一、EGCG对H_2O_2诱导的螺旋神经节细胞MnSOD基因表达的影响（论文文献综述）
张洋[1]（2021）在《罗布麻叶总黄酮及异槲皮苷对吡柔比星致心脏损伤的保护作用和机制》文中研究表明蒽环类药物,包括多柔比星（Doxorubicin,DOX）、表柔比星（Epirubicin,EPI）、吡柔比星（Pirarubicin,THP）等,广泛用于实体恶性肿瘤和血液系统肿瘤的治疗,但是蒽环类药物的心脏毒性在一定程度上限制了其临床应用。右雷佐生（Dexrazoxane,DZR）是目前FDA唯一批准使用的心脏保护药,但有报道发现DZR可能会加重化疗药物引起的骨髓抑制,并诱发第二癌的发生。因此,寻求一种减轻蒽环类药物所致心脏损伤的药物显得尤为重要。罗布麻叶总黄酮（AVLE）为罗布麻叶的主要活性成分,具有抗高血压、抗焦虑、抗抑郁和保护心脏等药理作用,随着对AVLE研究的不断深入,其对心血管系统疾病的防治作用已成为研究热点。异槲皮苷,又称槲皮素-3-O-葡萄糖苷（Isoquercitrin,IQC）是一种天然黄酮类化合物,是AVLE中有效成份之一,广泛存在于水果、蔬菜、谷物和多种饮品中,具有抗氧化应激、抗肿瘤、保护心血管、降血糖及抗过敏等多种药理作用。非编码RNA（noncoding RNA,ncRNA）在许多重要生命活动中发挥功能,随着微小RNA（microRNA,miRNA）在人类疾病中的作用逐渐被揭示,深化miRNA的研究对于理解疾病发生发展的分子机制具有现实意义。本研究首先通过体内、外实验探讨IQC和AVLE对THP诱导的心脏损伤的保护作用及机制,然后通过生物信息学分析构建miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2信号通路,以此信号通路为切入点,利用AKT阻断剂及miRNA过表达/沉默瞬转细胞,从细胞水平加以验证,以期为开发和利用以IQC和AVLE为药效成分的中药资源提供科学依据。研究分为5部分:（1）AVLE对THP诱导大鼠心脏损伤的保护作用及机制首先预防性灌胃给予大鼠不同剂量的AVLE 1w,然后尾静脉注射THP（3mg/kg/w,6w）建立大鼠慢性心脏损伤模型,同时继续灌胃给予大鼠AVLE。观察大鼠心电图和大鼠心脏组织形态变化,并对血液动力学、血清BNP、CK-MB、CTn T和LDH水平、氧化应激相关指标、心肌线粒体膜m RNA水平及AKT/Bcl-2信号通路相关蛋白进行检测,探讨AVLE对THP诱导大鼠心肌损伤的保护作用及其可能的分子机制。结果如下:（1）AVLE中、高剂量组可提高THP所致心脏损伤大鼠的心率,减轻QRS波群改变,降低LVEDP,提高LVSP和±dp/dtmax水平;降低血清BNP、CK-MB、CTn T和LDH水平,提高SOD活性,降低MDA含量;改善THP所致的心肌病理学改变;降低心脏组织内线粒体膜VDAC1、ANT1和CYPD m RNA的表达,改善线粒体膜通透性。AVLE低剂量组对上述指标改善不明显。（2）AVLE抑制Cyt c由线粒体向胞浆的释放;提高pro-caspase-9、pro-caspase-3、p-AKT和Bcl-2蛋白的表达,降低Bax、cleaved-caspase-3的蛋白水平,减轻THP诱导心脏组织细胞凋亡的发生。（2）AVLE的制备及成份分析采用醇提法制备AVL提取物,大孔树脂进行纯化,富集其中黄酮类化合物。利用液相色谱-质谱串联法（HPLC-ESI-MS/MS）和高效液相色谱法（HPLC）分析技术对AVLE进行定性和定量分析。结果如下:AVLE中含有7个黄酮类化合物,随后对其中4个主要单体化合物进行定量分析,确定IQC为AVLE中含量最多的化合物。（3）AKT在AVLE和IQC保护THP诱导H9c2细胞损伤中的作用以THP诱导H9c2细胞损伤,加入IQC/AVLE及AKT inhibitor,应用MTT、DCFH-DA荧光探针、ELISA、Mito-Tracker Red CMXRos探针、JC-1探针、TUNEL、RT-qPCR、Western blot等方法,探讨AKT在AVLE和IQC保护THP诱导H9c2细胞损伤中的作用。结果如下:（1）IQC（5～500μM）和AVLE（5～400μg/ml）在不同时间点（6、12、24及36h）对H9c2细胞无毒性作用;以5μM THP处理H9c2细胞24h,可使细胞发生凋亡,存活率降低;而IQC和AVLE均可抑制THP诱导的H9c2细胞损伤,最佳给药浓度及时间为70μM及70μg/ml,24h。IQC或AVLE均可降低THP处理H9c2细胞内ROS含量,提高SOD活性,降低MDA含量;提高H9c2细胞内线粒体活力,改善细胞线粒体膜电位,降低线粒体膜相关基因的表达。（2）IQC和AVLE提高H9c2细胞内pAKT的蛋白表达,抑制Cyt c由细胞线粒体向胞浆释放,降低细胞凋亡率,同时降低胞浆内cleaved-caspase-3蛋白表达水平,提高pro-caspase-9和procaspase-3的蛋白水平和Bcl-2/Bax的蛋白比值;应用AKT inhibitor可阻断IQC或AVLE对THP诱导细胞损伤的保护作用,说明AKT为IQC或AVLE发挥心脏保护作用的节点分子。（4）THP诱导大鼠心脏损伤miRNA芯片生物信息学分析及miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2信号通路的构建和验证对课题组前期构建THP所致大鼠心脏损伤的miRNA表达谱进行分析,最终确定miR-190a-5p作为研究对象。通过对miR-190a-5p靶基因预测和KEGG富集分析,发现在Phlpp1 m RNA的3’UTR处有miR-190a-5p的潜在结合位点,靶向性较好,且Phlpp1位于AKT上游调控分子中;同时搜索AVL靶基因并对其进行KEGG富集分析,结果发现AVL可参与调控AKT及其下游Bcl-2家族蛋白。因此,构建出miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2信号通路。采用RT-qPCR和Western blot法对预测得到的miR-190a-5p及其靶基因Phlpp1在THP所致大鼠心脏损伤组织/H9c2细胞中进行初步验证,结果发现IQC和AVLE可提高miR-190a-5p的表达,抑制Phlpp1基因和蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验证实,miR-190-5p可直接调控Phlpp1,且只有唯一一个结合位点。（5）miR-190a-5p在THP诱导H9c2细胞损伤中的作用及机制通过构建miR-190a-5p过表达/沉默瞬转H9c2细胞,采用DCFH-DA探针、ELISA、Mito-Tracker Red CMXRos探针、JC-1探针、RT-qPCR、TUNEL和Western blot实验方法,探讨miR-190a-5p在THP处理H9c2细胞损伤中的作用及机制。结果如下:（1）miR-190a-5p mimics降低H9c2细胞内ROS的含量,提高SOD活性,降低MDA含量;同时提高H9c2细胞线粒体活力和膜电位,降低线粒体膜基因的表达;而转染miR-190a-5p inhibitor对THP处理H9c2细胞无改善作用。（2）miR-190a-5p mimics升高H9c2细胞内miR-190a-5p的表达,抑制Phlpp1基因及蛋白,升高p-AKT蛋白表达,并抑制Cyt c由线粒体向胞浆释放,降低细胞凋亡率,同时降低胞浆内cleaved-caspase-3蛋白表达,提高procaspase-9和pro-caspase-3的蛋白水平和Bcl-2/Bax蛋白比值;而转染miR-190a-5p inhibitor对THP处理的H9c2细胞中上述基因及蛋白无改善作用。综上所述:本研究分别从整体动物水平和细胞水平探讨IQC和AVLE对THP诱导大鼠心脏组织/H9c2细胞损伤的保护作用及其机制,所得结论如下:1.在体内研究中,AVLE对THP所致大鼠心肌损伤具有保护作用。2.通过对AVLE进行定性和定量分析,推测出7个黄酮类化合物,其中IQC是含量最多的化合物,为16.7%。3.在体外研究中,IQC和AVLE对THP诱导的H9c2细胞的损伤具有保护作用,且二者的保护作用相等。4.IQC和AVLE对THP诱导心脏/心肌细胞损伤的保护作用是通过调控miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2信号通路实现的,且AKT为二者发挥心脏保护作用的节点分子。
王晓宇[2]（2020）在《Src通过ANLN-1稳定高尔基体促进受损神经元突起形成的实验研究》文中研究说明CNS再生能力明显低于周围神经系统（PNS）,是由于神经元成熟过程中,轴突延伸能力逐渐萎缩,如何唤醒神经元再生能力,恢复神经功能是急需解决的难题。文献表明,神经损伤后,神经元内Src的磷酸化受到抑制,从而影响突起的形成和生长,激活的Src还通过F-actin骨架调节高尔基体的结构与亚细胞定位,避免高尔基体的裂解,但其作用机制不清。激活的Src家族相关蛋白YAP,可促进ANLN的表达,稳定F-actin。ANLN又可通过Septin保持高尔基体结构完整。敲除ANLN,突起形成、导向和分支都受到干扰,说明ANLN调控了神经元增殖和突起形成。我们前期工作表明,脊髓损伤30min后,神经元高尔基体分散、碎片化。那么,Src是否与ANLN共同调解F-actin保护受损神经元呢?我们推测Src可能通过ANLN稳定高尔基体结构,促进损伤神经元突起形成及生长。本研究应用H2O2建立原代皮层神经元氧化损伤模型。应用Src激活剂激活Src。设计ANLN-RNAi,干扰神经元ANLN-1的表达。应用形态学与分子生物学技术阐明Src是否通过ANLN-1稳定高尔基体结构,促进损伤神经元突起形成。方法:原代培养SD大鼠乳鼠皮层神经元,应用MTT法确定过氧化氢浓度,构建神经元氧化应激损伤模型。采用RNAi技术转染皮层神经元,应用RT-PCR技术检测ANLN m RNA表达的变化;在ANLN沉默后加入Src激活剂（SA）,免疫组织细胞化学染色观察p Src和高尔基体的分布。应用Western blot技术检测p Src、ANLN蛋白水平的变化;利用Phalloidin（鬼笔环肽）标记肌动蛋白（F-actin）,观察ANLN干扰后损伤神经元突起的变化。结果:1.神经元氧化应激损伤模型的构建100μm H2O2处理24h后的神经元活性明显低于对照组。神经元损伤24h后,鬼笔环肽标记F-actin结果表明,初级突起数和分支复杂程度都明显低于对照组。2.Src激活对H2O2损伤神经元ANLN-1、p Src和高尔基体的作用GM130的免疫荧光染色显示H2O2组高尔基体分散,长度明显高于对照组。H2O2+SA组初级突起数和分支复杂程度明显增加。Western blot结果显示,H2O2组p Src和ANLN表达明显低于对照组,H2O2+SA组p Src和ANLN表达明显多于H2O2组。3.Src通过ANLN-1稳定高尔基体调节损伤神经元突起形成氧化应激状态下,激活Src,沉默ANLN,发现H2O2+ANIi干扰组和H2O2+ANIi+SA组细胞核中ANLN表达明显降低。免疫细胞化学染色显示,H2O2组突起末端中p Src表达明显低于对照组,H2O2+SA组突起末端中p Src表达明显高于H2O2组;H2O2+SA+ANIi组突起末端中p Src表达与H2O2+SA组相比没有明显差异,但明显高于H2O2组和H2O2+ANIi组,提示干扰ANLN不影响Src激活剂对Src的激活。氧化应激状态下,激活Src,沉默ANLN,GM130的免疫荧光染色观察了高尔基体的结构及分布,可见对照组GM130分布于核周,H2O2组GM130分散,分布于胞体和突起,H2O2+SA组GM130分布于核周,H2O2+ANIi组和H2O2+SA+ANIi组GM130弥漫分布于细胞质中,失去了高尔基体的线性结构。对高尔基体的长度统计表明,H2O2组细胞的高尔基体长度明显高于对照组;H2O2+SA组细胞高尔基体长度明显低于H2O2组,提示激活Src可以抑制氧化应激损伤造成的高尔基体分散,H2O2+SA+ANIi组与H2O2组细胞高尔基体长度没有明显差异,但大于H2O2+SA组,且差异具有统计学意义,说明ANLN的干扰阻碍了Src对高尔基体的稳定作用。氧化应激状态下,激活Src,沉默ANLN,观察损伤神经元初级突起数和分支复杂程度,结果发现H2O2+SA（Src激活剂）组初级突起数和分支的复杂程度均明显多于H2O2组,H2O2+ANIi组和H2O2+SA+ANIi组初级突起数和分支的复杂程度均明显低于H2O2+SA组,提示Src激活明显促进损伤神经元突起分支的形成,ANLN的干扰阻碍了Src对损伤神经元突起形成的作用。结论:氧化应激状态下Src通过促进ANLN-1的表达调解F-actin组装,稳定高尔基体结构,进而促进损伤神经元突起的形成。
刘亚平[3]（2019）在《藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究》文中研究指明近些年来,大量研究探究了鸡蛋不同部位的蛋白质组及其生物活性。但是,不同生长环境对于鸡蛋蛋白质组及生物活性的影响尚不清楚。为挖掘藏鸡蛋特有的功能蛋白质,本研究以两种海拔鸡种蛋为研究对象,分别选取青藏高原的土着品种藏鸡种蛋和在世界范围内广泛饲养的人工选育品种白来航鸡种蛋,对蛋清和蛋黄蛋白质组及其生物功能进行了详细的分析,进而通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质数据集,筛选出抗氧化相关候选蛋白质PIT54,并围绕着两种海拔高度鸡种蛋PIT54的DNA序列的单核苷酸多态性位点、蛋白质提取优化、质谱分析、抗氧化活性和对血管生成的影响及其机制初步探究等方面开展了一系列研究工作。主要研究结果如下:（1）利用非标记蛋白质组学对藏鸡种蛋清蛋白质（TEW）和白来航种蛋蛋清蛋白质（CEW）进行了比较研究,以鉴定差异蛋清蛋白质及其生物活性。一共鉴定出176种蛋白质。其中,14种表达量差异显着（倍数>1.5且P<0.05）的蛋白质,主要参与了脂质转运、免疫防御、生长发育和抗氧化过程;通过体外实验和Caco-2细胞的抗氧化实验证实了CEW和TEW之间抗氧化应激活性的差异;前列腺素-H2D-异构酶前体和谷胱甘肽过氧化物酶被认为是与差异抗氧化活性相关的候选蛋白质。（2）通过非标记定量技术比较了藏鸡种蛋蛋黄蛋白质（TEY）和白来航鸡种蛋蛋黄蛋白质（CEY）的蛋白质表达图谱,一共鉴定出135种蛋白质,其中19种蛋白质的表达量在两组样本间存在显着差异（倍数>1.5且P<0.05）;差异表达的蛋白质主要与氧化应激、免疫、能量代谢以及组织发育等过程相关;为了进一步验证抗氧化能力的差异,通过体外实验和对H2O2诱导氧化应激的Caco-2细胞的保护作用实验比较了CEY和TEY的抗氧化应激活性差异。TEY和CEY均具有抗氧化活性,但前者表现出的抗氧化应激能力更强（P<0.05）,该结果可能与TEY中的抗氧化活性相关蛋白（谷胱甘肽过氧化物酶3和PIT54）的表达量差异有关。（3）由于蛋白质表达的动态性,本研究中鉴定的蛋白质种类与文献报道种类有所差异。为更加广泛地筛选抗氧化蛋白质进行后续实验,通过构建人工注释的鸡蛋蛋清和蛋黄蛋白质的非冗余数据集,筛选出了鸡蛋中抗氧化蛋白质合集,以具有抗氧化应激作用和研究较少为基本原则,初步选择了PIT54作为候选的抗氧化活性相关蛋白。PIT54还具有促进血管生成以及免疫调节等生物活性。进一步通过生物信息学对PIT54的结构和功能进行分析发现,分子中含有4个重复的SRCR结构域和6个保守的半胱氨酸残基,具有清道夫受体活性,定位于细胞膜,主要与脂质运输、细胞激活以及含氧化合物响应过程相关,说明其的确与低氧氧化应激过程相关。（4）根据PIT54可以与血红蛋白结合的特性,将鸡血红蛋白通过CNBr偶联到活化的Sepharose 4B上,制备吸附血红蛋白的亲和柱,用来纯化PIT54。研究了不同缓冲液体系（Tris-HCl,p H 8.1和硼酸盐缓冲液,p H 8.1）对于PIT54分离的影响,建立了从蛋黄中分离纯化PIT54的方法,蛋黄经正己烷脱油后获得粗蛋白,依次经过DEAE阴离子交换层析和吸附血红蛋白的亲和层析柱亲和层析两步分离法,便可以快速高效地获得PIT54蛋白质,并保持了蛋白质活性,该方法操作简单。相比于C-PIT54,T-PIT54具有更强的与Hb结合的能力（P<0.05）和抑制LDL脂质氧化反应的能力（P<0.05）。质谱分析发现PIT54分子中一共检测到3个N-糖基化位点（85N、157N和485N）。其中,157N仅在C-PIT54中检测到,另外两个位于SRCR结构域的糖酸化位点在T-PIT54分子中的糖基化程度显着高于C-PIT54（P<0.05）。C-PIT54和T-PIT54分子中都只检测到了一个磷酸化位点411Ser,位于SRCR结构域N端,T-PIT54的磷酸化程度显着低于C-PIT54（P<0.05）。（5）为了研究两种海拔高度鸡种蛋来源的PIT54对常氧和低氧孵化的鸡胚血管生成的影响,需要模拟高原低氧环境。首先,本研究在原有孵化箱的基础上,通过外加氮气模拟低氧环境;利用单片机优化了氧气、二氧化碳、温度、湿度及其翻蛋控制系统,同时完善了孵化箱的密闭性;实现了准确、稳定的模拟不同含氧量下的鸡胚孵化过程。该设备操作简单,成本低,实用性强。利用该孵化箱模拟低氧环境进行后续实验。之后,以不同孵化时期的常氧和低氧孵化的白来航鸡胚尿囊绒毛膜（CAM）为研究对象,以血管覆盖度和血管直径的分布情况为指标,筛选出D4、D8和D12为给药的时间点;然后,比较分析了T-PIT54和C-PIT54处理对低氧和常氧环境下的藏鸡和白来航鸡胚CAM血管发育情况的影响。最终发现了PIT54可以作为促血管生成因子,具有促进血管生成的作用,T-PIT54具有更强的促进血管生成的能力（P<0.05）,且作用范围广泛;C-PIT54对血管生成的促进作用具有种间差异性;T-PIT54和C-PIT54对于第8天的鸡胚的影响最大。因此,选择了两种给药处理的NC8、HC8和HT8组进行后续机制探究;（6）筛选出特异性肽段CTVNKNLEETETS制备PIT54抗体,经检验抗体效果良好。利用该抗体通过WB和免疫组织化学分析PIT54在鸡胚组织中的特异性表达,结果发现PIT54蛋白质在鸡胚的血液和肺泡中大量表达,在心脏、脑和血管中少量表达,在系带和肝脏中未检测到PIT54的特异性表达。通过免疫分子印迹分别考察了T-PIT54和C-PIT54处理后,CAM中的VEGFR2上下游相关蛋白的表达水平及磷酸化情况。发现低氧环境中,C-PIT54和T-PIT54可以通过显着增加上游的HIF-1α的表达量,刺激血管新生;增强VEGFR2/Src信号分子机制提高内皮细胞的通透性,有助于出芽和迁移;通过影响PI3K/Akt信号分子机制和提升ERK的磷酸化程度促进细胞增殖;增加p38单个蛋白质的磷酸化水平抑制细胞凋亡。这些都证明了C-PIT54和T-PIT54可以促进血管生成,提高低氧环境的适应性。但是,这两种外源添加的PIT54对低氧孵化鸡胚血管生成的促进作用具有种间差异性。两者在常氧白来航鸡胚中表现出与低氧环境相反的作用,可以避免血管内皮细胞的过度增殖。（7）通过对藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein基因的DNA序列进行扩增测序发现,PIT54 protein基因全长5186 bp,包括8个外显子和7个内含子。同源比对结果显示,测序获得的T-PIT54与C-PIT54的内含子序列差异较大,但是,CDS序列保守性较高（99%identify）,表明了藏鸡源和白来航鸡源的PIT54 protein具有遗传稳定性。与C-PIT54相比,T-PIT54的DNA序列中存在着5个突变和5个插入片段;根据预测获得T-PIT54与C-PIT54蛋白质的氨基酸序列,生物信息学分析发现,T-PIT54的α-螺旋,结构更加紧密。两种蛋白质分子中都存在12个结合位点,但是部分位点具有种间特异性。这些序列与结构的差异可能是造成T-PIT54与C-PIT54抗氧化活性和促进血管生成活性差异的主要原因。
郭俊宏[4]（2019）在《SIRT1通过基于基因芯片筛选的linc00963调节人小梁网细胞中纤维连接蛋白的表达》文中认为目的:结合长链非编码RNA（long noncoding RNA,lnc RNA）芯片及生物信息学方法,探索沉默信息调节因子2相关酶1（Sirtuin 1,SIRT1）对人小梁网细胞（human trabecular meshwork cells,HTMCs）细胞外基质的可能分子调控机制,以筛选出青光眼的潜在治疗靶点。方法:1.构建SIRT1过表达慢病毒,检测其HTMCs的最佳感染复数（multiplicity of infection,MOI）,将SIRT1过表达慢病毒和阴性对照慢病毒按照最佳MOI分别感染HTMCs后,进行lnc RNA芯片检测。2.SIRT1激动剂-白藜芦醇（resveratrol,RSV）和溶剂对照二甲基亚砜（dimethylsulfoxide,DMSO）分别处理HTMCs,进行lnc RNA芯片检测。3.对差异性lnc RNAs进行信息学分析,用实时定量PCR验证差异性lnc RNAs。4.检测氧化应激下HTMCs细胞活性、细胞凋亡和细胞外基质（extracellular matrix,ECM）表达的影响5.分别检测氧化应激下RSV对HTMCs中纤维连接蛋白（fibronectin,FN）和在氧化应激状态下HTMCs过表达SIRT1对细胞中FN表达的影响。6.采用Transwell实验和CCK8法检测氧化应激下RSV对HTMCs的迁移能力和活性的影响。实验分组:正常组、RSV+DMSO组、DMSO组、H2O2组、H2O2+RSV+DMSO组、H2O2+DMSO组。7.采用Transwell法和CCK8法检测氧化应激下SIRT1对HTMCs的迁移能力和活性的影响。实验分为以下6组:正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE（过表达）组、H2O2+Lv-GFP组、H2O2+RSV+DMSO组、H2O2+DMSO组。8.通过基因芯片分析筛选出差异性表达的linc00963。SIRT1过表达慢病毒感染HTMCs或RSV处理HTMCs后检测linc00963、微小RNA-1（micro RNA-1,mi R-1）和FN的表达。沉默linc00963,检测mi R-1以及FN的表达。9.统计学分析:两组间比较采用独立样本t检验。多组间比较采用方差齐性检验和单因素方差分析。P<0.05时,差异具有统计学意义。结果:1.差异lnc RNA表达谱显示:与对照组相比,SIRT1慢病毒感染HTMCs后引起636个lnc RNAs上调和2246个lnc RNAs下调（|foldchange|>2,P<0.05）。RSV-DMSO处理HTMCs后1048个lnc RNAs上调和1320个lnc RNAs下调（|foldchange|>2,P<0.05）。结合两个芯片结果,GO分析显示:SIRT1和RSV对细胞外基质、细胞代谢、增殖、凋亡等有调节作用。KEGG生物学通路分析显示:SIRT1慢病毒组芯片差异lnc RNAs主要包括Notch信号通路、MAPK信号通路、酪氨酸酶相关蛋白（tyrosinase related proteins,TRP）通道的炎症介质调节以及细胞外基质受体的相互作用等19个通路中富集;RSV-DMSO组芯片差异lnc RNAs主要包括MAPK信号通路、细胞凋亡、Fox O信号通路、m TOR信号通路、p53信号通路、PI3K-PKB信号通路等30个通路中富集。2.氧化应激下HTMCs中FN的表达升高,胶原蛋白Ⅰ型、层粘连蛋白等ECM表达也升高（P<0.001）。3.氧化应激下RSV能降低HTMCs中FN的表达（P<0.001）,在氧化应激下的HTMCs中过表达SIRT1也能降低HTMCs中FN的表达（P<0.001）。4.Transwell实验结果显示:在正常组、RSV+DMSO组、DMSO组、H2O2组、H2O2+RSV+DMSO组、H2O2+DMSO组中,每孔细胞迁移的数目分别为298±18、257±37、291±20、151±20、267±26、144±21,H2O2+RSV+DMSO组与H2O2组和H2O2+DMSO组均有差异（P<0.001）;CCK8法结果显示,H2O2+RSV+DMSO组与H2O2组和H2O2+DMSO组相比,差异均有统计学意义（P<0.01）。5.在正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE组、H2O2+Lv-GFP组、H2O2+RSV+DMSO组、H2O2+DMSO组这六组中,Transwell实验中每孔细胞迁移数目分别为436±73、254±25、510±51、327±46、405±63、246±56,H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组差异均有统计学意义（P<0.01）;CCK8法结果显示,H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组相比差异均有统计学意义（P<0.01）。6.SIRT1活性增强（RSV处理）或表达增加时,mi R-1水平显着上升,SIRT1活性增强（RSV处理）或SIRT1过表达后linc00963水平以及FN的m RNA和蛋白水平下降。当沉默linc00963后,mi R-1水平明显升高,而FN的m RNA水平以及蛋白水平则显着降低。结论:1.通过基因芯片技术筛选出在HTMCs中过表达SIRT1以及RSV刺激HTMCs后差异表达的lnc RNAs,对阐明SIRT1如何保护HTMCs的机制和信号通路提供信息。2.SIRT1降低氧化应激对HTMCs增殖活性以及迁移的影响。3.SIRT1被RSV激活或过表达SIRT1能下降linc00963以及FN的表达,促进mi R-1的表达;4.筛选出来的linc00963,可能通过调节mi R-1的表达,从而影响FN的表达,这将可能成为青光眼新的潜在治疗靶点。
黄龙月[5]（2019）在《新型微米复合物提高茶叶活性成分EGCG稳定性及抗炎效果的研究》文中提出EGCG是茶叶中含量最高,最具生物活性的儿茶素化合物,具有抗氧化、抗炎等功效。但EGCG不稳定,容易发生氧化聚合,差相异构或水解反应,除此以外,EGCG在摄入人体后在胃肠道消化过程中破坏严重,导致其生物利用率低下,因此制约了 EGCG在功能食品和医药领域中的应用。本课题组前期研究表明米糠提取物能够有效负载茶叶中主要儿茶素类成分EGCG,同时可以提高EGCG的生物利用率。本论文在前期研究的基础上,通过自组装制备微米级EGCG-RBAI复合物（RBAI:米糠白蛋白提取物）,研究其在pH7.4PBS溶液和模拟胃肠道消化液中的稳定性;基于抗氧化能力优化EGCG-RBAI复合物配方,用于细胞实验;建立IL-1β诱导HT-29细胞炎症模型,通过分组处理（IL-1β诱导模型组、对照组、EGCG、RBAI、EGCG-RBAI三种预处理组）研究和比较其抑制细胞炎症发生的效果,采用qPCR法检测MAPK、NF-κB和STAT炎症相关信号通路及其下游基因的表达差异,采用酶联免疫试剂盒检测细胞因子IL-8及PGE2水平验证炎症发生,采用生化检测试剂盒检测抗氧化标记物SOD活力和MDA浓度探究细胞氧化应激响应变化,综上对IL-1β诱导HT-29细胞炎症机制进行了探讨。获得的主要结果如下:（1）RBAI蛋白质含量为300 mg/g,白蛋白是主要的可溶性蛋白质成分。通过自组装制备EGCG-RBAI复合物,研究RBAI负载对EGCG在pH 7.4 PBS溶液和模拟胃肠道消化溶液中稳定性的影响。结果表明,EGCG初始量为18.00μg的EGCG-RBAI复合物和EGCG溶液（对照）经pH 7.4PBS孵育60 min后,EGCG-RBAI复合物体系的EGCG保留率为15.9%,显着高于对照7.7%;初始量为45.00 μg的EGCG-RBAI复合物和EGCG溶液经体外模拟胃肠道消化后,EGCG-RBAI复合物体系中EGCG的保留率为18.9%,对照组保留率仅为7.6%。这说明RBAI负载能有效提高EGCG在弱碱性环境下的稳定性和生物可获得率。（2）采用MTT法研究EGCG、RBAI和EGCG-RBAI复合物对HT-29细胞的细胞毒性,结果表明EGCG和RBAI对HT-29细胞的IC50分别为204 μmol/L和 511 mg/L,系列浓度 EGCG-RBAI复合物（20～100 μmol/L EGCG,50 mg/L RBAI）对HT-29细胞存活率无明显抑制作用。IL-1β诱导HT-29细胞炎症模型条件为:细胞铺板密度为2×105个/mL,IL-1β诱导浓度为35ng/mL,诱导时间24h。炎症诱导组的炎症相关生物标记NF-κB、CXCL8、COX-2基因表达量发生不同程度的上调,分别为对照组的3.8、5.1和1.1倍。EGCG（20～100μmol/L）与RBAI（50,100 mg/L）预处理对NF-κB、CXCL8、COX-2基因的诱导表达均有抑制作用。（3）基于ORAC抗氧化能力筛选出细胞实验用EGCG-RBAI复合物最佳配方:40μmol/L EGCG+50 mg/L RBAI。通过qPCR法与酶联免疫法等研究EGCG-RBAI复合物对炎症相关信号通路基因表达及细胞因子水平的影响。结果表明炎症模型组MAPK14、NF-κB和STAT3基因,及NF-κB通路下游基因CXCL8、TNEA和iNOS,STAT3通路下游基因VEGF表达量上调,说明炎症模型建立成功。EGCG、RBAI和EGCG-RBAI复合物预处理2 h均能下调炎症相关基因表达水平,且RBAI和EGCG-RBAI复合物预处理组对STAT3转录的抑制作用优于EGCG预处理组。IL-1β诱导组的IL-8浓度（191.8 ng/L）高于对照组（148.3 ng/L）,这在代谢水平上验证炎症诱导成功。EGCG、EGCG-RBAI复合物预处理组的IL-8浓度分别为82.3 ng/L和109.5 ng/L,低于IL-1β诱导组。（4）通过检测Nrf2基因表达量、SOD活力和MDA浓度研究不同预处理对细胞炎症诱导中氧化应激响应的影响。IL-1β诱导组的Nrf2基因表达量是对照组的3.3倍,高于EGCG、RBAI和EGCG-RBAI复合物预处理组的2.0、1.6、1.4倍。IL-1β诱导组的细胞SOD活力最高,达到15.25 U/mg protein,而EGCG、RBAI和EGCG-RBAI复合物和对照组的SOD活力没有明显差异,介于13.86～14.04U/mg protein范围内。可见,本实验中Nrf2基因的转录和SOD活力提高的是对细胞氧化-还原状态改变的反馈机制。
王文君[6]（2017）在《连接组蛋白H1.2在糖尿病视网膜病变以及脂肪肝病变中的初步研究》文中研究说明核心组蛋白和连接组蛋白H1是核小体的重要组成部分,通过对染色质结构的维持和重塑起到调控基因表达,进而调控多种细胞生理过程的作用。组蛋白H1.2是连接组蛋白H1最重要的异构体之一。前人研究发现组蛋白H1.2参与了细胞中一些重要的生理过程,但其在疾病发生发展中的作用还研究的较少。本论文通过建立糖尿病视网膜病变和脂肪肝病变等体内、外模型,探讨了组蛋白H1.2在两种疾病中的可能作用以及相应的调控机制。本论文发现在1型糖尿病大、小鼠视网膜和体外高糖培养的视网膜细胞系中,自噬和组蛋白H1.2水平显着上调。在视网膜细胞系中过表达组蛋白H1.2能上调HDAC1和SIRT1的蛋白水平,促进H4K16的去乙酰化,从而促进自噬相关基因的表达和细胞自噬。同时,组蛋白H1.2的过表达也能够促进细胞的炎症反应和细胞毒性。敲低组蛋白H1.2能抑制自噬诱导和高糖刺激下的细胞自噬,抑制高糖刺激引起的炎症反应和细胞毒性。更重要的是,在视网膜中过表达组蛋白H1.2也能促进视网膜发生类似于早期糖尿病视网膜病变的病理变化,例如上调自噬和炎症反应、激活神经胶质细胞和引起神经细胞的丢失。同时,利用siRNA干扰糖尿病小鼠视网膜中组蛋白H1.2的表达,能够显着地抑制因糖尿病引起的视网膜中自噬和炎症反应的上调、神经胶质细胞的激活和神经细胞的丢失。这些结果表明组蛋白H1.2可能是糖尿病视网膜病变潜在的治疗靶点之一。其次,本论文发现在视网膜细胞系中过表达组蛋白H1.2能够显着激活DNA损伤反应通路和细胞衰老;而敲低组蛋白H1.2能够显着缓解由DNA损伤诱导剂和高糖刺激引起的DNA损伤和细胞衰老。同时,发现组蛋白H1.2能够与PARP-1和nucleolin相互作用;且在DNA损伤条件下,组蛋白H1.2与PARP-1的相互作用增加,而与nucleolin的相互作用减弱。组蛋白H1.2的中间球状结构域对于它与PARP-1或nucleolin之间相互作用是必不可少的。由于前人发现PARP-1和nucleolin在DNA损伤过程中有重要作用,我们的结果暗示组蛋白H1.2还可以通过调控DNA损伤信号通路,从而影响糖尿病视网膜病变的发生发展。最后,本论文还发现在两种非酒精性脂肪肝病变小鼠模型（db/db小鼠和高脂喂养小鼠）的肝脏以及体外高脂刺激的肝细胞中,组蛋白H1.2显着降低。体外肝细胞中过表达组蛋白H1.2能够抑制高脂刺激下细胞脂滴的积累;而敲低组蛋白H1.2进一步促进高脂刺激引起的细胞脂滴的积累。同时,还发现在db/db小鼠和高脂喂养小鼠的肝脏中,自噬是显着被抑制的;在肝细胞中敲低组蛋白H1.2也能显着抑制细胞的自噬水平。由于脂质的自噬性降解可以减少细胞中脂质积累,因此推测组蛋白H1.2可能也是通过影响自噬,从而调控肝细胞脂质的积累。总之,本论文的研究结果发现组蛋白H1.2参与糖尿病视网膜病变和非酒精性脂肪肝的病变过程,为深入研究这些疾病的发病机制以及今后治疗靶点的筛选提供了新视角。
宁佳鸣,张妍淞,姚于飞,王喆,李露,陈家俊,李文娟[7]（2016）在《表没食子儿茶素没食子酸酯对抗肿瘤所致心肌损伤的保护作用》文中认为目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）的抗肿瘤作用,研究EGCG对抗肿瘤药物阿霉素（adriamycin,ADR）所致小鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法:建立S180小鼠实体瘤模型,随机分为4组:对照组、ADR组、EGCG组、EGCG+ADR组。分离肿瘤与心肌组织,分别测定组织内乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、肌酸激酶（creatine kinase,CK）和锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,Mn SOD）的活性;流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧（reactive oxygen species,ROS）及线粒体膜电位。结果:与对照组相比,EGCG和ADR能显着增加肿瘤细胞凋亡作用,且ADR+EGCG作用更强。与ADR组相比,EGCG+ADR可显着降低心肌组织中ADR引起的LDH和CK活性的增加。同时,EGCG+ADR中可显着增加心肌组织的抗氧化酶Mn SOD活性,减少ROS的生成,增加线粒体膜电位。结论:EGCG具有抗肿瘤作用,且与ADR合用可显着增强ADR抗肿瘤作用。同时可通过提高线粒体的抗氧化防御、削弱氧化应激、稳定线粒体膜电位,对ADR所致心肌损伤发挥保护作用。
赵普[8]（2016）在《CFT-1茶叶对DEN诱发大鼠肝癌的化学预防作用及其可能机制》文中指出本实验旨在研究高EGCG茶叶（CFT-1茶叶）与一般茶叶品种对DEN（二乙基亚硝胺）诱发的大鼠肝癌的化学预防效果的差异及其对防癌抗癌机制相关基因PCNA、Bcl-2和Bax的影响。CFT-1茶叶中EGCG含量高达13.42%,而普通茶叶中只含4.32%,特别是协同抗癌的成分含量也很高（含ECG 3.58%,C 3.0%,总儿茶素22.49%,咖啡因 5.38%）。本实验分别用25mg/kg、50mg/kg剂量的DEN建立大鼠肝癌模型,筛选出最佳注射剂量。再选用40只雄性的wistar大鼠,按体重分为4组:空白对照组、模型组、普通茶叶组和CFT-1茶叶组,其中模型组、茶叶组注射等量的DEN,茶叶组在注射DEN的同时,给予茶水干预,实验结束后检测大鼠血清肝功能指标,采用免疫组化、Western blotting和荧光定量方法检测与肝癌相关基因PCNA、Bcl-2和Bax蛋白的表达情况,以研究CFT-1茶叶可能的抗癌防癌机制。结果如下:1)在DEN剂量筛选研究中,两模型组肝脏肿瘤发生率都达100%,25mg/kg剂量组死亡率为10%,50mg/kg剂量组死亡率高达40%,所以选择25mg/kg的注射剂量作为后续实验的最佳建模剂量;2)增殖细胞核抗原（PCNA）能较好的反映出细胞增殖的状态,主要存在于肿瘤细胞中;Bax是促癌细胞凋亡基因;Bcl-2是抑癌细胞凋亡基因。免疫组化结果显示,模型组的大鼠肝脏的PCNA和Bcl-2的阳性表达量比空白对照组显着较高,CFT-1茶叶组Bcl-2的阳性表达量比模型组和普通茶叶组显着降低;CFT-1茶叶组大鼠肝脏Bax的阳性表达量最高,模型组大鼠肝脏的Bax的阳性表达量最低;3)Western blotting实验结果显示:CFT-1茶叶组大鼠肝脏中,PCNA和Bcl-2的表达量都比模型组和普通茶叶组低,其中PCNA的表达量分别降低了 24.85%、8.87%（P<0.05）,Bcl-2 的表达量分别降低了 41.79%、32.63%（P<0.05）;而CFT-1茶叶组Bax的表达量比模型组和普通茶叶组分别提高了 71.63%、59.73%（P<0.05）;4)荧光定量结果显示,模型组大鼠肝脏中,PCNA和Bcl-2mRNA表达量显着高于空白对照组和茶叶各组;CFT-1茶叶组中,大鼠肝脏PCNA mRNA的表达量比模型组和普通茶叶组分别降低了 25.03%、15.72%（P<0.05）,Bcl-2mRNA的表达量比模型组和普通茶叶组分别降低了 53.15%、47.22%（P<0.05）;高EGCG茶叶CFT-1显着提高大鼠肝脏BaxmRNA的表达量,比模型组和普通茶叶组分别提高了 98.43%、64.37%。综上所述,本实验成功建立大鼠肝癌模型,且肝癌的发生与PCNA、Bcl-2和Bax的表达有关。免疫组化、Western blotting和荧光定量PCR结果都说明了CFT-1茶叶可以通过降低PCNA、Bcl-2的表达量,增加Bax的表达量抑制肝癌的发展,有效保护肝脏,且抗癌效果强于普通茶叶。
刘衍杰[9]（2016）在《没食子提取物对IgA肾病大鼠TGF-β1、IL-6水平变化的影响研究》文中研究表明目的:研究没食子提取物（Turkish galls extract,TGE）对IgA肾病（Immunoglobulin A nephropathy,IgAN）大鼠血清、尿液及肾组织转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、IgA表达的干预治疗,并进一步探讨可能作用机制。方法:成功建立IgAN大鼠模型12周,随机分为IgAN模型组、TGE 75 mg/kg组、TGE 150 mg/kg组、TGE 300 mg/kg组,给予TGE灌胃4周,并设正常组作为对照,每组各20只。第12周及第16周末应用尿沉渣镜检法检测大鼠尿液红细胞数目,BCA蛋白质定量法测定24 h尿蛋白定量。第16周末应用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清生化指标,酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清及尿液TGF-β1、IL-6、IgA水平;免疫组化测定肾组织TGF-β1、IL-6表达;免疫荧光法测定肾组织IgA沉积情况;并观察各组大鼠肾组织HE、PAS、电镜等改变。结果:（1）第12周末,与正常对照组相比,各IgAN组大鼠尿红细胞及24 h尿蛋白定量显着升高（P<0.05）,提示造模成功。（2）第16周末,与TGE 75 mg/kg组相比,TGE 150 mg/kg组血清IL-6下降最明显,而TGE 300 mg/kg组尿液及肾组织IL-6下降明显（P<0.05）。（3）第16周末,与TGE 75 mg/kg组相比,TGE 300 mg/kg及TGE 150 mg/kg组尿液TGF-β1、尿液及肾组织IgA下降最明显,而TGE 300 mg/kg组血清及肾组织TGF-β1、血清IgA下降最明显（均P<0.05）。结论:（1）TGE可以减少IgAN大鼠尿红细胞及24 h尿蛋白定量,减少血清、尿液及肾组织TGF-β1、IL-6、IgA表达。（2）TGE可以抑制系膜细胞增生及肾小管萎缩/间质纤维化等,对IgAN大鼠具有一定程度的治疗作用。（3）TGE延缓肾损害的作用机制可能与下调TGF-β1、IL-6表达,减轻肾组织IgA沉积有关。
赵振鹿,乔月华,丛涛,李兴启,杨仕明,赵立东[10]（2016）在《耳蜗螺旋神经节细胞的损伤和再生》文中指出耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cells,SGCs）为双极神经节细胞,是听觉传导通路的第一级神经元,其周围突与毛细胞相连,中枢突则参与组成听神经。螺旋神经节细胞在声音信号的传递与编码方面具有重要作用,容易在接触耳毒性药物、强噪声、神经营养因子（NTFs）缺乏、衰老、缺血-再灌注等因素而导致不可逆的损伤,并且引起听力损失。由于螺旋神经节细胞是高度分化的终末细胞,损伤后难以修复,使得神经性耳聋的治疗更加困难。研究发现神经营养因子和干细胞可以诱导死亡的螺旋神经节细胞再生（Regeneration）。本文将从螺旋神经节细胞的损伤机制和螺旋神经节细胞再生方面进行综述。
二、EGCG对H_2O_2诱导的螺旋神经节细胞MnSOD基因表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、EGCG对H_2O_2诱导的螺旋神经节细胞MnSOD基因表达的影响（论文提纲范文）
（1）罗布麻叶总黄酮及异槲皮苷对吡柔比星致心脏损伤的保护作用和机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词对照表 |
| 第1篇 前言 |
| 第2篇 文献综述 |
| 第1章 蒽环类药物心脏毒性概述 |
| 1.1 蒽环类药物引起心脏损伤的类型 |
| 1.2 蒽环类药物引起心脏损伤的分子机制 |
| 1.2.1 拓扑异构酶抑制 |
| 1.2.2 铁离子代谢紊乱 |
| 1.2.3 线粒体功能障碍 |
| 1.2.4 肌纤维降解和肌浆网钙稳态失衡 |
| 1.2.5 氧化应激 |
| 1.2.6 细胞凋亡 |
| 第2章 罗布麻叶和异槲皮苷研究概述 |
| 2.1 罗布麻叶研究概述 |
| 2.1.1 罗布麻植物学特征和传统医学应用 |
| 2.1.2 罗布麻叶提取物药理学作用 |
| 2.1.3 罗布麻叶提取物安全性 |
| 2.2 异槲皮苷研究概述 |
| 2.2.1 异槲皮苷的制备 |
| 2.2.2 异槲皮苷药理作用 |
| 2.2.3 异槲皮苷的体内吸收过程 |
| 第3章 蒽环类药物所致心脏损伤与miRNAs概述 |
| 3.1 miRNAs简介 |
| 3.2 蒽环类药物心脏损伤心肌组织中miRNAs表达变化 |
| 3.3 蒽环类药物心脏损伤血液miRNAs表达的变化 |
| 3.4 miRNAs在蒽环类药物心脏损伤中预防和治疗的作用 |
| 第3篇 实验研究 |
| 第1章 罗布麻叶总黄酮对THP诱导大鼠心脏损伤的保护作用及机制研究 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 药品及试剂 |
| 1.1.2 实验仪器 |
| 1.1.3 主要溶液配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 实验动物分组及处理 |
| 1.2.2 各组大鼠心电图和心脏血流动力学参数 |
| 1.2.3 各组大鼠血清心肌酶水平 |
| 1.2.4 各组大鼠SOD和 MDA含量测定 |
| 1.2.5 各组大鼠心脏取材 |
| 1.2.6 各组大鼠心脏组织HE染色 |
| 1.2.7 各组大鼠心脏组织中线粒体膜基因的表达 |
| 1.2.8 各组大鼠心脏线粒体蛋白制备 |
| 1.2.9 各组大鼠心脏组织中相关蛋白的表达 |
| 1.2.10 统计学分析 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.3.1 大鼠一般状态观察 |
| 1.3.2 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心电图的影响 |
| 1.3.3 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠血流动力学的影响 |
| 1.3.4 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心肌酶的影响 |
| 1.3.5 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠组织形态学的影响 |
| 1.3.6 AVLE对 THP诱导的心脏损伤大鼠血清SOD和 MDA的影响 |
| 1.3.7 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心脏组织线粒体膜m RNA表达的影响 |
| 1.3.8 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心脏组织AKT和 p-AKT表达的影响 |
| 1.3.9 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心脏组织Cyt c表达的影响 |
| 1.3.10 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心脏组织胞浆Caspase家族蛋白表达的影响 |
| 1.3.11 AVLE对 THP所致心脏损伤大鼠心脏组织Bcl-2和Bax表达的影响 |
| 1.4 本章小结 |
| 第2章 罗布麻叶总黄酮的制备及成份分析 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 药品及试剂 |
| 2.1.2 实验仪器 |
| 2.1.3 主要溶液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 AVL生药学鉴定 |
| 2.2.2 AVLE提取和纯化 |
| 2.2.3 仪器分析条件 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 AVL性状鉴定 |
| 2.3.2 AVL横切面显微鉴定 |
| 2.3.3 HPLC-ESI-MS/MS法对AVLE进行定性分析 |
| 2.3.4 HPLC法对AVLE部分化合物进行定量分析 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 AKT在罗布麻叶总黄酮和异槲皮苷保护THP诱导H9c2 细胞损伤中的作用 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品及试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.1.3 主要溶液配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 细胞传代 |
| 3.2.3 细胞冻存 |
| 3.2.4 MTT检测细胞毒性和存活率 |
| 3.2.5 DCFH-DA探针检测H9c2 细胞ROS水平 |
| 3.2.6 ELISA法检测H9c2 细胞SOD和 MDA的含量 |
| 3.2.7 Mito-Tracker Red CMXRos探针检测H9c2 细胞线粒体活性 |
| 3.2.8 JC-1 探针检测H9c2 细胞线粒体膜电位 |
| 3.2.9 RT-qPCR检测H9c2 细胞线粒体膜基因的表达 |
| 3.2.10 TUNEL检测H9c2 细胞凋亡率 |
| 3.2.11 H9c2 细胞线粒体提取 |
| 3.2.12 Western blot检测H9c2 细胞相关蛋白的表达 |
| 3.2.13 统计学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 IQC、AVLE和 THP对 H9c2 细胞作用的最佳浓度和时间确定 |
| 3.3.2 IQC和 AVLE对 THP处理H9c2 细胞的保护作用 |
| 3.3.3 AKT在 IQC和 AVLE改善THP处理H9c2 细胞凋亡中的作用 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 THP诱导大鼠心脏损伤miRNA芯片生物信息学分析及miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2 信号通路的构建和验证 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 药品及试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.1.3 主要溶液配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 差异miRNA筛选 |
| 4.2.2 miR-190a-5p和 AVL靶基因预测及通路富集 |
| 4.2.3 大鼠心脏组织miR-190a-5p、Phlpp1 基因及蛋白的表达 |
| 4.2.4 H9c2 细胞miR-190a-5p、Phlpp1 基因及蛋白的表达 |
| 4.2.5 双荧光素酶报告基因实验 |
| 4.2.6 统计学分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 差异miRNA筛选结果 |
| 4.3.2 miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2 信号通路的构建 |
| 4.3.3 AVLE对 THP诱导的心脏损伤大鼠心脏组织miR-190a-5p和 Phlpp1 基因及蛋白表达的影响 |
| 4.3.4 IQC和 AVLE对 THP处理H9c2 细胞miR-190a-5p和Phlpp1 基因及蛋白表达的影响 |
| 4.3.5 双荧光素酶报告基因实验 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 miR-190a-5p在 THP诱导H9c2 细胞损伤中的作用及机制 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 药品及试剂 |
| 5.1.2 实验仪器 |
| 5.1.3 主要溶液配制 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 荧光显微镜检测miR-190a-5p转染H9c2 细胞效率 |
| 5.2.2 RT-qPCR检测H9c2 细胞miR-190a-5p和 Phlpp1 m RNA的表达 |
| 5.2.3 DCFH-DA探针检测H9c2 细胞ROS含量 |
| 5.2.4 ELISA法检测H9c2 细胞SOD和 MDA含量 |
| 5.2.5 Mito-Tracker Red CMXRos探针检测H9c2 细胞线粒体活性 |
| 5.2.6 JC-1 探针检测H9c2 细胞线粒体膜电位 |
| 5.2.7 RT-qPCR检测H9c2 细胞线粒体膜基因的表达 |
| 5.2.8 TUNEL检测H9c2 细胞凋亡率 |
| 5.2.9 H9c2 细胞线粒体提取 |
| 5.2.10 Western blot检测H9c2 细胞相关蛋白的表达 |
| 5.2.11 统计学分析 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 转染miR-190a-5p对 miR-190a-5p和 Phlpp1 m RNA表达的影响 |
| 5.3.2 miR-190a-5p对 THP处理H9c2 细胞的保护作用 |
| 5.3.3 miR-190a-5p对 THP处理H9c2 细胞miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2 信号通路的影响 |
| 5.4 本章小结 |
| 第4篇 讨论 |
| 1.1 THP所致大鼠心脏组织/H9c2 细胞损伤模型复制 |
| 1.1.1 动物模型 |
| 1.1.2 细胞模型 |
| 1.2 AVLE制备及成份分析 |
| 1.3 IQC和 AVLE改善THP处理大鼠心脏组织/H9c2 细胞的作用 |
| 1.3.1 AVLE改善THP处理大鼠心脏组织心电图、血流动力学、心肌酶及组织形态学的变化 |
| 1.3.2 IQC和 AVLE改善THP处理大鼠心脏组织/H9c2 细胞氧化应激和线粒体功能的作用 |
| 1.4 IQC和 AVLE对 THP所致大鼠心脏组织/H9c2 细胞损伤的保护作用机制 |
| 1.4.1 THP诱导大鼠心脏损伤miRNA芯片生物信息学分析及miR-190a-5p/Phlpp1/AKT/Bcl-2 信号通路的构建 |
| 1.4.2 miR-190a-5p/Phlpp1 生物学作用及IQC、AVLE和 DZR对miR-190a-5p/Phlpp1 调控作用的验证 |
| 1.4.3 AKT作为IQC和 AVLE保护THP诱导大鼠心脏组织/H9c2 细胞损伤作用节点的探讨 |
| 1.4.4 miR-190a-5p减轻THP处理H9c2 细胞氧化应激及对线粒体功能的保护作用 |
| 1.4.5 miR-190a-5p在 IQC和 AVLE保护THP诱导H9c2 细胞损伤机制中的探讨 |
| 1.5 IQC与 AVLE药效对比分析 |
| 第5篇 结论 |
| 创新点 |
| 今后工作展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）Src通过ANLN-1稳定高尔基体促进受损神经元突起形成的实验研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 第1章文献综述 |
| 第2章材料与方法 |
| 2.1 实验仪器 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验试剂的配制 |
| 2.4 研究方法 |
| 第3章实验结果与分析 |
| 3.1 皮层神经元的体外培养 |
| 3.2 神经元氧化应激损伤模型的构建 |
| 3.3 Src激活对H_2O_2损伤神经元ANLN-1、pSrc和高尔基体的作用 |
| 3.4 Src通过ANLN-1稳定高尔基体调节损伤神经元突起形成 |
| 第4章讨论 |
| 第5章结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡蛋蛋白质的主要功能 |
| 1.1 抗氧化活性(氧化应激响应活性) |
| 1.2 抗菌活性 |
| 1.3 血管紧张素转移酶抑制活性 |
| 1.4 抗病毒活性 |
| 1.5 其他生物活性 |
| 2 蛋白质组学研究 |
| 2.1 蛋白质组学的常用技术 |
| 2.2 蛋白质组学技术的应用 |
| 2.3 鸡蛋蛋白质翻译后的研究 |
| 3 藏鸡蛋的研究进展 |
| 3.1 藏鸡蛋蛋壳的研究进展 |
| 3.2 低氧孵化对鸡胚组织器官的影响 |
| 3.3 低氧适应性相关蛋白质的研究 |
| 4 PIT54及血管生成的研究进展 |
| 4.1 PIT54的相关研究 |
| 4.2 血管生成及常用的模型 |
| 4.3 促血管生成因子对于血管生成的影响 |
| 5 本课题选题的学术思想 |
| 5.1 研究目的与意义 |
| 5.2 学术思想 |
| 5.3 主要研究内容 |
| 第二章 两种海拔高度鸡种蛋蛋清蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 EW基本营养成分分析 |
| 2.2 蛋清蛋白质的GO分类分析 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析两组的抗氧化活性差异 |
| 2.5 CEW和 TEW的抗氧化活性测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 抗氧化相关蛋白质的筛选 |
| 4 小结 |
| 第三章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄蛋白质组的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果和讨论 |
| 2.1 TEY和 CEY的基本营养成分分析及其蛋白质的鉴定 |
| 2.2 TEY和 CEY中差异表达的蛋白质 |
| 2.3 差异蛋白质的生物信息学分析 |
| 2.4 生物信息学分析差异蛋白质与抗氧化活性相关 |
| 2.5 藏鸡和白来航鸡抗氧化活性相关的蛋白和基因 |
| 2.6 体外抗氧化测定 |
| 2.7 细胞毒性/细胞保护作用 |
| 3 讨论 |
| 3.1 差异蛋白质的功能分析 |
| 3.2 CEYH和 TEYH对于Caco-2 细胞的保护作用 |
| 3.3 鉴定与抗氧化活性有关的蛋黄蛋白质 |
| 4 小结 |
| 第四章 两种海拔高度鸡种蛋抗氧化蛋白质筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 蛋白质注释 |
| 1.3 鸡蛋抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 比较本研究中鉴定的蛋白质与已报道蛋白质 |
| 2.2 构建蛋清和蛋黄中蛋白质数据集 |
| 2.3 确定抗氧化活性候选蛋白质 |
| 2.4 PIT54的功能分析与同源比对 |
| 3 讨论 |
| 3.1 鸡蛋中抗氧化活性蛋白质的筛选 |
| 3.2 PIT54的生物活性预测分析 |
| 3.3 PIT54的保守性分析 |
| 4 小结 |
| 第五章 两种海拔高度鸡种蛋蛋黄PIT-54的纯化与质谱分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 血红蛋白的提取及亲和层析柱的制备 |
| 2.2 PIT54蛋白质纯化 |
| 2.3 质谱鉴定 |
| 2.4 PIT54与血红蛋白的结合能力 |
| 2.5 PIT54抗氧化能力的测定 |
| 2.6 两种来源的PIT54糖基化位点鉴定 |
| 2.7 两种蛋白质的磷酸化位点差异鉴定 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 两种海拔高度PIT54对CAM血管生成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 低氧孵化过程的模拟与控制 |
| 2.2 调试与孵化测试 |
| 2.3 鸡胚尿囊绒毛膜的给药时间点筛选 |
| 2.4 两种PIT54 对于鸡胚CAM的血管发育的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 高原低氧孵化箱的模拟与控制 |
| 3.2 不同孵化时间对于CAM血管生成的影响 |
| 3.3 不同药物对于鸡胚CAM血管发育的影响 |
| 4 小结 |
| 第七章 两种海拔PIT54对CAM血管生成机制的探究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 PIT54抗体的制备与效果评价 |
| 2.2 PIT54的表达部分探测 |
| 2.3 C-PIT54和T-PIT54对HIF-1α表达量的影响 |
| 2.4 不同药物处理对VEGFR2/Src信号分子机制的影响 |
| 2.5 C-PIT54和T-PIT54对PI3K/Akt信号分子机制的影响 |
| 2.6 C-PIT54和T-PIT54对ERK和p38 及各自磷酸化水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 PIT54表达部位分析 |
| 3.2 C-PIT54和T-PIT54 对血管生成相关蛋白的影响 |
| 3.3 PIT54 影响鸡胚CAM血管生成的机制 |
| 4 小结 |
| 第八章 两种海拔高度鸡PIT54基因测序比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 载体的构建与酶切鉴定 |
| 2.2 PIT54 protein基因DNA结构分析 |
| 2.3 不同来源的PIT54 protein基因DNA序列比较分析 |
| 2.4 预测的T-PIT54与C-PIT54 氨基酸序列的比较分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第九章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 创新性 |
| 3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）SIRT1通过基于基因芯片筛选的linc00963调节人小梁网细胞中纤维连接蛋白的表达（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、激活或过表达SIRT1后人小梁网细胞中lncRNAs表达谱分析 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验对象 |
| 1.1.2 仪器设备与材料、试剂 |
| 1.1.3 试剂配制 |
| 1.1.4 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 RSV刺激HTMCs模型以及SIRT1 过表达慢病毒感染HTMCs模型的成功建立 |
| 1.2.2 lncRNA芯片的基因表达谱分析结果 |
| 1.2.3 Real-time PCR对芯片数据结果的验证 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、SIRT1 对小梁网细胞功能的调节机制 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验对象 |
| 2.1.2 仪器设备与材料、试剂 |
| 2.1.3 试剂配制 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 氧化应激对HTMCs细胞活性、细胞凋亡和细胞外基质的表达影响 |
| 2.2.2 RSV对氧化应激状态下HTMCs中 FN表达、细胞活性和细胞迁移的影响 |
| 2.2.3 SIRT1 对氧化应激状态下HTMCs中 FN表达、细胞活性和细胞迁移的影响 |
| 2.2.4 RSV激活SIRT1或SIRT1 过表达对linc00693和miR-1 表达的影响 |
| 2.2.5 linc00963对miR-1 以及FN表达水平的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 展望及不足之处 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 SIRT1 与眼病研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）新型微米复合物提高茶叶活性成分EGCG稳定性及抗炎效果的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 EGCG的理化性质 |
| 1.2 EGCG生物利用率 |
| 1.3 微胶囊包埋技术提高EGCG稳定性 |
| 1.4 EGCG的抗炎作用及机理 |
| 1.4.1 EGCG对机体氧化-还原状态的调节作用 |
| 1.4.2 EGCG对炎症因子水平的调节作用 |
| 1.4.3 EGCG对炎症相关通路的调控作用 |
| 1.5 炎症性肠病的发生及防治 |
| 1.6 本研究的目的、意义及主要内容 |
| 第二章 RBAI负载对EGCG稳定性的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验设备 |
| 2.2.3 RBAI的制备 |
| 2.2.4 EGCG-RBAI复合物制备 |
| 2.2.5 考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度 |
| 2.2.6 稳定性实验 |
| 2.2.7 体外模拟胃肠道消化实验 |
| 2.2.8 HPLC法检测EGCG浓度 |
| 2.2.9 数据处理 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 RBAI的蛋白质成分分析 |
| 2.3.2 RBAI负载对EGCG在pH 7.4 PBS中稳定性的影响 |
| 2.3.3 RBAI负载对EGCG在模拟胃肠道消化液中稳定性的影响 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 HT-29细胞炎症模型建立及毒性检测 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 材料和试剂 |
| 3.2.2 仪器设备 |
| 3.2.3 HT-29细胞培养方法 |
| 3.2.4 MTT法检测细胞存活率 |
| 3.2.5 分组预处理实验和IL-1β诱导HT-29细胞炎症 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR (qPCR)分析基因表达 |
| 3.2.7 数据处理 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 不同浓度EGCG对HT-29细胞存活率的影响 |
| 3.3.2 RBAI浓度对HT-29细胞存活率的影响 |
| 3.3.3 EGCG- RBAI复合物配方对HT-29细胞存活率的影响 |
| 3.3.4 EGCG预处理对炎症生物标记基因表达的影响 |
| 3.3.5 RBAI预处理对炎症生物标记基因表达的影响 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 EGCG-RBAI复合物对炎症相关信号通路激活的抑制作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 材料和试剂 |
| 4.2.2 仪器设备 |
| 4.2.3 细胞实验用不同配方EGCG-RBAI复合物的制备 |
| 4.2.4 ORAC法检测抗氧化能力 |
| 4.2.5 细胞预处理实验 |
| 4.2.6 qPCR法定量检测基因表达 |
| 4.2.7 IL-8和PGE2浓度检测方法 |
| 4.2.8 数据处理 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 细胞实验用EGCG-RBAI配方筛选 |
| 4.3.2 不同预处理对炎症相关主要信号通路基因表达的影响 |
| 4.3.3 不同预处理对通路下游炎症相关基因表达的影响 |
| 4.3.4 不同预处理对细胞上清液IL-8和PGE2水平的影响 |
| 4.3.5 不同预处理对炎症相关基因表达及炎症因子分泌的影响分析 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 EGCG-RBAI复合物对细胞氧化应激响应的调节作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验细胞系 |
| 5.2.2 实验材料 |
| 5.2.3 实验设备 |
| 5.2.4 细胞预处理实验 |
| 5.2.5 qPCR法定量检测Nrf2基因表达 |
| 5.2.6 SOD活力检测 |
| 5.2.7 MDA含量检测 |
| 5.2.8 数据处理 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 不同预处理对细胞氧化应激响应的调节作用 |
| 5.3.2 不同预处理对细胞氧化应激响应的影响分析 |
| 5.3.3 IL-1β诱导HT-29细胞炎症发生机制探讨 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
（6）连接组蛋白H1.2在糖尿病视网膜病变以及脂肪肝病变中的初步研究（论文提纲范文）
| 论文创新点 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1. 研究背景 |
| 1.1 糖尿病及视网膜病变 |
| 1.1.1 糖尿病 |
| 1.1.2 糖尿病视网膜病变 |
| 1.1.3 糖尿病视网膜中的炎症反应 |
| 1.1.4 糖尿病视网膜中的细胞死亡 |
| 1.2 自噬与视网膜疾病 |
| 1.2.1 自噬及自噬的调控 |
| 1.2.2 自噬与视网膜疾病 |
| 1.3 DNA损伤与糖尿病视网膜 |
| 1.3.1 DNA损伤与细胞衰老 |
| 1.3.2 多ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)与DNA损伤 |
| 1.3.3 DNA损伤与糖尿病 |
| 1.4 非酒精性脂肪肝 |
| 1.4.1 肥胖和2型糖尿病 |
| 1.4.2 非酒精性脂肪肝 |
| 1.4.3 肝细胞中的脂肪酸代谢 |
| 1.5 连接组蛋白 |
| 1.5.1 连接组蛋白的结构 |
| 1.5.2 连接组蛋白H1的功能 |
| 1.5.3 连接组蛋白H1.2的已知功能 |
| 1.6 本文的研究内容 |
| 2. 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物与细胞 |
| 2.1.2 实验器械与设备 |
| 2.1.3 实验试剂及耗材 |
| 2.2 动物和细胞实验模型的建立和取材 |
| 2.2.1 动物模型的建立 |
| 2.2.2 细胞模型的建立方法 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 蛋白质免疫印迹 |
| 2.3.2 实时荧光定量PCR(qPCR) |
| 2.3.3 组织/细胞染色 |
| 2.3.4 细胞核质分离实验 |
| 2.3.5 组蛋白提取 |
| 2.3.6 MTT比色法 |
| 2.3.7 免疫沉淀-质谱/免疫共沉淀(IP/Co-IP): |
| 2.3.8 质粒构建 |
| 2.3.9 统计方法 |
| 3. 实验结果与分析 |
| 3.1 组蛋白H1.2对自噬的调控 |
| 3.1.1 体内外高糖环境对组蛋白H1.2的影响 |
| 3.1.2 体内外高糖环境对自噬水平的影响 |
| 3.1.3 体外过表达H1.2上调细胞自噬流水平 |
| 3.1.4 H1.2促进胶质细胞激活、神经细胞死亡以及细胞炎症反应 |
| 3.1.5 敲低H1.2抑制细胞自噬、炎症以及细胞活性 |
| 3.1.6 过表达H1.2所引起的细胞自噬是依赖于自噬蛋白ATG7 |
| 3.1.7 过表达H1.2通过调控HDACs来调控AcH4K16水平 |
| 3.1.8 过表达H1.2引起视网膜中自噬升高以及视网膜病理变化 |
| 3.1.9 抑制H1.2可以缓解糖尿病引起的视网膜病变 |
| 3.1.10 组蛋白H1.2在高糖刺激和过表达条件下定位于细胞核 |
| 3.1.11 单纯的自噬可以引起视网膜神经细胞的丢失 |
| 3.1.12 小结1 |
| 3.2 组蛋白H1.2对DNA损伤的调控 |
| 3.2.1 体内/体外高糖环境对DNA损伤的影响 |
| 3.2.2 过表达H1.2对DNA损伤的影响 |
| 3.2.3 敲低H1.2抑制应激引起的DNA损伤以及细胞衰老 |
| 3.2.4 组蛋白H1.2与PARP-1和nucleolin相互作用 |
| 3.2.5 H1.2过表达能够促进p53蛋白水平的升高 |
| 3.2.6 小结2 |
| 3.3 H1.2对肝细胞脂质积累的影响 |
| 3.3.1 高脂条件引起小鼠肝脏中H1.2的下调 |
| 3.3.2 体外高脂刺激肝脏细胞引起H1.2的下调 |
| 3.3.3 H1.2影响肝细胞中脂滴的积累 |
| 3.3.4 高脂条件引起小鼠肝脏中自噬水平的降低 |
| 3.3.5 人肝细胞中敲低H1.2抑制细胞自噬 |
| 3.3.6 H1.2对脂质合成相关基因转录水平的影响 |
| 3.3.7 小结3 |
| 4. 讨论与展望 |
| 4.1 组蛋白H1.2在糖尿病视网膜中的作用 |
| 4.1.1 组蛋白H1.2在高糖刺激下的变化 |
| 4.1.2 组蛋白H1.2在糖尿病视网膜中对自噬的调控 |
| 4.2 组蛋白H1.2对DNA损伤的调控 |
| 4.2.1 组蛋白H1.2在糖网中对DNA损伤的调控作用及分子机制 |
| 4.2.2 组蛋白H1.2对细胞衰老的调控及其分子机制 |
| 4.2.3 组蛋白H1.2对细胞自噬和DNA损伤调控之间的关系 |
| 4.3 组蛋白H1.2在肝细胞中对脂滴积累的影响 |
| 4.3.1 高脂刺激下肝细胞中组蛋白H1.2的变化 |
| 参考文献 |
| 攻博期间发表的科研成果目录 |
| 致谢 |
（7）表没食子儿茶素没食子酸酯对抗肿瘤所致心肌损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细胞、动物和试剂 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 S180荷瘤小鼠模型的建立及分组给药方法 |
| 1.3.1. 1 S180荷瘤小鼠模型的建立 |
| 1.3.1. 2 分组 |
| 1.3.2 检测样本的制备 |
| 1.3.2. 1 小鼠组织样本的制备 |
| 1.3.2. 2 心肌组织匀浆的制备 |
| 1.3.2. 3 小鼠S180细胞和心肌细胞的制备 |
| 1.3.3 各项生化指标的测定 |
| 1.3.3. 1 S180小鼠心肌组织LDH及CK活力的测定 |
| 1.3.3. 2 S180小鼠心肌组织锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn SOD)活力的测定 |
| 1.3.4 采用流式细胞仪检测各项指标 |
| 1.3.4. 1 S180细胞凋亡水平的测定 |
| 1.3.4. 2 S180小鼠心肌线粒体膜电位(△Ψm)的测定 |
| 1.3.4. 3 S180小鼠心肌组织ROS的测定 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 EGCG对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 |
| 2.2 EGCG对ADR所致荷瘤小鼠心肌损伤的保护作用 |
| 2.3 EGCG对ADR小鼠心肌细胞线粒体抗氧化能力的影响 |
| 2.4 EGCG对ADR所致荷瘤小鼠心肌损伤中ROS水平的影响 |
| 2.5 EGCG对ADR所致荷瘤小鼠心肌损伤中线粒体膜电位的影响 |
| 3 讨论 |
（8）CFT-1茶叶对DEN诱发大鼠肝癌的化学预防作用及其可能机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 EGCG国内外研究现状 |
| 1.1.1 提高茶叶EGCG含量的研究 |
| 1.1.2 EGCG药理作用研究现状 |
| 1.2 动物肝癌模型的研究现状 |
| 1.2.1 肝癌模型建立的方法 |
| 1.2.2 诱癌剂的种类 |
| 1.2.3 诱癌剂注射剂量的研究进展 |
| 1.3 EGCG抗癌作用相关蛋白的研究进展 |
| 1.4 茶叶毒理安全研究进展 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 第2章 二乙基亚硝胺(DEN)对诱导大鼠肝癌模型的研究 |
| 2.1 实验材料与仪器 |
| 2.1.1 受试动物 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验动物分组与模型建立 |
| 2.2.2 肝脏肿瘤发生情况判定 |
| 2.2.3 组织病理(HE)分析 |
| 2.2.4 各组大鼠肝功能指标检测 |
| 2.3 实验结果与分析 |
| 2.3.1 各组大鼠的体重的变化情况 |
| 2.3.2 各组大鼠实验前后饮食变化 |
| 2.3.3 各组大鼠脏器指数的比较 |
| 2.3.4 各组大鼠的肝功能指标的比较 |
| 2.3.5 各组大鼠的肝脏表象观察 |
| 2.3.6 各组大鼠的肝脏肿瘤发生情况 |
| 2.3.7 各组大鼠肝脏病理分析 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 CFT-1茶叶DEN诱发大鼠肝癌PCNA、Bcl-2和Bax的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 受试动物和供试材料 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.1.3 实验试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 大鼠建模方法 |
| 3.2.2 免疫组化方法 |
| 3.2.3 Western blotting检测PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表达方法 |
| 3.2.4 荧光定量检测大鼠肝脏组织PCNA、Bcl-2、Bax基因表达 |
| 3.3 结果分析 |
| 3.3.1 各组大鼠体重的变化 |
| 3.3.2 各组大鼠饮食量和饮水量的比较 |
| 3.3.3 各组大鼠肝脏表象及肿瘤发生情况 |
| 3.3.4 各组大鼠血清的肝功能指标结果分析 |
| 3.3.5 免疫组化结果分析 |
| 3.3.6 Western blotting免疫印迹结果分析 |
| 3.3.7 实时荧光定量PCR分析 |
| 3.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）没食子提取物对IgA肾病大鼠TGF-β1、IL-6水平变化的影响研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要药材 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 IgAN大鼠模型建立 |
| 2.2 分组及处理 |
| 2.3 标本采集及检测 |
| 2.4 主要实验方法 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计学方法 |
| 5 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 |
| 导师评阅表 |
四、EGCG对H_2O_2诱导的螺旋神经节细胞MnSOD基因表达的影响（论文参考文献）
- [1]罗布麻叶总黄酮及异槲皮苷对吡柔比星致心脏损伤的保护作用和机制[D]. 张洋. 吉林大学, 2021(01)
- [2]Src通过ANLN-1稳定高尔基体促进受损神经元突起形成的实验研究[D]. 王晓宇. 吉林大学, 2020(08)
- [3]藏鸡种蛋氧化应激响应蛋白质的筛选及其PIT54对血管生成机制的研究[D]. 刘亚平. 华中农业大学, 2019(01)
- [4]SIRT1通过基于基因芯片筛选的linc00963调节人小梁网细胞中纤维连接蛋白的表达[D]. 郭俊宏. 天津医科大学, 2019(02)
- [5]新型微米复合物提高茶叶活性成分EGCG稳定性及抗炎效果的研究[D]. 黄龙月. 浙江大学, 2019(01)
- [6]连接组蛋白H1.2在糖尿病视网膜病变以及脂肪肝病变中的初步研究[D]. 王文君. 武汉大学, 2017(06)
- [7]表没食子儿茶素没食子酸酯对抗肿瘤所致心肌损伤的保护作用[J]. 宁佳鸣,张妍淞,姚于飞,王喆,李露,陈家俊,李文娟. 食品科学, 2016(11)
- [8]CFT-1茶叶对DEN诱发大鼠肝癌的化学预防作用及其可能机制[D]. 赵普. 福建农林大学, 2016(01)
- [9]没食子提取物对IgA肾病大鼠TGF-β1、IL-6水平变化的影响研究[D]. 刘衍杰. 新疆医科大学, 2016(12)
- [10]耳蜗螺旋神经节细胞的损伤和再生[J]. 赵振鹿,乔月华,丛涛,李兴启,杨仕明,赵立东. 中华耳科学杂志, 2016(01)