一、ELISA检测颅脑损伤患者血清S100B蛋白变化及其意义（论文文献综述）
岑贞颐[1]（2021）在《感染性颅内高压患儿血清及脑脊液S100B、NSE、LA与临床特点的相关性研究》文中研究指明目的:探讨颅内感染并颅内压升高患儿血清及脑脊液血浆钙连接蛋白B（Plasma Calnexin B,S100B）、神经元特异性烯醇化酶（Neuron Specific Enolase,NSE）、乳酸LA（Lactic Acid,LA）的变化及其与临床的相关性,为本病的早期诊断和早期干预,以及提高治疗效果、降低致死率和致残率提供科学依据。方法:选取在我院住院治疗的颅内感染并颅内压升高的患儿96例为病例组;按脑脊液压力升高水平分为轻度升高组和重度升高组两个亚组,选取同期同年龄段的健康体检儿童96例为健康对照组。比较各组S100B、NSE、LA水平及其与临床检测指标的相关性。结果:（1）重度升高组患儿头痛/呕吐、意识障碍、抽搐和视乳头水肿的发生率分别为61.9%、85.7%、76.2%和57.1%,轻度升高组为24.1%、59.3%、31.5%和18.5%;重度升高组头痛/呕吐、意识障碍、抽搐和视乳头水肿的发生率均高于轻度升高组,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）1月～3岁患儿轻度升高组脑脊液压力为117.48±9.81mm H2O,重度升高组为159.53±12.42 mm H2O;4～6岁患儿轻度升高组脑脊液压力为192.40±9.27 mm H2O,重度升高组为272.62±21.81mm H2O;7～15岁患儿轻度升高组脑脊液压力为234.44±24.46 mm H2O,重度升高组为299.10±26.49mm H2O。化脓性脑膜炎、病毒性脑炎、结核性脑膜炎重型病例脑脊液压力均值高于同组的轻型病例,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）重度升高组血乳酸（LAC）、C反应蛋白（CRP）、脑钠尿肽（BNP）、谷草转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CKMB）、部分凝血活酶时间（APTT）、肌酐、脑脊液乳酸（CSF-LA）水平较轻度升高组高,重度升高组血PH值、碳酸氢盐、脑脊液氯水平、血纤维蛋白原（Fbg）较轻度升高组低,差异均有统计学意义（P<0.05）;重度升高组血白细胞总数、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、谷丙转氨酶（ALT）、尿素氮、脑脊液细胞总数、中性细胞比例、单核细胞比例、乳酸脱氢酶（LDH）、脑脊液葡萄糖、脑脊液蛋白定量与轻度升高组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。（4）96例患儿均进行头颅磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging,MRI）,异常检出率为67.8%（65例）,其中重度升高组为78.6%（33例）,轻度升高组为38.9%（21例）,重度升高组头颅MRI影像学改变高于轻度升高组,差异有统计学意义（P<0.05）;比较两组MRI及X线计算机断层摄影（Computed Tomography,CT）的病灶检出率,MRI病灶检出率高于CT,差异具有统计学意义（P<0.05）。（5）不同亚组血清S100B、NSE及LA水平变化特征为对照组<轻度升高组<重度升高组,差异有统计学意义（P<0.05）;脑脊液S100B、NSE、LA水平为轻度升高组<重度升高组,差异有统计学意义（P<0.05）;三个不同病因组血清和脑脊液S100B、NSE、LA水平为结脑组>化脑组>病脑组,差异有统计学意义（P<0.05）。（6）以CSF-LA为因变量,S100B和NSE在血清和脑脊液中的水平为自变量,应用线性回归分析:（1）相关分析:血清S100B与CSF-LA定量（r=0.381,P=0.000）,脑脊液S100B与CSF-LA定量（r=0.350,P=0.001）;血清NSE与CSF-LA定量（r=0.348,P=0.001）,脑脊液NSE与CSF-LA定量（r=0.297,P=0.003）;均存在正相关关系（P<0.05）。以脑脊液压力为因变量,S100B和NSE在血清和脑脊液中的水平为自变量,应用线性回归分析:（2）相关分析:血清S100B与脑脊液压力（r=0.472,P=0.000）,脑脊液S100B与脑脊液压力（r=0.464,P=0.000）;血清NSE与脑脊液压力（r=0.579,P=0.000）,脑脊液NSE与脑脊液压力（r=0.593,P=0.000）均存在显着的正相关关系（P<0.01）。（7）回归分析:以血清S100B为自变量,CSF-LA定量为因变量做线性回归分析,血清S100B可以显着影响CSF-LA定量,非标准化回归系数为0.012（P<0.05）;以脑脊液S100B为自变量,CSF-LA定量为因变量做线性回归分析,脑脊液S100B可以显着影响CSF-LA定量,非标准化回归系数为0.131（P<0.05）。以血清NSE为自变量,CSF-LA定量为因变量做线性回归分析,血清NSE可以显着影响CSF-LA定量,非标准化回归系数0.196（P<0.05）;以脑脊液NSE为自变量,CSF-LA定量为因变量做线性回归分析,脑脊液NSE可以显着影响CSF-LA定量,非标准化回归系数为0.128（P<0.05）。结论:（1）感染性颅内高压患儿的脑脊液压力与临床表现具有一定相关性,脑脊液压力升高值越大,患儿临床表现越严重,合并各器官脏器损害的发生率越高。（2）感染性颅内高压患儿头颅MRI无特异性改变,但颅内压升高越明显,MRI异常检出率相对较高。（3）血清和脑脊液中的S100B、NSE可正向影响CSF-LA定量,即血清和脑脊液中的S100B、NSE越高,CSF-LA定量越高,脑脊液压力升高也越大,患儿发展成为重度感染性颅内高压的可能性越大。（4）血清及脑脊液中S100B、NSE、LA含量水平对感染性颅内高压患儿的早期诊断、提高治疗效果、判断病情严重程度及预后评估有一定的指导价值。
廖良华[2]（2021）在《惊厥持续状态患儿血清及脑脊液S100B、NSE、TNF-α与临床特征的相关性研究》文中研究指明目的:探讨惊厥持续状态患儿脑脊液及血清中S100B蛋白（S100-B protein,S100B）、神经元特异性烯醇化酶（Neuronspecific enolase,NSE）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）的水平变化与临床特征的相关性,为早期评估风险、判断预后、指导临床用药奠定基础。方法:（1）采取病例对照研究的方法,随机选取右江民族医学院附属医院及百色市人民医院2018年7月至2020年09月收治的惊厥儿童共120例,50例惊厥持续状态患儿做为持续惊厥组,其中持续惊厥1组（惊厥时间（min）:30-50）36例、持续惊厥2组（惊厥时间（min）:50-70）8例、持续惊厥3组（惊厥时间（min）:70-90）6例;70例非惊厥持续状态患儿做为非持续惊厥组,同时选取同期来我院儿童保健科健康体检的70例健康儿童为对照组。（2）收集患儿的临床资料,包括一般情况、临床表现、病因以及实验室常规、神经电生理等辅助检查结果。（3）使用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）测定所有持续惊厥组、非持续惊厥组及对照组血清中S100B、NSE、TNF-α水平,并同时测定持续惊厥组、非持续惊厥组脑脊液中S100B、NSE、TNF-α水平。（4）运用统计学软件SPSS20.0进行数据的统计分析。结果:（1）发热、嗜睡、呕吐/头痛、烦躁/拒乳等临床表现在持续惊厥组与非持续惊厥组的差异无统计学意义（P>0.05）。（2）持续惊厥组的白细胞（White blood cells,WBC）、降钙素原（Procalcitonin,PCT）、C-反应蛋白（C Reactive Protein,CRP）水平与非持续惊厥组具有显着性差异（P<0.05）,持续惊厥组>非持续惊厥组。（3）持续惊厥组最常见病因为急性症状性（占52%）,非持续惊厥组最常见病因为热性惊厥（占40%）,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）持续惊厥组、非持续惊厥组、对照组三组血清中的S100B、NSE、TNF-α水平均存在显着差异（P<0.05）,且均为持续惊厥组>非持续惊厥组>对照组。持续惊厥组和非持续惊厥组脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平也存在显着的差异（P<0.05）,为持续惊厥组>非持续惊厥组。（5）持续惊厥组1组、2组、3组血清及脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平含量均具有显着差异（P<0.05）,表现为3组>2组>1组。（6）以惊厥持续时间为因变量,分别以血清和脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α为自变量做相关分析及回归分析结果为:（1）相关分析:血清中的S100B、NSE、TNF-α水平与惊厥持续时间具有高度正相关性（rs=0.715、0.697、0.658,P均<0.001）;脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α与惊厥持续时间具有高度正相关性（rs=0.696、0.725、0.580,P均<0.001）。（2）回归分析:血清中的S100B、NSE、TNF-α水平均与惊厥持续时间具有相关性,其非标准化回归系数分别为3.285、2.628、0.080,P均<0.001;脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平也均与惊厥持续时间具有相关性,其非标准化回归系数分别为1.797、1.251、0.081,P均<0.001。（7）以脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平为因变量,以血清中的S100B、NSE、TNF-α为自变量做相关分析及回归分析结果为:（1）相关分析:血清中的S100B、NSE、TNF-α水平与脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平呈正相关（r=0.920、0.925、0.651,P均<0.001）。（2）回归分析:血清中的S100B、NSE、TNF-α水平可以正向影响脑脊液中S100B、NSE、TNF-α水平,其非标准化回归系数分别为1.181、0.806、0.638,P均<0.001。（8）持续惊厥组中脑电图正常16例（32%）,非特异性异常波13例（26%）,癫痫样波21例（42%）,以癫痫样波为主;脑电图正常组、非特异性异常波组、癫痫样波组间血清及脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平均具有显着差异（P<0.05）,癫痫样波组>非特异性异常波组>脑电图正常组。结论:（1）血清及脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平于惊厥发病早期即升高,可作为惊厥患儿发生持续状态早期识别的敏感性生化指标。（2）血清及脑脊液中S100B、NSE、TNF-α水平与惊厥持续时间呈正相关性,即持续时间越长,数值升高越明显,为惊厥严重程度的早期识别、治疗提供参考依据。（3）脑电图结果联合血清及脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平,对惊厥性脑损伤判断与预后评估具有一定的参考价值。（4）WBC、PCT、CRP数值升高可作为惊厥持续状态早期预测的非特异性参考指标。
田军[3]（2021）在《降钙素基因相关肽（CGRP）通过调控Akt/mTOR信号通路介导的凋亡和自噬减轻创伤性颅脑损伤的实验研究》文中研究说明创伤性颅脑损伤（Traumatic Brain Injury TBI）的定义是由于外部机械力造成的脑损伤,并导致大量的死亡和残疾,许多受害者有功能障碍,如运动和感觉功能障碍,甚至认知功能缺陷。据估计,全世界每年约有5000万人被诊断为TBI。颅脑损伤根据发生的不同过程和阶段,可分为原发性和继发性脑损伤,都是由脑外伤引起的复杂疾病。组织丢失和细胞死亡是主要的损伤,TBI后由于原发性颅脑损伤导致的继发性脑损伤,导致激活的小胶质细胞、募集的中性粒细胞和巨噬细胞以及血液代谢物中引起的炎症反应均可导致继发性脑损伤,进而导致进一步的功能性和器质性的脑损伤。炎症反应被认为是TBI继发性损伤的重要机制。从理论上讲,减少炎症改善受损脑组织能量及代谢可以减轻TBI引起的继发性脑损伤。降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide CGRP）是由37个氨基酸组成的多肽,广泛表达于中枢和外周神经系统。目前,CGRP被认为是最有效的血管舒张药。CGRP在脑组织中起保护作用。当脑组织受到损伤并出现缺血时,小鼠脑TBI后产生大量自我保护物质,CGRP是其中最重要的保护物质之一。研究表明,在TBI后的病理过程中,CGRP的分泌在TBI后增多。增加的目的是使脑血管扩张,尽快为损伤后缺血缺氧的脑组织提供血液供应。然而,当脑组织损伤缺血较严重时,脑组织产生的CGRP不能完全防御这种损伤。因此出现了严重的脑组织继发性和永久性损伤。考虑到CGRP具有保护脑损伤的潜力,而自噬和凋亡在TBI诱导的继发性损伤中发挥重要作用,我们检测了CGRP是否能抑制TBI小鼠的自噬和凋亡的表达。结果表明,CGRP通过减轻脑水肿、调节神经元自噬和凋亡,减低TBI后神经炎症反应来保护大脑。第一部分创伤性颅脑损伤患者血清CGRP水平及与预后的关系目的:临床工作中,观察不同TBI患者CGRP表达变化、判断伤情程度,进一步探讨CGRP与TBI患者病情程度及预后的关系,并探讨CGRP是否可以作为判断TBI预后的可靠指标。方法:选取138例TBI患者进行分组:健康体检者54例（对照组）,重度TBI组73例,轻度TBI组65例。采用酶联免疫分析试剂法（ELISA）,测定TBI患者特定时间的血清CGRP水平。采用格拉斯哥昏迷量表（GCS）判定TBI严重程度。统计分析:各组不同时间CGRP比较采用重复测量资料的方差分析,同一时间组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法。采用wilicoxon秩和检验分析患者血清CGRP水平与临床变量的关系。结果:1.TBI后患者血清CGRP的变化对照组随时间变化呈现平稳状态,TBI（轻度组）和TBI（重度组）先下降后逐渐上升。两组血清CGRP水平均低于对照组。入院时、1天、3天、7天和14天时间点,TBI（重度组）低于TBI（轻度组）,差异显着,有统计学意义;入院时、1天、3天时间点,TBI（轻度组）低于对照组,差异显着,有统计学意义;入院时间点7天和14天,TBI（轻度组）低于对照组,但差异不显着。2.入院时TBI患者血清CGRP水平与临床病理特征关系相对于GCS评分<5分的患者,GCS评分≥5分的患者血清CGRP水平较高（Z=-2.277,P=0.023）。存活患者的CGRP水平高于死亡患者（Z=-3.571,P<0.001）。3.入院血清CGRP预测TBI患者伤后死亡的价值评估血清CGRP水平预测TBI患者伤后死亡的特异度为88.24%,灵敏度为68.82%,CGRP预测最佳临界值为13.255pg/ml。4.TBI患者预后与血清CGRP的相关性CGRP高水平组患者生存情况优于低水平组患者,差异显着;单因素Cox分析发现,年龄,中线结构移位,GCS分数,CGRP水平与TBI患者预后相关;多因素Cox分析发现,中线结构移位,CGRP水平是TBI患者独立预后因素。小结:1.TBI后患者血清中的CGRP变化趋势为随伤后时间变化先降低,然后逐渐升高。约至24小时到达最低点,大约在14天前后达高峰。2.血清CGRP水平可以预测TBI患者的预后不良及死亡,而且该预测效能较高。第二部分降钙素基因相关肽（CGRP）对小鼠创伤性颅脑损伤神经功能的保护作用目的:通过重物打击法（Feeney重物下降挫伤法）,建立开放性创伤性颅脑损伤（Traumatic Brain Injury TBI）动物模型,并予以脑室注射联合尾静脉注射外源性降钙素基因相关肽（CGRP）干预TBI模型小鼠;通过旷场实验、水迷宫实验、巴恩斯迷宫实验、跳台实验对实验小鼠的行为学评分进行测量,验证（CGRP）对创伤性颅脑损伤神经功能的保护作用。通过测量CGRP干预前后小鼠脑挫伤面积比较、脑水肿比较、血脑屏障破坏程度等方面的比较,来探讨CGRP对TBI小鼠脑损伤的保护作用。方法:清洁级（SPF）雄性BALB/C小鼠390只,随机分为sham组、TBI组和TBI+CGRP组。用1%戊巴比妥钠（40 mg/kg,i.p.i.）麻醉小鼠,根据Feeney重物下降法,建立开放性颅脑创伤模型。TBI+CGRP两组分别用CGRP肽（脑室注射+尾静脉注射）,术后每日采用改良神经严重程度评分（m NSS）检测各组小鼠的神经功能缺损程度。各组小鼠分别于术后相应的时间点（1、3、5、7天）取材;苏木精伊红染色（HE染色法）和（TTC）染色法:测量小鼠脑组织损伤面积,并进行组间对比;通过干湿重法测量不同组别小鼠的脑组织含水量;通过测量Evans Blue（EB）渗透率的方法,来判定TBI后血脑屏障的破坏程度。通过蛋白质印迹法（Western blot）测量脑组织CGRP蛋白的表达量。通过行为学测试对小鼠神经行为学进行测量:术后第8、9天进行旷场实验;术后第10-15天行水迷宫实验;术后第16-22天行巴恩斯迷宫实验;术后第23、24天为跳台实验的训练和测试阶段。结果:1.创伤性颅脑损伤（TBI）（Feeney重物下降挫伤法）动物模型稳定:术后小鼠平均昏迷时间约为1.5-2h,生命体征较平稳,体温恢复,呼吸平稳,逐渐苏醒和爬行,可进食水。脑组织经解剖,均可见局部挫伤灶,局部坏死、淤血,伴部分脑组织的凹陷缺损;部分样本损伤灶同侧可见蛛网膜下腔出血。2.各组小鼠m NSS评分差异术后第1天,TBI+CGRP组和TBI组相对sham组,神经功能均受损明显。TBI+CGRP组和TBI组神经功能基本相同,差异无统计学意义;在TBI后第2-7天,TBI+CGRP组小鼠m NSS评分低于TBI组,差异显着;第2-7天TBI+CGRP组和TBI组神经功能逐渐有所好转,两组小鼠的分数逐渐下降。3.TBI小鼠神经功能行为学评分结果旷场实验（Open field test）评分结果:总活动距离测试:sham组总距离最长,TBI+CGRP组小鼠的总距离居中间水平,TBI组的总距离最短。TBI+CGRP组小鼠的总距离相比TBI组的总距离长,差异显着。静止次数和静止时间和测试方面:TBI组小鼠静止次数最多,sham组和TBI+CGRP组静止次数较低,和TBI组小鼠相比,差异不显着,无统计学意义。TBI组小鼠静止时间最长,sham组和TBI+CGRP组静止时间相对较最低,和TBI组小鼠相比,差异不显着,无统计学意义。水迷宫实验:定位航行实验阶段:水迷宫测试小鼠发现平台的潜伏期,TBI+CGRP组小鼠的潜伏期相比TBI组小鼠的潜伏期时间短,差异显着,有统计学意义。TBI组小鼠比sham组小鼠的潜伏期长,差异显着,有统计学意义。空间探索实验阶段:在测试的第五天小鼠穿过平台次数,sham组最多,TBI组最少,TBI+CGRP组居中。TBI组穿过平台次数相比sham组少,差异显着,有统计学意义;TBI+CGRP组穿越平台次数多于TBI组,差异显着,有统计学意义。巴恩斯迷宫测试:训练阶段:TBI组小鼠的潜伏期相比较TBI+CGRP组小鼠的潜伏期长,差异显着,有统计学意义。第六天试验中,第一次探查目标洞（无暗箱）前的错误探查次数比较,TBI+CGRP组小鼠的探错次数相比TBI组小鼠多,差异显着,有统计学意义。跳台实验评分:在跳台试验测试阶段,TBI+CGRP组小鼠的潜伏期相比较TBI组小鼠的潜伏期长,差异显着,有统计学意义;错误次数:TBI+CGRP组小鼠的错误次数相比较于TBI组小鼠的错误次数少,差异显着,有统计学意义。4.不同组别小鼠脑组织标本创伤面积的测量和比较:三组小鼠脑组织切片相比较:TBI+CGRP组与TBI组相比较,均可见一定程度的脑组织损伤及局灶性神经细胞组织缺失,早期缺损范围的差异性较小。随着时间的推移,TBI小鼠脑组织切片可见更严重的脑损伤;定量计算脑损伤体积,TBI+CGRP组小鼠脑组织切片与TBI组小鼠脑组织切片相比较,损伤面积略小,但差异不显着,无统计学意义。5.脑水肿测定:外源性CGRP干预,将TBI术后脑水肿消退的时间点提前,减少了TBI诱导的脑水肿在TBI后持续时间,加速了TBI诱导的脑组织水肿的吸收,进而减轻脑损伤;另一方面,TBI+CGRP组小鼠的脑含水量在1天、3天、5天、7天这四个时间点,脑水肿程度均低于TBI组小鼠,差异显着,有统计学意义。6.血脑屏障损伤程度:TBI术后第1天,sham组未见明显依文思蓝（EB）渗出,TBI+CGRP组小鼠（EB）渗透率和TBI组相比无明显差异;TBI后第3、5、7天,TBI+CGRP组和TBI组小鼠依文思蓝（EB）渗透率仍较高,TBI+CGRP组小鼠依文思蓝（EB）渗透率低于TBI组,两者差异显着,有统计学意义。7.TBI后各组小鼠CGRP蛋白表达水平的差异:TBI组小鼠脑组织中CGRP表达水平显着降低,并随着时间的推移逐渐升高;TBI+CGRP组脑组织中CGRP蛋白表达水平明显高于TBI组,差异显着,有统计学意义。小结:1.根据Feeney重物下降法,可建立标准、可靠的开放性颅脑损伤动物模型,术后正常喂养及观察行为学变化,确认TBI模型建立。2.CGRP干预减低了创伤性颅脑损伤小鼠的神经功能损伤,减低了创伤性颅脑损伤挫伤灶的损伤面积;减低了创伤性颅脑损伤后脑水肿的程度,减少了TBI后脑水肿的持续时间;减轻了TBI后血脑屏障的破坏程度。3.通过蛋白印迹法可见TBI后小鼠脑组织中CGRP的表达水平显着降低,24h达最低,随时间推移逐渐回升。TBI+CGRP组小鼠脑组织中CGRP蛋白表达水平明显高于TBI组,提示本实验采用的脑室注射+尾静脉注射干预途径有效可靠。第三部分降钙素基因相关肽（CGRP）对创伤性颅脑损伤后神经元细胞自噬和凋亡的影响目的:通过对小鼠挫伤脑组织部位取材,对其进行自噬和凋亡相关标志性蛋白检测,观察对比CGRP干预前后自噬和凋亡标志性蛋白的变化情况,探讨CGRP在TBI环境下对自噬和凋亡的调控作用。方法:通过免疫荧光双染法:定位分析LC3和Neu N及GFAP蛋白;蛋白质印迹法,定量分析LC3、P62、Beclin-1、cleaved-caspase-3表达量;TUNEL和Neu N双染色法,分析TBI后神经元凋亡的表达变化情况。结果:1.CGRP对TBI小鼠神经元细胞自噬的影响免疫荧光双染法:脑皮层挫伤区LC3（+）蛋白定位于挫伤部位神经元的胞质中,Sham组可见少量阳性表达,随时间推移阳性表达程度无变化。TBI组于伤后1天可见LC3（+）细胞显着增多,随时间推移表达程度逐渐增强,高于Sham组,差异显着;TBI+CGRP组与TBI组比较,LC3（+）细胞数量较少,表达程度明显减弱,TBI后第1天,差异不显着,无统计学意义;而TBI后第3、5、7天,两组差异性逐渐增强,差异显着,有统计学意义。蛋白质印迹法:部分自噬标志物LC3、P62、Beclin-1蛋白表达与双染结果一致。TBI+CGRP组的LC3II/LC3I比值和Beclin-1水平较TBI组明显降低,差异显着,有统计学意义。P62水平的变化则相反,与sham组相比,TBI导致小鼠P62表达降低,TBI+CGRP组的P62较TBI组明显升高,差异显着,有统计学意义。CGRP的干预导致P62蛋白表达逐渐增强并维持在一个相对较高的阶段。2.CGRP对TBI小鼠神经元细胞凋亡的影响:TUNEL和Neu N双染色显示:TBI导致神经元凋亡增加,挫伤灶周围TUNEL（+）细胞明显增加;TBI+CGRP组的TUNEL（+）较TBI组明显降低,差异显着,有统计学意义;蛋白质印迹法:（Western blot法）:TBI导致神经元凋亡,小鼠挫伤灶脑组织凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达升高,皮层组织细胞凋亡增加。TBI+CGRP组的cleaved-caspase-3较TBI组明显降低,差异显着,有统计学意义。3.CGRP对TBI小鼠神经元细胞神经胶质纤维酸性蛋白GFAP的影响:与sham组相比,TBI导致小鼠神经元细胞GFAP数量明显增加,Neu N数量明显减低,而CGRP的干预降低了神经元细胞损伤。脑皮层挫伤区GFAP（+）表达:Sham组可见少量阳性细胞表达,表达不明显。TBI组和TBI+CGRP组伤后1、3、5、7天均可见阳性细胞显着增多。TBI组GFAP（+）计数率高于Sham组,差异显着;TBI+CGRP组GFAP（+）计数率低于TBI组第1、3天差异无显着性,第5、7天差异显着,有统计学意义。脑皮层挫伤区Neu N（+）表达:Sham组可见适量Neu N（+）表达。TBI组和TBI+CGRP组伤后1、3、5、7天均可见Neu N（+）细胞显着减少。TBI组Neu N（+）计数率低于Sham组,差异显着,有统计学意义;TBI+CGRP组Neu N（+）计数率高于TBI组差异显着,有统计学意义。小结:1.TBI后小鼠神经细胞自噬和凋亡水平增加,予以外源性CGRP干预,有效抑制了TBI所致小鼠神经元细胞的自噬和凋亡;2.TBI后小鼠神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）在显着增加,CGRP干预后,减少了TBI小鼠颅脑损伤部位的胶质纤维酸性蛋白的出现,保护神经细胞功能。第四部分AKT/m TOR信号通路参与了外源性CGRP对神经元细胞自噬和凋亡的调控目的:通过利用CGRP干预TBI小鼠模型,在信号通路层面探讨CGRP对自噬和凋亡相关通路蛋白的调控情况,进一步探讨CGRP对自噬和凋亡的调控机制。方法:通过CGRP干预TBI小鼠模型,采用蛋白质印迹法（Western Blot法）,测定CGRP干预前后挫伤灶局部脑组织的AKT/m TOR、Fox O3a通路相关标志蛋白的变化情况,并对比CGRP干预前后的蛋白表达变化差异。结果:1.CGRP对AKT/m TOR通路的影响TBI术后导致了小鼠脑神经元细胞内p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR水平降低,TBI+CGRP组和TBI组均低于sham组,差异显着,有统计学意义。CGRP使这两者比值均升高。其中,CGRP对p-Akt/Akt激活作用较明显,术后1、3、5、7天四个时间点,TBI+CGRP组的p-Akt/Akt相比TBI组表达升高,差异显着,有统计学意义;CGRP对p-m TOR/m TOR激活作用较弱,术后第1、3天TBI+CGRP组p-m TOR/m TOR相比TBI组,差异显着,有统计学意义;术后第5、7天TBI+CGRP组p-m TOR/m TOR相比TBI组,差异不显着,无统计学意义;同时,Akt/m TOR信号的激活也在TBI后逐渐增强。2.CGRP对Fox O3a表达的影响TBI术后细胞核中Fox O3a蛋白水平显着升高,而细胞浆中Fox O3a蛋白水平显着降低,证实TBI导致了小鼠脑神经元细胞内Fox O3a蛋白分布的变化。CGRP使细胞核内Fox O3a增加逐渐减弱,而胞浆中Fox O3a逐渐升高。细胞核中Fox O3a蛋白表达情况可见,TBI+CGRP组的Fox O3a蛋白表达低于TBI组,差异显着,有统计学意义;而细胞浆中Fox O3a表达情况可见,TBI术后1、3、5、7天四个时间点,TBI+CGRP组的Fox O3a蛋白表达高于TBI组,差异显着,有统计学意义。小结:1.TBI抑制了Akt/m TOR信号通路的激活,对神经元细胞有损伤作用;外源性CGRP干预促进了Akt/m TOR信号通路的激活,导致了神经元细胞自噬和凋亡的降低,起到了脑保护作用。2.TBI促进了Fox O3a蛋白向神经元细胞核内转移,对神经元细胞有损伤作用;外源性CGRP干预可缓解细胞核内的Fox O3a升高趋势,保护神经元细胞。结论:1.临床TBI患者血清样本中CGRP变化趋势为先迅速降低然后逐渐升高,约24小时到达最低点,大约在14天前后达高峰,与动物模型变化趋势相同。2.血清CGRP水平可以预测TBI患者的预后不良及死亡情况,而且该预测的效能较高。CGRP高水平组远期预后、存活率优于CGRP低水平组;存活患者血清CGRP水平高于因TBI死亡的患者。CGRP可以作为TBI预后不良及死亡评估的参考指标。3.根据Feeney重物下降法,可建立标准、可靠的颅脑挫伤动物模型,术后正常喂养及观察行为学变化,确认TBI模型建立。4.CGRP干预,减低了创伤性颅脑损伤鼠的神经功能损伤,减低了创伤性颅脑损伤挫伤灶的损伤面积;减低了创伤性颅脑损伤后脑水肿的程度,减少了TBI后脑水肿的持续时间;减轻了TBI后血脑屏障的破坏程度;通过蛋白印迹法,可见TBI+CGRP组脑组织中CGRP蛋白表达水平明显高于TBI组,提示脑室注射联合尾静脉注射的外源性干预途径有效可靠。5.TBI后小鼠神经细胞自噬和凋亡水平增加,神经胶质纤维酸性蛋白GFAP增加;CGRP的干预有效抑制了TBI所致小鼠神经元细胞的自噬和凋亡,减少了TBI小鼠颅脑损伤部位GFAP的表达。6.TBI抑制了Akt/m TOR信号通路的激活,导致了神经元细胞自噬和凋亡水平升高,同时促进了Fox O3a蛋白向细胞核内转移,对神经元细胞有损伤作用;相反,外源性CGRP干预可促进Akt/m TOR信号通路的激活,抑制了神经元细胞自噬和凋亡,缓解了细胞核内的Fox O3a升高趋势,起到了脑保护作用。
王鹏飞[4]（2021）在《Ac-FLTD-CMK对小鼠创伤性脑损伤后的神经保护作用及血糖/血钾比值对创伤性脑损伤患者预后价值的研究》文中进行了进一步梳理第一部分Ac-FLTD-CMK对小鼠创伤性脑损伤后细胞焦亡的抑制及神经保护作用的研究目的:据报道,细胞焦亡参与了创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）的发生或发展。Ac-FLTD-CMK是一种新合成的细胞焦亡抑制剂。然而,Ac-FLTD-CMK是否能抑制TBI后的细胞焦亡以及是否起到神经保护作用尚不明确。本研究旨在探讨Ac-FLTD-CMK对TBI小鼠的作用。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、TBI+安慰剂组和TBI+AcFLTD-CMK组。使用重力下落装置制作TBI模型。伤后30分钟由侧脑室注射Ac-FLTD-CMK。使用western blotting检测小鼠脑挫伤灶周围皮质中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1、caspase-11、gasdermin-D（GSDMD）和caspase-3的表达。采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbe nt assay,ELISA）检测脑挫伤灶周围皮质白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和白介素-18（interleukin-18,IL-18）的表达。同时进行行为学实验、脑含水量测定、伊文氏蓝渗出测定、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）释放量测定、末端脱氧核苷酸转移酶修饰的d UTP-生物素缺口末端标记染色。结果:Ac-FLTD-CMK可显着下调caspase-1 p20、caspase-11 p20、GSDMD-N末端、IL-1β和IL-18的表达,减少LDH释放量、神经元死亡,减轻脑水肿和血脑屏障损害,并改善神经功能。结论:Ac-FLTD-CMK可以抑制小鼠TBI后的细胞焦亡,并减轻TBI造成的脑损伤。第二部分血糖/血钾比值对中重度创伤性脑损伤患者预后的预测价值研究目的:许多血液生物标志物有助于预测创伤性颅脑损伤（traumatic br ain injury,TBI）患者的预后,但广泛应用于临床的较少。本研究的目的是探讨血糖/血钾比值对中重度TBI患者预后的预测价值。方法:本研究纳入河北省人民医院神经外科2019.7-2020.9收治的102例中重度TBI患者。通过单因素及多因素logistic回归分析对患者的临床资料、检验数据、血caspase-1及IL-1β进行分析,以确定能够影响TBI预后的独立危险因素,并绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线评估各独立危险因素对TBI预后的预测效能。结果:单因素logistic分析显示,入院格拉斯哥昏迷评分（glasgow coma scale,GCS）、24h内血糖、24h内血钾以及血糖/血钾比值是影响中重度TBI患者预后的因素。多因素lo gistic分析显示入院GCS以及血糖/血钾比值是影响中重度TBI预后的独立危险因素。ROC曲线显示,血糖/血钾比值的ROC曲线下面积（area un der curve,AUC）为0.75,GCS评分的AUC为0.791,两者预测价值相似。结论:血糖/血钾比值对预测中重度TBI患者的预后有一定价值,有助于临床医生早期设计更个体化的治疗方案。
祁陆石[5]（2019）在《新生儿窒息的相关生物标志物研究》文中研究表明目的分析窒息新生儿外周血中的蛋白浓度,以期寻找简便易行,并且可以快速检测和动态监测的标志物来预警脑损伤的发生。方法选择2018年7月至2019年7月期间于九龙医院新生儿病房住院并符合新生儿窒息诊断的新生儿共36例作为窒息组,根据出生时Apgar评分,分为:重度窒息组（7例）、轻度窒息组（29例）。同期于本院出生的足月无出生窒息史的住院新生儿20例作为正常对照组,于入院时、生后3天、生后7天采集血标本。用酶联免疫吸附剂测定法测定窒息组及对照组血清S100B、S100A8、载脂蛋白M、激活素A水平。所有窒息组新生儿均于生后行头颅核磁检查（平均检查时间2.68±1.01天）,根据头颅核磁有无异常改变分为头颅MRI正常组及头颅MRI异常组。对收集的资料进行统计分析,对比同一生物标志物不同时间的变化趋势以及在不同组之间的差别。结果1、窒息组新生儿共计36例,其中男26例,女10例,平均胎龄39.71±1.11周,平均出生体重3.54±0.40kg;对照组新生儿共计20例,其中男14例,女6例,平均胎龄39.43±1.21周,平均出生体重3.45±0.35kg。经统计学检验,组间在胎龄、性别、出生体重上均无统计学差异,P>0.05。2、窒息组S100B蛋白水平在各时间点均显着高于对照组,P<0.01;重度窒息、轻度窒息、对照组之间S100B蛋白水平对比具有显着性差异,F=30.82,P<0.01;其中,重度室息组第1天、第3天显着高于轻度窒息组,P<0.05,第7天时明显下降,与轻度窒息组无显着性差异,S100B蛋白升高可能提示急性颅脑损伤;头颅MRI异常组在各时间点均显着高于MRI正常组及对照组,差异有统计学意义,F=37.97,P<0.001。3、窒息组S100A8蛋白水平在各时间点均显着高于对照组,P<0.001;重度窒息、轻度室息、对照组之间S100A8蛋白水平对比具有显着性差异,F=3.28,P<0.05;其中,重度窒息组第1天、第7天显着高于轻度窒息组,P值均<0.01,而第3天时重度窒息组S100A8蛋白水平下降,与轻度窒息组无显着性差异,P>0.05;头颅MRI异常组在各时间点均显着高于MRI正常组及对照组,差异有统计学意义,F=3.96,P<0.05。4、窒息组载脂蛋白M蛋白水平在各时间点均显着低于对照组,F=25.76,P<0.01;重度窒息组在第1天、第3天时与轻度窒息组无显着性差异,P>0.016,随时间进行性下降,第7天时明显低于轻度窒息组,差异有统计学意义,P<0.001;头颅MRI异常组、头颅MRI正常组在第1天、第3天无显着性差异,第七天时头颅MRI异常组低于正常组,具有显着性差异,P<0.01。5、各组激活素A蛋白水平在生后的各个时间点之间相比,均未见显着性差异。结论1、S100B、S100A8与脑损伤关系密切,S100B和S100A8蛋白水平持续高水平,提示窒息缺氧损伤的发生,监测S100B和S100A8蛋白水平可间接反应新生儿脑损伤情况。2、窒息组载脂蛋白M蛋白水平在三个时间点均低于对照组,载脂蛋白M蛋白水平降低可能与缺氧脑损伤有关。
袁林杨[6]（2019）在《手足口病重症第2期患儿临床特征与S100B、NSE、头颅MRI的关联性分析》文中认为目的:探讨手足口病重症第2期患儿的临床特征与星形胶质源性蛋白（S100B）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）含量水平、头颅核磁共振成像（MRI）影像学变化的关联性,为精准识别及其精确早期干预重症手足口病,为有效控制患者的病情进展,降低患者的病死率奠定基础。方法:选取2016年10月至2018年03月在右江民族医学院附属医院儿科病区收治的95例手足口病重症第2期患儿为重症组,随机另选96例手足口病普通型为普通组,在我院儿童保健科体检的健康儿童90例设为对照组。收集患者的临床资料,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定所有患者和对照组血清NSE、S100B水平,重症组并行头颅MRI检查。采用SPSS20.0软件进行统计分析。结果:（1）肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV 71）和柯萨奇病毒A 16型（Cox sachie virus,Cox A l6）的阳性率重症组分别为62.1%和10.5%,轻症组分别为33.3%和25%,两组阳性率比较差异有统计学意义（P<0.01）。（2）重症组患儿体温39.0℃以上、肢体抖动、呕吐、肢体乏力的发生率分别为91.5%、100%、4.2%、7.3%,普通组为56.2%、0%、0%、4.1%;重症组39.0℃以上、肢体抖动、呕吐的发生率与普通组相比差异具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;重症组患儿平均住院时间为（5.11±1.35）d,普通组为（3.11±1.32）d,重症组患儿平均住院时间高于普通组,差异有统计学意义（P<0.01）。（3）重症组白细胞、中性粒百分比、谷丙转氨酶、肌酸激酶同工酶、血糖和超敏C反应蛋白与普通组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。（4）重症组、普通组、对照组血清中的S100B的含量分别为（1.79±0.30）,（0.33±0.11）和（0.15±0.04）ng/ml,重症组血清中S100B含量明显高于普通组及对照组（P<0.01）;普通组血清中S100B含量明显高于对照组（P<0.01或P<0.05）。（5）重症组、普通组、对照组血清中的NSE的水平分别为（53.27±14.91）,（6.76±3.49）,（6.35±3.44）ng/ml。重症组血清中NSE含量均明显高于普通组及对照组（P<0.01）,普通组血清中NSE表达量与对照组相比差异无明显统计学意义（P>0.05）。（6）重症组头颅MRI提示脑实质有损害影像者52例,占54.7%,脑实质有损害的患儿MRI可见脑组织单发或多发异常信号（T1WI低信号、T2WI高信号）,其中单发脑实质损伤者30例,多发脑实质损伤者22例,损伤部位以基底节、丘脑及脑干区多见。（7）随访发现,重症2期组患儿中有12例发展至3期以上,其中11例3期,1例4期。并发现发展至3-4期的患儿头颅MRI均有异常改变（8例有多发性脑实质损害,2例为单发的脑干病变）,发展至3-4期的12例患儿的NSE和S100B水平较病情被及时控制而未再进展83例2期患儿的数值明显增高,两者比较有统计学意义（P<0.01）。结论:（1）EV71为引起手足口病重症第2期的主要病原体。（2）体温39.0℃以上、肢体抖动、呕吐、白细胞增高、超敏-C反应蛋白水平的显着升高对手足口病重症第2期患儿的早期临床观察有一定的指导性及参考价值。（3）血清S100B、NSE含量水平对早期识别重症手足口病（第2期）有一定的指导性及参考价值。（4）手足口病重症第2期患儿头颅MRI脑实质损害比例比较高,MRI联合NSE和S100B的水平对于评估手足口病的病情及预测手足口病的进展以及预后评估有较高敏感性及临床价值。
张鹏[7]（2019）在《S100B、IL-1B、IL-6联合检测对青壮年颅脑损伤诊断及预后关系的研究》文中提出目的:探讨青壮年创伤性颅脑损伤（TBI）患者血清、脑脊液中S100蛋白质B（S100B）、白细胞介素1B（IL-1B）、白细胞介素6（IL-6）联合检测对辅助TBI诊断和评价预后评估的价值。方法:选取我院神经外科术后转入ICU病房治疗的青壮年TBI患者132例作为观察组（轻型35例,中型55例,重型42例）,同期非TBI住院青壮年需行脑脊液穿刺检查者50例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清、脑脊液中S100B、IL-1B和IL-6的含量。应用ROC曲线分析S100B联合IL-1B、IL-6对TBI的诊断价值,分析血清S100B、IL-1B、IL-6水平与TBI病人预后的相关性。统计分析均采用SPSS 19.0软件,计量数据都采用`x±s表示,P<0.05为差异有统计学意义。结果:（1）观察组重型患者血清（F=8.3518.769,P<0.05）及脑脊液（F=8.3678.967,P<0.05）中S100B、IL-1B、IL-6含量显着高于对照组;（2）观察组血清中和脑脊液中S100B、IL-1B、IL-6的含量均呈正相关关系（r=0.830.89,均P<0.05）;（3）血清S100B、IL-1B、IL-6及三者联合检测诊断TBI的ROC曲线下面积分别为0.810、0.758、0.703和0.922;（4）观察组血清（F=8.6718.849,P<0.05）及脑脊液（F=8.9489.371,P<0.05）中S100B、IL-1B、IL-6表达水平与青壮年TBI预后呈负相关关系。结论:血清、脑脊液中S100B、IL-1B、IL-6与病情和预后严重程度密切相关,且三者联合诊断效率高于单独检测。
陆敏[8]（2019）在《创伤性颅脑损伤患者血清与脑脊液中S100B和NSE的动态变化及其临床意义》文中提出目的:通过观察创伤性颅脑损伤（Traumatic brain injury,TBI）患者血清与脑脊液中S100钙结合蛋白B（S100 calcium-binding protein B,S100B）和神经特异性烯醇化酶（Neuron-specific enolase,NSE）水平的动态变化,探讨其与TBI严重程度和预后的关系。方法:选取2017年10月至2018年11月期间,收入苏州大学附属常熟医院重症监护病房（Intensive care units,ICU）,行脑室外引流及脑室内颅内压监测的创伤性颅脑损伤患者31例。采用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法测定患者术后6h、12h、24h、48h、72h及第5天血清及脑脊液中S100B及NSE水平,同时动态记录患者的颅内压（Intracranial pressure,ICP）、格拉斯哥昏迷量表（Glasgow coma scale,GCS）和全面无反应（Full outline of unresponsiveness,FOUR）评分。术后3个月随访进行格拉斯哥结局量表（Glasgow outcome scale,GOS）评分,并将患者分为预后不良组（GOS Ⅰ-Ⅲ级）和预后良好组（GOS Ⅳ-Ⅴ级）。结果:（1）预后不良组患者入院时的GCS评分及FOUR评分明显低于预后良好组（P<0.05）,预后不良组的急性生理和慢性健康评分Ⅱ（Acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHE Ⅱ）和 Helsinki CT评分显着高于预后良好组（P<0.05）;（2）TBI患者术后脑脊液中的S100B和NSE浓度明显高于其在血清中的浓度,差异有统计学意义（P<0.05）;（3）脑脊液和血清S100B浓度在术后24小时达到峰值,分别为2.89μg/L和1.94μg/L;（4）脑脊液和血清NSE浓度在术后72小时达到峰值,分别为106.07μg/L和70.65μg/L;（5）TBI患者术后血清S100B及NSE水平与脑脊液中的S100B及NSE的变化趋势具有相关性（P<0.05）。结论:在TBI手术后患者中,血清和脑脊液中的S100B、NSE均存在密切相关的变化;S100B水平的变化在反映患者病情和预后方面优于NSE的变化;脑脊液中的S100B较血清中S100B能更加迅速的反映颅脑创伤病情的动态变化。
刘梅[9]（2019）在《血清中枢神经特异蛋白S100B检测在新生儿脑损伤疾病中的临床应用价值》文中进行了进一步梳理目的评价血清中枢神经特异蛋白S100B在新生儿胆红素脑病、新生儿缺氧缺血性脑病和新生儿感染性脑损伤中的诊断价值。方法选择2016年9月-2018年11月蚌埠医学院第一附属医院新生儿重症监护病房（NICU）收治,并确诊为新生儿脑损伤的足月新生儿209例作为观察组,其中新生儿缺氧缺血性脑病新生儿105例,新生儿胆红素脑病64例,新生儿感染性脑损伤的40例;并选择同期因其他原因住院而无脑损伤的足月新生儿44例作为对照组。利用电化学发光法分别检测两组血清S100B蛋白和NSE浓度并比较差异程度;绘制各组的受试者工作特征（ROC）曲线,通过与传统脑损伤标志物NSE对比,分析S100B蛋白及NSE、S100B蛋白二者联合检测诊断新生儿脑损伤疾病ROC曲线下面积、敏感度和特异度。结果（1）观察组血清S100B蛋白和NSE水平均显着高于对照组（P<0.05）。（2）血清S100B检测诊断新生儿脑损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤的最佳临界值分别为420.00ng/L、420.00ng/L、410.50ng/L和424.00ng/L;灵敏度分别为64.1%、55.2%、78.1%和72.5%;特异度分别为97.7%、97.7%、93.2%和97.7%。血清NSE检测新生儿脑损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤的最佳临界值分别为16.57μg/L、16.70μg/L、16.8μg/L和16.11μg/L;灵敏度分别为69.4%、77.1%、70.3%和60.0%。特异度分别为95.5%、95.5%、95.5%和88.6%。二者联合检测的灵敏度分别为87.6%、86.7%、87.5%和82.5%。特异度分别为95.5%、97.7%、97.7%和95.5%。（3）血清S100B蛋白检测新生儿脑损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤ROC曲线下面积分别为0.866、0.809、0.937和0.899;血清NSE检测新生儿脑损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤的ROC曲线下面积分别为0.840、0.892、0.839和0.728;二者联合检测新生儿脑损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤的ROC曲线下面积分别为0.963、0.964、0.975和0.958。（4）各组中二者联合检测的ROC曲线下面积均显着大于S100B蛋白和NSE检测,差异具有统计学意义（P<0.05）;新生儿缺氧缺血性脑病组NSE检测ROC曲线下面积大于S100B蛋白检测的结果,但差异不具有统计学意义（P=0.0649）,新生儿胆红素脑病组和新生儿感染性脑损伤组中,S100B蛋白检测的ROC曲线下面积均明显大于NSE检测的结果,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论血清S100B蛋白和NSE均可作为脑损伤标志物;各组血清S100B蛋白和NSE联合检测在脑损伤的诊断价值均优于单个标志物检测;其中在新生儿缺氧缺血性脑病时NSE的诊断价值略优于S100B蛋白,在新生儿胆红素脑病和新生儿感染性脑损伤中S100B蛋白的诊断价值优于NSE。
王昊[10]（2018）在《急进高原轻-中度闭合性颅脑撞击伤后在不同海拔下伤情变化的研究》文中研究指明第一部分:新型气动式闭合性颅脑撞击伤模型目的:创伤性颅脑损伤（Traumatic brain injury,TBI）会对机体造成不同程度的损害,轻度至重度的颅脑损伤后的病理生理变学表现是不同的。为研究TBI的病因学和病理学生理学机制,目前有几种啮齿类动物颅脑损伤的模型包括液压冲击（Fluid percussion impact,FPI）、可控皮层冲击系统（controlled cortical impact systems,CCI）和落锤撞击模型（weight-drop models）用来模拟和研究颅脑损伤。虽然这些模型可以模拟人类TBI后的某些病理特征,但没有一种较好的动物模型可用来再现人类的闭合性颅脑损伤。本研究旨在改变以往的致伤方式,建立以气动冲击产生加速装置的一种新可分级的大鼠闭合性颅脑撞击伤（closed head impacts,CHI）模型,以模拟人类真实环境下的颅脑撞击伤后产生的颅脑及神经功能损伤。方法:选择雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠75只,平均体质量（200±20）g,随机分为五组:假手术组（Sham）、0.5、0.6、0.7和0.8 MPa组,每组15只。应用自制空气驱动装置产生加速度撞击大鼠头部致伤,气压范为0.5-0.8兆帕（MPa）,对应的冲击力和加速度分别为:I组（0.5 Mpa）:785.3±14.12牛顿（N）、5.71米/秒（m/s）;II组（0.6 MPa）:837.72±10.41 N、6.06 m/s;III组（0.7 MPa）:857.65±11.11 N、6.25 m/s;IV组（0.8 MPa）:955.6±16.35 N、6.67 m/s。致伤过程中的运动参数由力学传感器和高速摄像机记录。伤后检测死亡率、昏迷时间（翻正反射时间）、改良神经功能缺损评分（mNSS）、脑含水量（BWC）。HE染色和淀粉样前体蛋白（APP）免疫组织化学染色检测病理改变。结果:随缸内气压的升高,力学输出也随之升高,导致大鼠损伤程度加重。0.5、0.6、0.7和0.8 MPa组的翻正反射时间明显高于假手术组（P<0.05）。CHI后24 h检测mNSS评分、BWC值和MRI定量分结果发现CHI伤后24 h时0.8 MPa组损伤程度明显高于0.6和0.7 MPa组,但后两组又明显高于0.5 MPa组（P<0.05）,0.6与0.7 MPa组之间比较无统计学差异。检测CHI大鼠脑内APP时发现在大脑皮层、胼胝体和脑干区域其表达增加,这也明确提示在模拟CHI后脑组织出现弥漫性轴索损伤的表现。随气压的提高产生的加速度也越大,造成的损伤也逐渐加重,因此可根据给予0.5/0.6-0.7/0.8 MPa的来进行伤情分级。结论:本实验建立的CHI大鼠模型是一种操作简便、可控性强、重复性好的模拟不同程度的闭合性颅脑损伤模型,CHI所致的损伤程度与气缸内压力改变引起的冲击速度变化呈正相关,可根据调节气压来控制神经功能的损害程度。本研究为不同损伤程度的闭合性颅脑损伤的发病机制和治疗方式提供了有用的实验模型。第二部分:急进高原轻-中度闭合性颅脑撞击伤后转运至不同海拔高度对伤情的影响目的:由于高原地区的特殊的地理环境,目前对低压、低氧后轻-中度闭合性颅脑损伤后伤情及病理生理变化仍未有深入的了解。发生损伤后的不适当运输会对患者健康带来危害,甚至危及生命。本文旨在观察急进高原地区轻、中度闭合性颅脑损伤（mild-to-moderate closed head injury,mmCHI）急性期转运至不同海拔高度下的伤情变化并提出救治策略,以期提高救治成功率、改善预后而提高生存质量。方法:健康平原饲养的雄性SD大鼠108只,首先称量基础体质量。模拟海拔6,000m持续低压、低氧处理24 h后再次称体质量。采用气动式撞击装置制作轻-中度闭合性颅脑撞击伤模型,观察大鼠致伤后生命体征变化并进行改良神经功能缺损评分（mNSS）评分,随机分为3个不同海拔高度组[ND（Non-descending altitude）、D-4,500m（descent to 4,500m altitude）、D-3,000 m（descent to 3,000 m altitude）]进行观察,并分别对相应海拔高度下大鼠在mmCHI后6 h、12 h、24 h的NSS评分、体质量（body weight,BW）、脑含水量（brain water content,BWC）、脑含水量与体质量的比值（BWC/BW）及颅脑核磁（MRI）检查。结果:急进高原mmCHI大鼠在致伤后6 h各海拔高度组mNSS评分减少值明显低于伤后12 h、24 h评分减少值,P<0.05;伤后快速下降的D-3,000 m组大鼠体质量下降最少,与伤后滞留于6,000m的ND组及下降海拔高度的D-4,500 m组比较差异具有显着统计学意义,P<0.05;伤后各海拔高度组脑含水量（BWC）比较无统计学意义;但伤后计算各组脑含水量占体质量（BWC/BW）的比值发现,伤后快速下降的D-3,000 m组大鼠BWC/BW的值高于伤后D-4,500 m组且低于滞留于海拔6,000m（ND组）,其差异具有统计学意义,P<0.05;大鼠在mmCHI后6 h、12 h、24 h的动态MRI检查后定量检测分析结果显示伤后下D-4,500 m组的大鼠在胼胝体水肿及脑室扩张程度明显低于其他海拔高度组,统计学差异显着,P<0.05。结论:高海拔极限环境下轻-中度闭合性颅脑损伤后24 h内伤情变化在不同海拔高度下表现不同,急进高原mmCHI后可引起较严重的脑水肿和体重减轻,应予以高度高重视。在伤后应尽早改善通气、补液、缓解脑水肿,同时进行早期、阶段转运至低海拔地区治疗,避免大跨度降低海拔高度,有利于缓解脑外伤后的继发性损伤,早期动态进行MRI检查可提示脑组织损伤程度,对预后判断及临床诊治具有指导意义。第三部分:急进高原轻-中度闭合性脑损伤后转运至不同海拔高度脑组织GFAP及炎症因子变化的研究目的:急进高原mmCHI后大鼠免疫应激反应及继发性脑损伤的机制尚未澄清。急性缺氧和颅脑损伤均可引起明显的炎症反应,是继发性颅脑损伤的机制之一。为研究在相同致伤因素下不同低压、缺氧条件对颅脑损伤伤情影响的可能机制。本研究在前期实验的基础上,进一步检测致伤后不同低压、缺氧状态下脑组织内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞及炎症因子（白细胞介素-1β,IL-1β;肿瘤坏死因子,TNF-α）的表达情况,研究其在急性低压、缺氧大鼠颅脑损伤后不在同海拔高度下表现的关系及炎症反应过程中NF-κB信号通路的调控作用,探索高原颅脑损伤后早期转运对伤情变化的影响及继发性脑损伤可能机制。方法:将健康SD大鼠18只模拟海拔6,000 m持续低压、低氧处理24 h后采用气动式撞击装置制作轻-中度闭合性颅脑撞击伤模型,致伤后按的海拔高度[6,000m（ND）、4,500 m（D-4,500 m）、3,000 m（D-3,000 m）]随机按分成三个组（n=6/组）,ND组作为阳性对照。将致伤后大鼠置于低压舱内,自由饮食、水,于伤后24 h时进行头部MRI扫描后处死,取大鼠脑组织作GFAP免疫荧光染色,Western Blot检测伤后白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF-α）及核转录因子-κB（NF-κB）的表达量并对检测结果进行定量分析。结果:急性低压、缺氧状态的脑损伤后24 h,各组大鼠脑内GFAP阳性星形胶质细胞表及炎症因子达量明均显增多。定量分析发现,D-3,000 m组GFAP阳性星形胶质细胞比率（45.32±4.17）显着高于D-4,500 m组（36.26±3.55）,但明显低于ND组（56.88±5.62）,差异具有统计学意义（P<0.05）。D-4,500 m和D-3,000 m组IL-1β和TNF-α水平分别为:IL-1β/GAPDH:0.69±0.07、0.78±0.08;TNF-α/GAPDH:0.72±0.06、0.84±0.08,与ND组（IL-1β/GAPDH:1.00±0.09;TNF-α/GAPDH:1.00±0.10）相比显着降低（P<0.05）。同时,D-4,500 M组IL-1β和TNF-α水平与D-3,000m组比较也有所降低,差异具有显着统计学意义（P<0.05）。对NF-κB phospho-p65和p65蛋白的表达进行检测结果发现D-4,500 m和D-3,000 m组phospho-p65和p65水平分别为:0.62±0.06、0.76±0.07;0.48±0.05、0.78±0.08,与ND组（phospho-p65/GAPDH:1.00±0.09;p65/GAPDH:1.00±0.10）相比显着降低（P<0.05）。同时,D-4,500 m组phospho-p65和p65的水平也显着低于D-3,000 m组,差异具有显着统计学意义（P<0.05）。结论:颅脑损伤后星形胶质细胞GFAP的表达量可作为一种判断急进高原mmCHI严重程度以及指导临床在伤后转运中判断伤情变化的标志物之一。低压、缺氧性颅脑损伤后NF-κB的激活参与了炎性因子IL-1β、TNF-α的调控,与继发性脑损伤的病理生理有关,NF-κB的抑制或激活与不同的低压、缺氧状态有关。调节低压、缺氧状态将对减轻高原颅脑损伤后的脑继发脑性损伤有着十分重要的意义。
二、ELISA检测颅脑损伤患者血清S100B蛋白变化及其意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、ELISA检测颅脑损伤患者血清S100B蛋白变化及其意义（论文提纲范文）
（1）感染性颅内高压患儿血清及脑脊液S100B、NSE、LA与临床特点的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 起病初期临床表现差异比较 |
| 2.2 常规实验室指标比较 |
| 2.3 两组患儿颅脑MRI与CT病灶检出率比较 |
| 2.4 各年龄段两组患儿脑脊液压力变化比较 |
| 2.5 三种脑炎轻型病例和重型病例脑脊液压力比较 |
| 2.6 各组患儿血清和脑脊液中S100B、NSE、LA水平比较 |
| 2.7 三种脑炎患儿血清和脑脊液中S100B、NSE、LA水平比较 |
| 2.8 患儿S100B、NSE在血清和脑脊液的水平与病情严重程度的关系分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 起病初期临床表现特点和常规实验室检查对感染性颅内高压的意义 |
| 3.2 颅脑MRI检查对感染性颅内高压的意义 |
| 3.3 血清和脑脊液NSE、S100B，LA对早期预测感染性颅内高压的意义 |
| 3.4 S100B、NSE及LA在血清和脑脊液中的水平与病情严重程度的相关性分析 |
| 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 PCT、S100B、NSE及MRI在儿童感染性颅内高压的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获得的科研成果 |
（2）惊厥持续状态患儿血清及脑脊液S100B、NSE、TNF-α与临床特征的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法与步骤 |
| 2 结果 |
| 2.1 起病初临床表现比较 |
| 2.2 实验室常规辅助检查比较 |
| 2.3 研究对象的病因构成比较 |
| 2.4 各组血清及脑脊液中S100B、NSE、TNF-α的水平比较 |
| 2.5 血清和脑脊液中S100B、NSE、TNF-α水平与病情的严重程度的关系分析 |
| 2.6 血清与脑脊液中 S100B、NSE 和 TNF-α的相关性分析 |
| 2.7 持续惊厥组各EEG特征血清及脑脊液中的S100B、NSE、TNF-α水平比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 一般临床特征和辅助检查对早期预测惊厥持续状态的意义 |
| 3.2 病因对预测早期惊厥持续状态的意义 |
| 3.3 血清和脑脊液中S100B、NSE、TNF-α水平变化对早期预测惊厥持续状态的意义 |
| 3.4 脑电图(EEG)结果对早期预测惊厥持续状态的意义 |
| 4 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 惊厥性癫痫持续状态患儿相关指标及头颅磁共振成像价值的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获得的科研成果 |
（3）降钙素基因相关肽（CGRP）通过调控Akt/mTOR信号通路介导的凋亡和自噬减轻创伤性颅脑损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 创伤性颅脑损伤患者血清CGRP水平及与预后的关系 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 降钙素基因相关肽(CGRP)对创伤性颅脑损伤模型小鼠的神经功能保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 降钙素基因相关肽(CGRP)对创伤性颅脑损伤后神经元细胞自噬和凋亡的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 AKT/mTOR信号通路参与了外源性CGRP对神经元细胞自噬和凋亡的调控 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 自噬和凋亡在颅脑创伤治疗中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 降钙素基因相关肽CGRP在神经系统疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）Ac-FLTD-CMK对小鼠创伤性脑损伤后的神经保护作用及血糖/血钾比值对创伤性脑损伤患者预后价值的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 Ac-FLTD-CMK对小鼠创伤性脑损伤后细胞焦亡的抑制及神经保护作用的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 血糖/血钾比值对中重度创伤性脑损伤患者预后的预测价值研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 创伤性颅脑损伤后细胞焦亡的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 创伤性颅脑损伤体液标记物的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）新生儿窒息的相关生物标志物研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 一、新生儿脑损伤发病原因及机制 |
| 二、脑损伤的生物标志物研究进展 |
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、检测指标及方法 |
| 三、统计学分析 |
| 结果 |
| 一、研究对象的基本资料 |
| 二、生物标志物结果分析 |
| 三、S100B、载脂蛋白M与S100A8蛋白水平之间的相关性分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 新生儿脑损伤相关生物标志物的研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）手足口病重症第2期患儿临床特征与S100B、NSE、头颅MRI的关联性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略图对照表 |
| 前言 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 样本的采集与处理 |
| 1.3 主要的试剂 |
| 1.4 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测S100B、NSE实验原理及操作方法 |
| 1.5 临床磁共振成像(MRI)检查 |
| 1.6 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 HFMD病原学监测结果 |
| 2.2 临床症状特征比较 |
| 2.3 实验室常规辅助检查检测结果 |
| 2.4 重症组、普通组、对照组 3 组血清中 S100B 和 NSE 水平的检测比较 |
| 2.5 重症组患儿S100B、NES水平与头颅MRI特征比较 |
| 2.6 短期随访结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 手足口病流行病学特征 |
| 3.2 手足口病重症2期体征、辅助检查对早期诊断的意义 |
| 3.3 S100B和 NSE水平增高与HFMD严重度关联性分析 |
| 3.4 S100B、NSE与 MRI联合对HFMD病情、预后评估的价值 |
| 3.5 预后分析 |
| 4 不足及展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获得的科研成果 |
（7）S100B、IL-1B、IL-6联合检测对青壮年颅脑损伤诊断及预后关系的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 研究材料与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 实验仪器、试剂及耗材 |
| 3 研究方法 |
| 4 统计学分析 |
| 研究结果 |
| 1 患者资料 |
| 2 一般资料分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 个人简介 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
（8）创伤性颅脑损伤患者血清与脑脊液中S100B和NSE的动态变化及其临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 序言 |
| 对象与方法 |
| 1. 研究对象 |
| 1.1 病例资料来源 |
| 1.2 相关定义 |
| 1.3 患者分组 |
| 2. 研究方法 |
| 2.1 设计方法 |
| 2.2 TBI患者的治疗 |
| 2.3 观察指标和方法 |
| 2.4 数据处理与统计学分析 |
| 2.5 伦理 |
| 结果 |
| 1. 患者的基本情况 |
| 2. TBI患者脑脊液中S100B、NSE的动态变化 |
| 3. 患者血清与脑脊液S100B、NSE水平的相关性分析 |
| 3.1 血清与脑脊液S100B水平的相关性分析 |
| 3.2 血清与脑脊液NSE水平的相关性分析 |
| 4. 血清和脑脊液中的S100B、NSE与预后的相关性 |
| 4.1 不同预后患者血清和脑脊液中S100B的差异 |
| 4.2 不同预后患者血清和脑脊液中NSE的差异 |
| 4.3 血清和脑脊液S100B和NSE的ROC曲线 |
| 5. 不同预后患者机械通气、住院时间及住院费用分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 攻读学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（9）血清中枢神经特异蛋白S100B检测在新生儿脑损伤疾病中的临床应用价值（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 研究对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 附录A:主要中英文缩写词 |
| 附录B:个人简历及发表论文 |
| 附录C:综述 |
| 参考文献 |
（10）急进高原轻-中度闭合性颅脑撞击伤后在不同海拔下伤情变化的研究（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 新型气动式闭合性颅脑撞击伤模型 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 急进高原轻中度闭合性颅脑撞击伤伤情变化的观察 |
| 3.1 材料方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 急进高原轻-中度闭合性脑损伤后转运至不同海拔高度脑组织GFAP及炎症因子变化的研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 创伤性颅脑损伤后血清GFAP蛋白的变化与伤情及预后的Meta分析 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 高原颅脑创伤的诊疗进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
四、ELISA检测颅脑损伤患者血清S100B蛋白变化及其意义（论文参考文献）
- [1]感染性颅内高压患儿血清及脑脊液S100B、NSE、LA与临床特点的相关性研究[D]. 岑贞颐. 右江民族医学院, 2021(01)
- [2]惊厥持续状态患儿血清及脑脊液S100B、NSE、TNF-α与临床特征的相关性研究[D]. 廖良华. 右江民族医学院, 2021(01)
- [3]降钙素基因相关肽（CGRP）通过调控Akt/mTOR信号通路介导的凋亡和自噬减轻创伤性颅脑损伤的实验研究[D]. 田军. 河北医科大学, 2021(02)
- [4]Ac-FLTD-CMK对小鼠创伤性脑损伤后的神经保护作用及血糖/血钾比值对创伤性脑损伤患者预后价值的研究[D]. 王鹏飞. 河北医科大学, 2021(02)
- [5]新生儿窒息的相关生物标志物研究[D]. 祁陆石. 苏州大学, 2019(02)
- [6]手足口病重症第2期患儿临床特征与S100B、NSE、头颅MRI的关联性分析[D]. 袁林杨. 右江民族医学院, 2019(01)
- [7]S100B、IL-1B、IL-6联合检测对青壮年颅脑损伤诊断及预后关系的研究[D]. 张鹏. 青岛大学, 2019(03)
- [8]创伤性颅脑损伤患者血清与脑脊液中S100B和NSE的动态变化及其临床意义[D]. 陆敏. 苏州大学, 2019(04)
- [9]血清中枢神经特异蛋白S100B检测在新生儿脑损伤疾病中的临床应用价值[D]. 刘梅. 蚌埠医学院, 2019(01)
- [10]急进高原轻-中度闭合性颅脑撞击伤后在不同海拔下伤情变化的研究[D]. 王昊. 中国人民解放军陆军军医大学, 2018(03)