丸组织中的表达3.1差异表达蛋白的Western Blot验证：重新选取唯支持细胞综合症组和生精功能正常组睾丸组织提取蛋白,BCA法测蛋白浓度。每孔加入约30μg蛋白,10%SDS-PAGE凝胶电泳,蛋白转移到PVDF膜上,5%脱脂奶粉的T-TBS室温封闭1 h,一抗稀释于封闭液中,4℃摇晃过夜,TTBS漂洗3次,二抗稀释于封闭液中,室温摇晃1 h, TTBS漂洗3次；蛋白信号由ECL化学发光试剂盒检测,压底片曝光后显影。进行灰度分析,计算待测指标与内参GAPDH灰度的比值,以检测初筛出的差异蛋白在生精功能正常和生精功能异常两组间的表达丰度差异。3.2差异表达蛋白的免疫组织化学技术验证：应用我们收集南方医院泌尿外科2005年1月-2008年10月睾丸组织活检病理石蜡标本进行研究。选择生精功能正常组和唯支持细胞综合症组中睾丸组织结构完整,色清晰的标本,对其相对应的石蜡包块,再行5μm连续切片,将切片裱于涂有3-氨基丙基三乙氧基硅胶烷（APES）的载玻片上。石蜡切片脱腊入水,接着用3%H2O2—甲醇10分钟后,水洗,再用PBS洗3次后,加生物素（Biotin）标记的特异性一抗,37℃30分钟,置湿盒内。PBS洗3次,加酶标记的卵白素（Avidin）,37℃30分钟,PBS洗3次,DAB显色后,流水冲洗,复染、脱水、封片。研究结果1.对样品处理、上样量,胶条的选择等步骤进行了一系列的优化后成功地获得了人睾丸组织分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。2.对比成年男性唯支持细胞综合症组和生精功能正常组睾丸组织蛋白图谱我们共发现18个差异蛋白点,其中16个在唯支持细胞综合症组高表达,2个在唯支持细胞综合症组低表达。并对差异点进行质谱鉴定,根据质谱鉴定结果及数据库搜索发现多个蛋白表达变化可能与睾丸的生精功能有着密切的联系。3. HnRNP L和PRPS2的Western blotting结果比较发现HnRNP L在唯支持细胞综合症组中的表达水平要低于生精功能正常组,而PRPS2在唯支持细胞综合症组中的表达水平要高于生精功能正常组。通过两组的免疫组织化学结果也发现：HnRNPL在各级生精细胞细胞核及支持细胞胞核中表达,染色较正常组弱,提示HnRNPL在唯支持细胞组中表达下调。而PRPS2在各级生精细胞细胞胞浆中表达,染色较正常组强,提示PRPS2唯支持细胞组中表达上调。Western blotting结果和免疫组织化学实验结果都是与双向凝胶电泳的结果是一致的。结论1.建立了稳定性,重复性较好的人睾丸组织蛋白组双向凝胶电泳技术和方法,为其及相关疾病的蛋白质组学进一步研究奠定了基础；2.首次比较了成年男性唯支持细胞综合症组和生精功能正常组睾丸组织蛋白图谱；3.初步分析了18个差异蛋白点,其中16个在唯支持细胞综合症组高表达,2个在唯支持细胞综合症组低表达；并对其进行质谱鉴定；4. HnRNP L和PRPS2免疫组织化学和Western Blotting结果与双向凝胶电泳结果相符,为进一步研究奠定了基础。
张伟[8]（2008）在《一、邻苯二甲酸酯类物质对雄性大鼠生殖系统的毒性研究 二、电阻抗成像系统监护小猪腹腔内出血》文中研究表明研究背景及目的环境内分泌干扰物是指一些可能影响负责机体自稳、生殖和/或行为的天然激素的合成、分泌、转运、结合、作用或消除的外源性物质,具有亲脂性、不易降解、残留期长等特点。邻苯二甲酸酯（Phthalate Acid Esters,简称PAEs,别名酞酸酯）是一类重要的脂溶性有机化合物质,是环境内分泌干扰物的一种,因广泛使用,已造成了全球性的严重污染。环境中的邻苯二甲酸酯类物质降解十分缓慢,人类可通过饮食、日常消费品、医疗用品暴露于邻苯二甲酸酯类（PAEs）物质。它对动物和人类的生殖与健康有巨大的影响。目前研究发现PAEs可以造成睾丸损害,发育不良如隐睾、睾丸Leyding细胞增生或出现腺瘤和附睾发育不全,血清雄激素水平下降等,但目前研究均为短期急性的毒性实验,尚无其毒性效应的长期观察。而且前列腺作为人体最大的性腺附属器官,是性激素的靶器官之一。前列腺的生长发育除胎儿期的发育外,在出生后仍在不断生长发育,它是个漫长过程,整个过程均受性激素调节。但该类物质如何影响前列腺的生长、发育,是否与前列腺增生、前列腺癌等前列腺疾病发生有关,其影响机制是否与前列腺表面雌、雄受体分布发生改变有关尚不清楚,国内外均无相关文献报道。因此,本课题设计通过使实验大鼠暴露于不同剂量下邻苯二甲酸酯类物质,观察该物质对两代大鼠生殖系统毒性效应,重点观察前列腺的生长、发育。以期发现在环境内分泌干扰物的作用下,雄性大鼠生殖系统受到影响的长期效应,以及前列腺生长、发育的改变。为最终阐明PAEs物质对于前列腺生长发育影响的分子机制提供了依据。研究方法将第一代（F0）和第二代（F1）雄性、雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠分别在出生后第5周、出生后第4周通过皮下注射的方式暴露在剂量分别为50mg/（kg.d）、250 mg/（kg.d）、500 mg/（kg.d）的邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）下,观察亲代的临床症状、体重变化、激素水平、生殖能力、脏系指数和睾丸、前列腺病理组织学等指标,观察子代的临床症状、泌乳期体重变化、肛门生殖器的距离、睁眼时间和脑重量等指标。研究结果F0、F1亲代大鼠高剂量组与对照组相比,体重增长均受到抑制,F1亲代大鼠进食量减少;F1亲代大鼠的高剂量组生育指数和成活数量明显下降,中剂量组的交配时间缩短;F0、F1亲代大鼠高剂量组的精子活动度和精子记数水平显着降低,F0、F1亲代大鼠睾酮水平在高剂量组时增高,其余激素水平各组与对照组相比无统计学差异;F0亲代雄性大鼠各组与对照组相比脏器系数无统计学差异,F1亲代大鼠高剂量组的睾丸脏器系数与对照组相比减小,前列腺和肝脏增大。病理切片显示,F0、F1亲代大鼠在高剂量组生精上皮严重受损,曲细精管萎缩,生精细胞减少或缺如;在前列腺各剂量组出现部分腺体增生,部分腺上皮萎缩,腺腔扩大,并有剂量依赖性;F1、F2仔鼠在高剂量组出生后1周体重增长即受到抑制,大脑脏器系数显示增大;F1、F2仔鼠出生后肛门生殖距离在高剂量组出现缩短。研究结论（1）DEHP对雄性大鼠的生殖系统具有毒性,这种毒性效应随着时间的延长会逐渐增加,并可能使得下一代更易于受到影响。（2）前列腺出现腺体的增生,并有剂量依赖性。研究背景及目的腹腔内出血常见于腹部外伤和腹部手术后的病人。腹腔内出血的多少,内脏损伤严重性和临床治疗的功效密切相关,目前除通过物理和实验室检查判断外,B超、CT、MRI是常用的检查手段,但它们都有各自的优势和不足。在临床上尚缺乏一种可以实时的、灵敏的监护设备,能够及时掌握病人出血情况,从而做出合理治疗。电阻抗断层成像（electrical impedance tomography , EIT）技术是以目标体内电阻抗的分布或变化为成像目标的一种新型功能成像技术,其基本原理是采用一定的交流电场对成像目标进行无创激励,通过体表检测其电位分布,采用图像重构算法重构出目标内的电阻抗分布或变化图像。由于其不使用核素或射线,对人体无害,并且可以多次测量,重复使用,是一种廉价无损伤监测技术,所以较适合作为对患者长期、连续监护的医学监护设备。因此本课题组通过建立腹腔内出血的动物模型,使用EIT设备进行监护,观察监护效果,为EIT在未来应用于临床打下基础。研究方法建立动物腹腔内出血的动物模型（1）采用体质量在20-30 kg,腹围与人近似的小猪为实验动物,通过B超定位经腹腔穿刺置套管于小猪肝脏的下缘,用电子输液泵分别按恒定的速度注入同种异体血,以模拟肝脏区域出血;（2）采用体质量在20-30 kg,腹围与人近似的小猪为实验动物。将小猪取左侧卧位,从猪耳缘静脉注入肝素钠1.25万单位后,在B超引导下置入穿刺针（G9）于肝脏表面,行“+”切割肝脏表面实质,造成肝脏出血。拔除穿刺针,形成一个闭合性自主性的腹腔内出血状态。应用两种腹腔内出血的动物模型,使用EIT设备进行监护,观察监护效果。监护结束后行B超和CT检查,并剖腹探查注血或出血情况。研究结果腹腔内注血动物模型模拟腹腔内出血EIT监护结果显示（:1）B超、CT检查及剖腹探查均发现腹腔内存在大量血液;（2）随着血液的注入,电阻抗成像的目标区域象素值随之变化,成像结果明显。腹腔内自发性出血动物模型模拟腹腔内出血EIT监护结果显示:（1）电阻抗成像仪出现明显成像反应,目标区域出现颜色变化,并随着时间的延长颜色逐渐加深,出现颜色区域扩大。（2）解剖发现小猪腹腔内有大量不凝血液,在肝脏表面可见“+”形切割创面,可见该切割创面仍渗血。研究结论（1）腹腔内注血动物模型能够模拟腹腔内出血,并可以精确控制出血的速度与出血量,用电阻抗成像系统监护能够获得清楚的成像结果。（2）腹腔内自主性出血的动物模型能够模拟一种更自然状态的出血,但不能控制出血速度和出血量,通过电阻抗成像系统也能够获得明显的成像结果。综上所述,可以看出电阻抗成像系统在实时监护腹腔内出血方面有很大的优势,在未来临床应用有着广阔的前景。
王亚东[9]（2003）在《汞、铬和锰化合物雌激素样作用的实验研究》文中研究表明越来越多的研究表明，人类的不良健康效应如激素依赖性肿瘤的发病率升高、免疫系统功能损伤、神经系统功能紊乱及生殖功能的异常可能与环境中的某些化学物质有关。由于这些化学物质能干扰内分泌功能，故也称环境内分泌干扰物（environmental endocrine disruptors，EEDs）。EEDs的作用机制复杂，拟雌激素活性可能是其机制之一。有报道表明某些金属如镉、铅、有机锡具有内分泌干扰作用，而生产和生活环境中还广泛存在其它重金属如汞、锰、铬等，它们对人类和动物也有损害作用。这些损害作用是否也是通过内分泌干扰作用中的雌激素样作用，目前还没有确切证据。为此，本研究用MCF-7人类乳腺癌细胞增殖试验、去卵巢大鼠子宫增重试验、过氧化物酶活性测定试验和雌激素受体竞争结合试验来评价氯化汞、硫酸锰、氯化铬、三氧化铬的雌激素样作用，以初步探讨其内分泌干扰作用，为进一步研究其生殖和发育毒性作用机制提供实验依据。郑州人学医学院2003届硕士论文汞、铭和锰化合物雌激素样作用的实验研究方法 1.MCF一7人乳腺癌细胞增殖实验:用无酚红的RPMI一1640培养基（内含活性炭一葡聚糖处理的10%胎牛血清，30U/100ml胰岛素）调整细胞浓度为20000一30000/ml，接种于96孔培养板，每孔接种100 pl。贴壁培养24h后，弃培养液，加入200 pl含有不同剂量受试物、溶剂对照以及阳性物的不含酚红的RPMI一1 640培养基。各剂量均设6个平行孔，每3d换一次液，培养6d后弃上清，每孔加入曝哇兰（MTT）25 pl，放置在培养箱中，4h后，弃孔内液体，每孔加入二甲基亚矾（DMSO）1 50 pl。振荡10min后，用酶联免疫检测仪于490川。波长处测定吸光值。 2.子宫增重试验:大鼠行双侧去卵巢手术后，于第16d随机分5组，每组8只，分别为阴性对照组（蒸馏水），低、中、高剂量氯化汞组o.04mg/kg、0.20mg/kg、1.00mg/kg，阳性对照组雌二醇10009/kg，以花生油为溶剂，给药容积为2.oml/kg体重，每天腹腔注射一次，连续3d。最后一次给药后24h，称重，颈椎脱臼处死大鼠，迅速取出子宫，剔除周围结缔组织和脂肪，吸干子宫表面血渍和一了宫内液，于万分之一天平上称量。 3.过氧化物酶活性测定:将子宫剪碎后，按1:20（ mg/n 11）]J11预冷的5%caclZ溶液，冰浴中用玻璃匀浆器匀浆，于4℃，12000rpm离心20min，上清液用愈创木酚比色法测定过氧化物酶活性。 4.大鼠子宫雌激素受体竞争结合试验:性成熟雌性SD大鼠颈椎脱自处死后，剥离子宫，预冷生理盐水冲洗，称重，计算所需组织抽提液的体积，剪碎，加入1:6（mg/ml）预冷的抽提缓冲液，在冰浴条件下用玻璃匀浆器匀浆，于150oorpm，4℃离心3omin，上清液即为胞浆液。用考马斯亮蓝G一250/BsA法测定胞浆液中蛋白含量:体外雌激素受体竞争结合实验参考朱国璋方法:多点饱郑州少、学医学院2003届硕卜论文汞、铭和锰化合物雌激素样作用的实验研究和分析时，总结合反应（total binding，TB）管中加入不同浓度的3H一EZ，分别为0.snlnol/L、Inmol/L、Zn:1101/L、4nmol/L、sn，nol/L。根据Seatehard图，采用10，lmol/L作单点饱和分析。葡聚糖一活性炭（Dcc）法分离游离的和结合的3H一E:后，将上清液倒入sml的闪烁液中，用FJ一2101G双道液休闪烁计数器计数。结果 1.l0’’Zmol/L雌二醇即可诱导MCF一7细胞增殖，增殖量为阴性对照的1.28倍;10一”mol/L雌二醇使MCF一7人乳腺癌细胞增殖达最大，是阴性对照的4.48倍。氯化汞对MCF一7人乳腺癌细胞增殖效应与雌二醇相似，表现出剂量一效应关系，10一7mol/L氯化汞使McF一7人乳腺癌细胞增殖达最大，为阴性对照的3.08倍，氯化汞的相对增殖效率为雌二醇的59.8%，相对增殖能力为0.01。在预实验中氯化汞在一。一3 molzL一1寸，细胞全部l匕现死z兰:一。一4 1110一/L”寸，到l!)j包大部分出现死亡。当用10一6 mol/L雌激素拮抗剂}C!182.780处理时，能完全阻断雌二醇和氯化汞所引起的细胞增殖。但不同剂量硫酸锰、氯化铬、三氧化铬对MCF一7细胞增殖作用不明显。 2.在成年去卵巢大鼠子宫增重试验中，随着给予氯化汞剂量的增加，子宫湿重增加，呈剂量一效应关系，经单因素方差分析，仅高剂量组与阴性对一照组比较有统计学意义（P<0.05）。 3.氯化汞可引起子宫过氧化物酶活性增加，且呈剂量一效应关系，经单因素方差分析，仅高剂量组与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 4.氯化汞、硫酸锰、氯化铬、三氧化铬均表现出随浓度的增高，与大鼠胞浆ER结合的3H一E:量并没有明显降低。结论 氯化汞在体外实验中能诱导MC卜7细胞增殖;在体内实验中能诱导子宫重郑州人学医学院2003届硕士论文汞、铬和锰化合物雌激素样作用的实验研究量增加和过氧化物酶活性增高;但在受体竞争结合实验中不能与3H一E:竞争结合ER，提示氯化汞具有雌激素样作用。硫酸锰、氯化铬、三氧化铬在2种体外实验中不显示雌激素样作用。
王元彬,汤学民[10]（2002）在《电阻抗法测定精子浓度》文中指出①目的 建立电阻抗法测定精子浓度的实验方法。②方法 精液标本直接经溶血素作用，溶解精子尾部及卵磷脂小体，然后采用 Ｆ－８００血细胞分析仪模拟血小板检测步骤测定精子浓度。③结果 精子体积直方图分布主要集中于２～２０ｆｌ。测定高、中、低精子浓度的变异系数分别为２．９％、４．４％、９．０％。精子浪度在（１～２３７）×１０９／Ｌ范围内显示良好的线性（ｒ＝０．９９７）。６６例精液标本用本法（Ｙ）测定结果与 Ｍａｋｌｅｒ精子计算盘法（Ｘ）测定结果比较，显示两种方法相关性良好（Ｙ＝１.０７ Ｘ＋１．９６，ｒ＝０．９９３），两组结果平均误差不超过 １０％。④结论 本法精密度高，简便实用，适于常规实验室开展。
二、电阻抗法测定精子浓度（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、电阻抗法测定精子浓度（论文提纲范文）
（1）桦褐孔菌醇提物的毒性评价及其代谢组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 桦褐孔菌及其研究进展 |
| 1.1.1 桦揭孔菌的形态及生物学特征 |
| 1.1.2 桦褐孔菌的资源分布 |
| 1.1.3 桦褐孔菌的主要化学成分 |
| 1.1.4 桦褐孔菌的药理学作用 |
| 1.1.5 桦褐孔菌的毒性及其研究进展 |
| 1.2 药物临床前安全性评价 |
| 1.3 药物的代谢组学 |
| 1.3.1 代谢组学的概念 |
| 1.3.2 代谢组学的功能 |
| 1.3.3 代谢组学的研究方法 |
| 1.3.4 代谢组学的研究流程 |
| 1.4 传统毒理学与代谢组学在药物毒理研究中的比较 |
| 1.5 项目研究的目的和意义 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验用药品 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 |
| 2.1.4 主要化学试剂与生物制剂 |
| 2.1.5 主要试剂及其配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 桦褐孔菌醇提物使用剂量设计依据 |
| 2.2.2 实验总体设计 |
| 2.2.3 实验动物分组 |
| 2.3 主要检测指标及方法 |
| 2.3.1 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠临诊症状观察 |
| 2.3.2 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠摄食量的测定 |
| 2.3.3 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠体重的测定 |
| 2.3.4 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠尿液的收集及其处理 |
| 2.3.5 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠血液的采集及其处理 |
| 2.3.6 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠器官组织的病理学检查 |
| 2.3.7 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠脏器重量及脏脑比和脏体比测定 |
| 2.3.8 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠精子形态和运动情况检查 |
| 2.3.9 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠染色体突变检查 |
| 2.3.10 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠毒性试验代谢组学研究 |
| 2.4 数据处理及统计分析 |
| 2.4.1 数据处理项目 |
| 2.4.2 统计方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠毒性试验 |
| 3.1.1 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠临诊主要症状 |
| 3.1.2 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠摄食量变化 |
| 3.1.3 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠体重的变化 |
| 3.1.4 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠尿液有关指标变化 |
| 3.1.5 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠血液有关指标变化 |
| 3.1.6 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠血清生化相关指标变化 |
| 3.1.7 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠主要脏器指数变化 |
| 3.1.8 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠器官组织的病理学变化 |
| 3.1.9 桦褐孔菌醇提物给予ICR小鼠精子形态和运动能力的变化 |
| 3.1.10 桦褐孔菌醇提物给予ICR小鼠骨髓细胞微核试验 |
| 3.2 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠代谢组学研究 |
| 3.2.1 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠尿液代谢组学变化 |
| 3.2.2 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠血清代谢组学变化 |
| 3.2.3 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠肝脏的代谢组学变化 |
| 3.2.4 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠肾脏代谢组学变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 桦褐孔菌醇提物对SD大鼠临诊主要症状的影响 |
| 4.2 桦褐孔菌醇提物对SD大鼠临诊理化指标的影响 |
| 4.3 桦褐孔菌醇提物对SD大鼠器官组织的病理学变化 |
| 4.4 桦褐孔菌醇提物对ICR小鼠精子形态和运动能力的影响 |
| 4.5 桦褐孔菌醇提物对ICR小鼠骨髓细胞微核率的影响 |
| 4.6 桦褐孔菌醇提物对SD大鼠主要器官组织代谢组学的影响 |
| 4.6.1 桦褐孔菌醇提物应用SD大鼠尿液关键代谢途径及其生物学意义 |
| 4.6.2 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠血清关键代谢途径及其生物学意义 |
| 4.6.3 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠肝脏关键代谢途径及其生物学意义 |
| 4.6.4 桦褐孔菌醇提物给予SD大鼠肾脏关键代谢途径及其生物学意义 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（2）基于智能手机和微流控芯片的环境与生物样品的检测方法研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 第一节 微流控技术的概述 |
| 1.1 微流控技术的概述 |
| 1.2 微流控技术的发展历程 |
| 1.3 微流控芯片材料 |
| 1.3.1 无机非金属化合物 |
| 1.3.2 有机聚合物 |
| 1.3.3 新兴材料 |
| 1.4 微流控芯片的制作方法 |
| 1.4.1 硅、玻璃和石英芯片的制作 |
| 1.4.2 高分子聚合物微流控芯片制作方法 |
| 1.5 微流控技术的应用 |
| 第二节 基于智能手机的便携检测器 |
| 2.1 智能手机的概述 |
| 2.2 基于智能手机检测平台的分析方法特点 |
| 2.3 基于智能手机传感器的检测应用 |
| 2.3.1 电化学传感器 |
| 2.3.2 近距离无线通讯技术传感器 |
| 2.3.3 光学传感器 |
| 第三节 基于微流控芯片和智能手机的比色分析 |
| 3.1 比色法 |
| 3.2 基于智能手机的微流控比色检测平台的概述 |
| 3.3 基于智能手机和微流控芯片的比色检测的应用 |
| 3.3.1 环境方面 |
| 3.3.2 食品安全 |
| 3.3.3 生物样品 |
| 3.4 选题意义和研究内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 基于智能手机和微流控芯片的甲醛快速检测 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂和材料 |
| 2.2.2 实验设备及型号 |
| 2.2.3 COC微流控芯片的制作 |
| 2.2.4 微流控芯片的前处理 |
| 2.2.5 甲醛快速检测平台的搭建 |
| 2.2.6 AHMT法测定甲醛标准曲线的绘制[4] |
| 2.2.7 微流控芯片显色法测定甲醛含量 |
| 2.2.8 溶液的配制及实际样品前处理[4] |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 微流控芯片的处理与加工 |
| 2.3.2 不同品牌手机的拍照颜色分析 |
| 2.3.3 长光程检测与短光程检测的对比 |
| 2.3.4 AHMT法测定甲醛标准曲线的绘制 |
| 2.3.5 不同条件对芯片上检测反应的考察 |
| 2.3.6 微流控芯片反应显色法测定甲醛含量 |
| 2.3.7 测试芯片的重复性试验方法 |
| 2.3.8 实际样品检测中的数据处理 |
| 2.3.9 实际样品的检测 |
| 2.4 结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 智能手机检测平台与芯片的改进 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂和材料 |
| 3.2.2 实验设备及型号 |
| 3.2.3 微流控芯片的设计及其制作 |
| 3.2.4 微流控芯片的设计及改进 |
| 3.2.5 基于手机的便携式快速芯片检测平台的改进 |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 微流控芯片通道形状的改进 |
| 3.3.2 微流控芯片的前处理及改进 |
| 3.3.3 微流控芯片通道长度的改进 |
| 3.3.4 考察不同颜色溶液的检测 |
| 3.3.5 芯片外围平台的改进 |
| 3.3.6 便携式快捷智能手机检测平台的改进效果 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 基于智能手机和长光程微流控芯片对碱性磷酸酶的酶活力的定量检测 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂和材料 |
| 4.2.2 实验设备及型号 |
| 4.2.3 微流控芯片的制作及其处理 |
| 4.2.4 实验原理 |
| 4.2.5 吸光度显色法测定碱性磷酸酶标准曲线的绘制 |
| 4.2.6 微流控芯片显色法测定碱性磷酸酶活性 |
| 4.2.7 溶液配制及实际样品的前处理 |
| 4.3 实验讨论与结果 |
| 4.3.1 比色法测定碱性磷酸酶活性标准曲线的绘制 |
| 4.3.2 在长光程芯片中测定碱性磷酸酶活性标准曲线的绘制 |
| 4.3.3 不同条件对芯片上检测反应的影响 |
| 4.3.4 数据处理 |
| 4.3.5 基于长光程微流控芯片对碱性磷酸酶标准品的活性测试 |
| 4.3.6 加标回收率的测定 |
| 4.3.7 应用 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.5 研究展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 经费来源声明 |
| 致谢 |
（3）体脂率对继发不育男性精液质量及体外受精结局的影响（论文提纲范文）
| 资料与方法 |
| 一、研究对象 |
| 二、研究方法 |
| 三、统计学分析 |
| 结果 |
| 一、研究对象的一般情况 |
| 二、各组患者精液质量参数及精浆生化结果 |
| 三、各组患者受精率及优质胚胎率结果 |
| 四、各项指标参数的Pearson相关性分析结果 |
| 五、多元逐步回归分析结果 |
| 讨论 |
（4）静电场暴露非热效应动物实验研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 国内外电磁场非热效应研究水平综述 |
| 1.2.1 极低频电磁场非热效应研究进展 |
| 1.2.2 静电场非热效应研究进展 |
| 1.3 研究内容及意义 |
| 第2章 静电场非热效应动物实验造模方法研究 |
| 2.1 ±800kV特高压直流输电线下电场暴露动物实验造模方法 |
| 2.1.1 ±800kV特高压直流输电线下电磁环境分析 |
| 2.1.2 造模方法 |
| 2.1.3 实际输电线下电场暴露强度确定 |
| 2.2 实验室可控条件下的静电场暴露动物实验造模方法 |
| 2.2.1 静电场发生装置研制 |
| 2.2.2 造模方法 |
| 2.2.3 静电场暴露强度确定 |
| 2.3 本章小结 |
| 第3章 ±800kV特高压直流输电线下电场暴露非热效应动物实验研究 |
| 3.1 实际输电线下静电场暴露对小鼠生长及运动能力的影响 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 实验结果 |
| 3.2 实际输电线下静电场暴露对小鼠血常规的影响 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.2.3 实验结果 |
| 3.3 实际输电线下静电场暴露对小鼠肝脏、肾脏的影响 |
| 3.3.1 实验材料 |
| 3.3.2 实验方法 |
| 3.3.3 实验结果 |
| 3.4 实际输电线下静电场暴露对小鼠生殖功能的影响 |
| 3.4.1 实验材料 |
| 3.4.2 实验方法 |
| 3.4.3 实验结果 |
| 3.5 分析与讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第4章 实验室可控条件下静电场暴露非热效应动物实验研究 |
| 4.1 实验室内静电场暴露对小鼠生长及运动能力的影响 |
| 4.1.1 实验材料与方法 |
| 4.1.2 实验结果 |
| 4.1.3 分析与讨论 |
| 4.2 实验室内静电场暴露对小鼠血常规的影响 |
| 4.2.1 实验材料与方法 |
| 4.2.2 实验结果 |
| 4.2.3 分析与讨论 |
| 4.3 实验室内静电场暴露对小鼠肝脏、肾脏的影响 |
| 4.3.1 实验材料与方法 |
| 4.3.2 实验结果 |
| 4.3.3 分析与讨论 |
| 4.4 实验室内静电场暴露对小鼠生殖功能的影响 |
| 4.4.1 实验材料与方法 |
| 4.4.2 实验结果 |
| 4.4.3 分析与讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 基于转录组测序的静电场非热效应生物作用机制研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 样品收集 |
| 5.1.2 RNA提取 |
| 5.1.3 RNA纯化 |
| 5.1.4 RNA-seq文库构建 |
| 5.1.5 测序 |
| 5.1.6 生物信息分析 |
| 5.2 生物信息分析方法及结果 |
| 5.2.1 RNA质检结果 |
| 5.2.2 参考基因组比对 |
| 5.2.3 基因表达量分析 |
| 5.2.4 样本生物学重复分析 |
| 5.2.5 基因的差异表达分析 |
| 5.2.6 差异表达基因的聚类分析 |
| 5.2.7 差异表达基因的GO基因功能富集分析 |
| 5.2.8 差异表达基因的KEGG生物通路分析 |
| 5.3 分析与讨论 |
| 5.3.1 肝脏和睾丸共有差异表达基因分析 |
| 5.3.2 基于转录组测序的静电场非热效应生物作用机制研究 |
| 5.3.3 静电场敏感基因筛选 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 总结与展望 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 主要创新点 |
| 6.3 研究展望 |
| 作者简历 |
| 攻读博士学位期间科研成果 |
| 参考文献 |
（5）弱精症患者精子运动参数及DNA碎片化指数特征研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 仪器及试剂 |
| 2.3 标本收集 |
| 2.4 精液分析 |
| 2.4.1 理学检查 |
| 2.4.2 计算机辅助精子质量分析 |
| 2.4.3 计算机辅助精子形态分析 |
| 2.5 精子DNA碎片化指数检测 |
| 2.5.1 试剂 |
| 2.5.2 操作步骤 |
| 2.6 质量保证与质量控制 |
| 2.7 标本的安全处理 |
| 2.8 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 弱精症组和活力正常不育症组的精液常规参数比较 |
| 3.2 弱精症组和活力正常不育症组的精子运动特征参数比较 |
| 3.3 弱精症组和活力正常不育症组的精子DNA碎片化指数比较 |
| 3.4 弱精症组的前向运动率(PR)与精子活率、运动速度、运动轨迹特征参数等线性相关、线性回归分析 |
| 3.5 活力正常不育症组的精子前向运动率(PR)与精子活率、运动速度、运动轨迹特征参数等线性相关、线性回归分析 |
| 3.6 弱精症组的精子DNA碎片化指数与精液常规参数及运动轨迹特征参数的线性相关性分析 |
| 3.7 活力正常不育症组的精子DNA碎片化指数与精液常规参数、精子运动轨迹特征参数的线性相关性分析 |
| 3.8 弱精症组的前向运动率与其他精子质量参数的多元线性回归模型分析 |
| 3.9 活力正常不育症组的前向运动率与其他精子质量参数的多元线性回归模型分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 对本课题的进一步设想 |
| 参考文献 |
| 附录一：实验所用仪器设备及试剂 |
| 附录二：精子运动轨迹图及diff-quick染色精子形态图 |
| 附录三：精子吖啶橙荧光染色图谱 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（6）GLP条件下临床病理学规范化建设与实践（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 临床病理实验室硬件条件的改善 |
| 1. 各国法规对临床病理学检测指标的要求 |
| 2. 我中心临床病理学实验室现状 |
| 3. 采取对策 |
| 第二章 临床病理实验室仪器设备的规范化管理与使用 |
| 1. 仪器设备的一般管理要求 |
| 2. 仪器设备的日常管理 |
| 3 仪器设备 SOPs 的制定 |
| 4 仪器设备的计量检定 |
| 5 仪器设备的期间核查 |
| 6 仪器设备的验证[10] |
| 7 实际应用情况 |
| 第三章 临床病理实验室的分析的标准化-全程质量控制 |
| 1. 分析前的标准化 |
| 2. 分析中的质量控制 |
| 3. 分析后的质量控制 |
| 4 实际应用情况 |
| 第四章 实验室信息管理系统的应用 |
| 1. Easy GLP 实验室信息管理系统简介 |
| 2. 运行环境 |
| 3. Easy GLP 实验室信息管理系统的安装验证 |
| 4. Easy GLP 实验室信息管理系统的操作验证 |
| 5. Easy GLP 实验室信息管理系统的性能验证 |
| 6. EasyGLP 软件数据采集及统计的认证 |
| 7 小结 |
| 第五章 实验动物临床病理背景数据库的建立与应用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附 发表论着 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（7）成年男性唯支持细胞综合症睾丸相关蛋白的筛选、鉴定及初步功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 睾丸组织蛋白纯化、分离方法的建立及优化 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第二部分 利用双向电泳技术和质谱技术筛选、鉴定成年男性唯支持细胞综合症睾丸相关蛋白质 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第三部分 PRRS2、HnRNP L在成年男性唯支持细胞综合症中的初步功能研究 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 缩略语词汇表 |
| 读硕士学位期间成果 |
| 致谢 |
| 统计学证明 |
| 附件一:伦理学申请报告 |
| 附件二:患者知情同意书 |
（8）一、邻苯二甲酸酯类物质对雄性大鼠生殖系统的毒性研究 二、电阻抗成像系统监护小猪腹腔内出血（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 课题一 邻苯二甲酸酯类物质对雄性大鼠生殖系统的毒性研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 实验一：邻苯二甲酸酯类物质对雄性大鼠生殖系统的毒性研究 |
| 1. 材料方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 课题二 电阻抗成像系统监护小猪腹腔内出血 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 实验一：小猪腹腔内出血模型及电阻抗成像监护的初步研究 |
| 1. 材料方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 实验二：电阻抗成像监护小猪闭合性腹腔内出血的研究 |
| 1. 材料方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）汞、铬和锰化合物雌激素样作用的实验研究（论文提纲范文）
| 论文部分 汞、铬和锰化合物雌激素样作用的实验研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述部分 环境雌激素与人类健康 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
四、电阻抗法测定精子浓度（论文参考文献）
- [1]桦褐孔菌醇提物的毒性评价及其代谢组学研究[D]. 赵良友. 东北农业大学, 2020(07)
- [2]基于智能手机和微流控芯片的环境与生物样品的检测方法研究[D]. 张晓玉. 兰州大学, 2020
- [3]体脂率对继发不育男性精液质量及体外受精结局的影响[J]. 孙一鑫,王丽,史新宇,孙秀翠,林云英. 生殖医学杂志, 2019(01)
- [4]静电场暴露非热效应动物实验研究[D]. 伍思霞. 浙江大学, 2018(08)
- [5]弱精症患者精子运动参数及DNA碎片化指数特征研究[D]. 焦瑞宝. 安徽医科大学, 2015(03)
- [6]GLP条件下临床病理学规范化建设与实践[D]. 韩刚. 中国人民解放军军事医学科学院, 2012(10)
- [7]成年男性唯支持细胞综合症睾丸相关蛋白的筛选、鉴定及初步功能研究[D]. 李飞. 南方医科大学, 2010(04)
- [8]一、邻苯二甲酸酯类物质对雄性大鼠生殖系统的毒性研究 二、电阻抗成像系统监护小猪腹腔内出血[D]. 张伟. 第四军医大学, 2008(04)
- [9]汞、铬和锰化合物雌激素样作用的实验研究[D]. 王亚东. 郑州大学, 2003(01)
- [10]电阻抗法测定精子浓度[J]. 王元彬,汤学民. 华北煤炭医学院学报, 2002(01)