一、动脉粥样硬化程度与巨细胞病毒感染的关系（论文文献综述）
陈刚[1]（2020）在《外周血中HCMV-MIR-UL112-3p水平与颈动脉IMT增加的相关性及HCMV引起脐静脉内皮细胞内皮-间质转化的分子机制》文中指出第一部分外周血中HCMV-MIR-UL112-3p水平与颈动脉IMT增加的相关性1研究背景动脉粥样硬化是一种进行性疾病,以脂质和纤维成分在动脉中聚集为主要特征。炎症反应在动脉粥样硬化发生过程中发挥重要作用,是引起心血管疾病的最重要原因,包括中风、心肌梗死、心力衰竭和血管瘤等。流行病学研究表明动脉粥样硬化存在多种危险因子,然而动脉粥样硬化的发病机制和病因尚不完全清楚。人巨细胞病毒（Human Cytomegalovirus,HCMV）属于疱疹病毒β亚科,为双链DNA病毒。在全球范围成人血清抗体阳性率为60-90%以上,与所有的疱疹病毒一样,一旦发生感染,HCMV会在宿主体内（唾液腺、白细胞等处）建立持续终生的潜伏感染,潜伏感染常会间断性地被激活而发生再激活感染。血管系统中的HCMV感染与心血管疾病如动脉粥样硬化、再狭窄和移植血管硬化,均存在相关性。HCMV可通过改变细胞粘附分子的表达、诱导内皮功能障碍和干扰细胞因子信号来加重病变血管的炎症反应。抗病毒药物更昔洛韦已被证明能降低心脏移植相关的动脉粥样硬化发生。HCMV编码至少26个成熟的mi RNA,但这些mi RNA与临床病理的相关性仍不确定。HCMV-mir-UL112-3p（mi R-UL112-3p）是HCMV编码的mi RNA中研究最广泛的一种,可以靶向调控宿主细胞和病毒转录。先前的研究表明,在高血压患者中,mi R-UL112-3p是唯一高表达的循环型HCMV编码mi RNA,并且它与高血压风险的增加有关。此外,有研究显示血浆HCMV-Ig G或抗CMV抗体水平与动脉粥样硬化有关,而另一些临床研究则发现HCMV感染与动脉粥样硬化之间的相关性不强。在本研究中我们检测了动脉粥样硬化患者血浆/血清中的mi R-UL112-3p和HCMV Ig G水平,同时通过颈动脉超声检查患者内膜中层厚度（IMT）,分析mi R-UL112-3p和HCMV Ig G、Ig M水平与IMT之间的关系,评估HCMV感染与动脉粥样硬化的相关性。2研究目的通过回顾性调查分析动脉粥样硬化患者颈动脉IMT和外周血炎性细胞因子水平与外周血中HCMV Ig G、Ig M和mi R-UL112-3p水平之间的关系,评估HCMV感染与动脉粥样硬化的相关性。3研究方法3.1研究对象和检测方法招募2012年9月至2016年6月在安徽医科大学第一附属医院心内科、神经内科、内分泌科就诊的颈动脉粥样硬化患者458名,收集患者临床资料,包括年龄、性别、糖尿病史、体重指数（BMI）、吸烟史和高血压史。抽血检测空腹血糖（FBG）、餐后血糖（PBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、T3、游离T4和促甲状腺激素（TSH）。通过颈动脉超声检查患者IMT值。通过荧光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）检测外周血中mi R-UL112-3p的拷贝数,使用梅里埃酶联荧光试剂盒分析（ELFA）HCMV Ig M和Ig G水平,使用ELISA试剂盒检测血浆中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。3.2统计学分析采用Excel 2007建立数据库,SPSS 16.0进行统计分析,正态分布定量资料采用均数标准差进行描述,组间比较采用t检验或方差分析。定性资料采用构成比或频率进行描述,组间比较使用χ2检验。对于IMT值的以高于平均IMT值定义为“高”。为了确定独立的风险因素和高IMT的优势比（OR）,置信区间（cis）设为95%,采用多元逻辑回归模型,包括mi R-UL112-3p阳性率、HCMV Ig G滴度、Framingham评分以及IL-1β含量的对数、TNF-α含量的对数和IL-6含量的对数,单变量分析P<0.05,以确保没有显着的多重共线性。利用单一的线性单变量相关（Pearson相关系数）和逐步多变量回归分析来评价抗HCMV Ig G抗体滴度和其它变量的值之间关系。以P<0.05为差异有统计学意义。4研究结果共458名参与者被纳入研究,其中247人（53.9%）被指定为高（IMT）组。多变量logistic回归分析显示高IMT的四个独立危险因素分别是mi R-UL112-3p阳性（OR 1.05,95%CI 1.01-1.07;P=0.004）,抗HCMV抗体滴度高（OR 1.04,95%CI 1.01-1.06;P=0.003）,Framingham评分高（OR1.14,95%CI 1.02-1.27;P=0.018）,高IL-1β含量（OR 2.96,95%CI 1.26-6.97;P=0.013）。多变量相关性分析显示mi R-UL112-3p阳性率与最大IMT（r=0.328,P<0.001）、游离T4水平（r=0.247,P=0.032）和对数（TNF-α）（r=0.509,P<0.001）显着正相关。5研究结论本研究首次评估了颈动脉粥样硬化与亚洲人群中mi R-UL112-3p阳性率之间的相关性。研究结果表明HCMV与动脉粥样硬化存在相关性。第二部分HCMV通过MMP-2促进内皮-间质转化后脐静脉内皮细胞中的TGF-β1活化1研究背景HCMV属于疱疹病毒β亚科（β-herpesvirus）,为双链DNA病毒。世界范围内HCMV感染非常普遍,在成年前大部分人群均已感染,一旦感染病毒将终身存在于宿主体内。现已发现HCMV与多种心血管疾病,如动脉粥样硬化（AS）、冠心病和高血压存在联系,此外HCMV感染还与血管内皮细胞功能障碍有关。血管内皮细胞能够参与心血管疾病的多种生理和病理过程。内皮功能障碍以及与其相关的心血管疾病是由于内皮细胞间质转化（End MT）引起的。在End MT过程中,内皮细胞（ECs）失去特异性血管内皮标记物如血管内皮钙粘蛋白（VE-cadherin）和白细胞分化抗原31（CD31）,获得间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、成纤维细胞特异性蛋白1（角蛋白）和纤维连接蛋白,获得迁移性、侵袭性和增殖性表型。End MT的发生受到多种细胞因子的调节,其中TGF-β1（Transforming growth factor-β1）是End MT发生的关键细胞因子,同时也是血管病理生理过程中重要的细胞因子。TGF-β1的表达水平升高能够促进心血管疾病的发生,如引起肺动脉高压（PAH）和动脉粥样硬化,阻断TGF-β1的表达可以抑制PAH过程和不稳定AS斑块形成。在人成纤维细胞中HCMV感染5h后即可由HCMV IE基因激活TGF-β1启动子,使TGF-β1的表达量提高4倍。此外,TGF-β1可以被蛋白酶（plasmin）、金属蛋白酶（MMPs）、血小板反应蛋白-1（TSP-1）、αvβ6和αvβ8激活,由无活性状态转变为高活性状态。因此,我们推测HCMV感染可能引起血管内皮细胞中TGF-β1表达水平提高或激活潜伏的TGF-β1,使得血管内皮细胞出现End MT,参与动脉粥样硬化的发生。2研究目的观察HCMV感染对血管内皮细胞End MT的影响,讨论HCMV感染参与动脉粥样硬化发生和进展的可能分子机制。3研究方法3.1细胞和病毒培养脐静脉内皮细胞（Human Umbilical vein endothelial cells,HUVEC）用含有BFGF（20 ng/ml）、EFG（10 ng/ml）和人血浆纤连蛋白（10μg/ml）的Human Endothelial-SFM（Life Technologies,Carlsbad CA,USA）无血清培养基进行培养。HELF和水貂肺上皮细胞用含10%胎牛血清（Life Technologies,Carlsbad CA,USA）的DMEM培养基（Life Technologies,Carlsbad CA,USA）培养。HCMV TR株病毒在HELF细胞上传代培养,将病毒培养物上清通过4℃,16000×g离心2h,用Human Endothelial-SFM培养液重悬病毒,并分装冻存于-80℃。对于紫外线灭活病毒,将病毒置于无菌交联小室（Bio-Rad,Hercules CA,USA）中用150 m J的紫外线照射。3.2病毒滴度检测在96孔细胞培养板中每孔加入2.5×104个HELF培养过夜;次日,每孔加入100μl稀释后的病毒悬液,在37℃,5%CO2培养箱中培养过夜;次日,弃去培养液,用PBS洗涤3次,每孔加入无水乙醇50μl室温固定20min,弃去无水乙醇,立即用PBS水化15min;用PBS洗涤3次,每孔加入20μl稀释好的HCMV IE单克隆抗体,室温孵育2h;用PBS洗涤3次,每孔加入20μl稀释好的山羊抗小鼠Ig G-FITC,室温孵育1h;用PBS洗涤3次,每孔加入用PBS配制的70%甘油20μl,于倒置荧光显微镜下观察。根据以下公式计算感染单位（in infectious units/ml）),IU/ml=IE阳性信号数×10×1×稀释倍数。3.3间接免疫荧光细胞爬片至盖玻片上,按照MOI=1接种HCMV TR,加入或不加入ra TGF-β1孵育5d或48h,用4%的多聚甲醛固定,再于0.1%的Triton X-100透化。向细胞中加入一抗4℃孵育过夜,洗涤,与Alexa Fluor 488或Alexa Fluor 594标记的二抗室温孵育1h,加入Alexa Fluor 488标记的鬼笔环肽和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）,或单独使用DAPI室温孵育15min,洗涤后封片,在荧光显微镜（Olympus Fluoview BX51,Center Valley PA）下观察。3.4蛋白质印迹法（Western Blot）裂解细胞,取30μg总蛋白用的10%的SDS-PAGE胶进行电泳,使用半干式转膜仪（Bio-Rad）转移至PVDF膜上。将膜置于5%脱脂奶粉溶液中室温封闭2h,加入适当稀释的一抗4°C孵育过夜,洗涤后加入适当稀释的辣根过氧化物酶（HRP）标记二抗室温孵育1h。将膜洗涤3次后在膜上涂布ECL发光液,在化学发光成像仪上观察结果。3.5 RNA提取、逆转录和荧光定量PCR检测收集细胞,用RNeasy kit提取总RNA,使用RT2 First Strand Kit将RNA反转录成c DNA,所有操作按照说明书进行。通过荧光定量PCR检测目的基因的表达水平,以18S RNA作为内参进行标化。3.6 TGF-β1含量检测分别使用水貂肺上皮细胞报告基因生物测定法和ELISA试剂盒测定细胞培养上清中总TGF-β1和活化TGF-β1的含量。3.7免疫共沉淀用预冷含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞,加入MMP-2抗体,4℃孵育过夜,再与protein A-agarose孵育,用RIPA裂解液洗涤并重悬,加入SDS-PAGE上样缓冲液,煮沸,用8%的SDS-PAGE胶进行电泳,保留免疫共沉淀前的细胞裂解液作为对照。使用TIMP-2,MT1-MMP和MT3-MMP分别对免疫共沉淀前、后的细胞裂解液进行Western blot检测。3.8 sh RNA转染将MMP-2 sh RNA及其对照质粒通过Amaxa cell line nucleofector Kit V转染HUVEC细胞,24h后在荧光显微镜下观察到细胞出现明显的绿色荧光时,即可判定为转染成功。转染步骤参考试剂盒说明书进行。3.9统计学分析所有分析在Prism 5.0软件上进行。使用Student T test和one-way analysis of variance（ANOVA）比较不同组间差异,以P<0.05表示差异有显着性。4.研究结果1)HCMV可以在HUVEC细胞中增殖但不受ra TGF-β1的影响;2)HCMV能够感染被TGF-β1诱导发生EndMT的HUEVC;3)HCMV可以诱导发生EndMT的HUEVC细胞中TGF-β1活化;4)细胞中新合成活化TGF-β1的量与TGF-β1及HCMV的感染量呈正相关;5)MMP-2参与了HCMV感染引起发生EndMT的血管内皮细胞上调活化TGF-β1。5研究结论在本研究中我们发现感染HCMV的脐静脉内皮细胞与未感染细胞一样,在经过TGF-β1处理后出现End MT相关的形态和基因表达变化。感染HCMV的HUEVC细胞,经TGF-β1处理后,可以通过激活MMP-2活化细胞外潜伏状态的TGF-β1。HCMV感染不会阻止或减少TGF-β1诱导的End MT,相反可以上调发生End MT的细胞中大量纤维化分子的表达,这可能是HCMV影响动脉粥样硬化发生发展的分子机制之一。
加倩[2]（2020）在《基于医疗大数据对运气交接节气的探索》文中研究表明目的:基于北京市全部急诊医保病例统计资料,比较大寒急诊患者的禀赋特点、疾病特点与前一年六之气（大雪、冬至、小寒）及后一年初之气（立春、雨水、惊蛰）的相似性,及大寒是否新出现与后一年运气相应的疾病,从而验证运气交接节气为大寒或立春。方法:本研究采用回顾性研究方法,分为禀赋特点分析与疾病特点分析两个角度。禀赋特点分析亦分为两部分:一部分为患者禀赋构成比较,以北京市2014-2018年的大寒及其前后3节气的全部急诊医保统计资料,计算各时间段内全部患者禀各岁运各客气的急诊人次及占比,代表该时间段的10岁运禀赋构成及12客气禀赋构成,通过曼哈顿距离（差的绝对值之和）比较大寒急诊患者的禀赋构成与其前3节气及后3节气急诊患者的相似性大小,若大寒与其前3节气的曼哈顿距离小于大寒与其后3节气的曼哈顿距离,说明大寒患者的禀赋特点与其前3节气更接近,即于大寒时运气并未转换交接,则立春应为运气交接节气,反之则大寒应为运气交接节气;另一部分为高发与低发禀赋变化的比较,即将各节气内10岁运及12客气各禀赋的急诊人次按从高到低排序,通过各节气急诊人次较高与较低的禀赋发生变化的节点判断运气交接节气。疾病特点分析以北京市2015年1月20日-2020年1月19日5年全部急诊医保统计资料,根据当年的总医保人数,计算各疾病在各节气的发病率,与各疾病120个节气的平均发病率相比较得到高发疾病;进而将5年同节气重复出现的高发疾病视为该节气的反复高发疾病;在各年各节气高发疾病中去除该节气于5年中的反复高发疾病,即去除节气因素对疾病的影响,以表示该节气客运客气影响下的高发疾病,结合临床经验及中医典籍,分析比较2016-2019年大寒及其前后3节气高发疾病相似性,及大寒的高发疾病特点是否更符合下一年的运气特点,进而判断运气交接节气。结果:禀赋特点分析结果显示2014-2018年大寒不论男性女性患者均与其后一年初之气的曼哈顿距离更小,即大寒与后一年初之气各禀赋构成的相似性更高;同时各节点不论男性与女性患者均于大寒开始出现与后一年初之气相同/相近的高发及低发禀赋的变化,且符合在某岁运、客气当令时,该岁运、客气禀赋为低发禀赋,而太少相反的岁运、司天在泉相反或阴阳五行属性相反的客气则为高发禀赋这一大体规律。疾病特点分析的结果亦显示各个大寒的疾病特点更符合后一年初之气的运气相应疾病特点,出现典型的与后一年初之气运气相应的疾病群。故本研究结果支持大寒为运气交接节气。结论:本研究利用目前较为丰富的医疗大数据及规范统计学分析方法验证五运六气的交接节气,为运气交接时刻的争议提供临床数据支持,开拓五运六气周期的验证性研究,为运气起始时刻的研究提供新思路;尚可为疾病与五运六气理论的印证提供临床依据,深化五运六气理论的内涵,并为疾病预测、治未病提供指导,具有重要理论价值和临床意义。
李翔[3]（2020）在《瑞舒伐他汀联合普罗布考对冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块的影响》文中研究说明背景冠心病（Coronary Heart Disease,CHD）是目前引起死亡的最主要的心脏疾病。冠心病的首要致病因素是冠状动脉粥样硬化以及粥样斑块形成,颈动脉粥样硬化及斑块形成与冠心病有一定的相关性。冠心病和糖尿病的发病机制中都有氧化应激和炎症反应。他汀类药物是临床上治疗高胆固醇血症的首选药物,在防止动脉粥样硬化过程中发挥了关键作用。普罗布考是一种抗氧化类降脂药物,其与他汀类药物联合使用治疗颈动脉斑块的作用并不清楚。目的研究瑞舒伐他汀与普罗布考联合治疗对冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块的影响。方法收集2017年12月-2019年12月期间在偃师市人民医院住院治疗的120例冠心病合并糖尿病的患者。所有的患者均大于18周岁并在导管室接受冠状动脉造影（CAG）。详细记录每位入组对象的基本临床资料,血生化检查至少包括TG、TC、LDL-C、HDL-C、FBG、Hb A1c、CRP、IL-6、TNF-α,并检测患者颈动脉内膜斑块面积、颈动脉内中膜厚度（Carotid intima-media thickness,CIMT）和颈动脉斑块Crouse积分。将患者随机分为对照组和试验组,两组患者除常规必需治疗外,对照组调脂药物服用瑞舒伐他汀,试验组调脂药物服用瑞舒伐他汀和普罗布考,两组均进行为期10个月的治疗。在治疗期间由本院医护人员进行定期回访,在治疗1个月、3个月及10个月后复查两组患者TG、TC、LDL-C、HDL-C、FBG、Hb A1c、CRP、IL-6、TNF-α的同时复查患者肝功能、肾功能及心电图,记录患者的不良反应,随时与患者保持联系,保证临床用药的安全性。治疗10个月后复查两组患者颈动脉内膜斑块面积、CIMT和颈动脉斑块Crouse积分的变化情况。然后运用统计学t检验的方法对比分析两组患者的各项数据。结果1.治疗10个月后两组患者血浆TG、TC、LDL-C、Hb A1c、CRP、IL-6、TNF-α均低于治疗前,差异有统计学意义;两组患者HDL-C、FBG治疗前后差异无统计学意义。2.试验组治疗10个月后TG、TC、LDL-C、Hb A1c、CRP、IL-6、TNF-α均低于对照组治疗后,差异有统计学意义。3.治疗10个月后两组患者的颈动脉内膜斑块面积、CIMT和颈动脉斑块Crouse积分均较治疗前降低;试验组治疗后颈动脉内膜斑块面积、CIMT和颈动脉斑块Crouse积分均低于对照组治疗后,差异有统计学意义。4.两组患者治疗后不良反应无差异。结论1.瑞舒伐他汀与普罗布考联合治疗与单纯服用瑞舒伐他汀相比可以进一步降低冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块的厚度和面积,减小CIMT厚度,并且可以降低血浆中血脂、血糖及炎症因子的水平。2.瑞舒伐他汀与普罗布考联合治疗是一项对于冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块效果较佳的治疗方案,具有较好的有效性和安全性。
杨帅[4]（2019）在《幽门螺杆菌感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA促进巨噬细胞源性泡沫细胞形成和动脉粥样硬化进展的作用及机制研究》文中提出研究背景与假设:动脉粥样硬化相关的心脑血管疾病是全球首位致死病因。动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是众多心脑血管疾病共同的病理学基础,也是此类疾病防治的重要环节。然而,传统危险因素例如吸烟、高血脂、高血压、糖尿病等,仅能解释约50%的动脉粥样硬化的发病率,提示尚有未被认识或干预的非传统危险因素。动脉粥样硬化是血管壁受损后发生的一种慢性炎症过程并且炎症反应贯穿于斑块进展的各个阶段,提示慢性感染在动脉粥样硬化的发生发展中具有重要作用。大量的血清流行病学和临床观察研究发现,幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染与动脉粥样硬化及动脉粥样硬化性心脑血管病发生具有显着相关性。然而,尚无明确证据证实这种相关性是因果关系还是仅为促进作用。因此,本课题旨在探究H.pylori胃内感染是否直接诱发动脉粥样硬化的斑块形成或是否间接促进动脉粥样硬化斑块的进展。外泌体在介导细胞与细胞间和器官与器官间的信号交流和功能调节中具有非常重要的功能。大量的研究发现,感染性疾病中致病菌包括细菌、病毒和寄生虫等,可挟持外泌体分泌机器释放病原菌自身成分包括毒力因子和细菌表面抗原等,参与病原菌的自身存活、自我复制和改变宿主内环境等,从而激活宿主防御反应或发挥致病作用。最新的研究报道提示H.pylori感染宿主细胞来源的外泌体可递送至远隔器官可能在H.pylori感染所致的胃外疾病中具有重要作用。因此,本课题旨在探究H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体是否进入循环参与动脉粥样硬化的发生发展。多项荟萃分析显示,CagA阳性的H.pylori感染与动脉粥样硬化及动脉粥样硬化性心脑血管病发生率相比CagA阴性的H.pylori感染具有更为显着的相关性。这些结果提示了CagA作为H.pylori关键毒力因子,可能与动脉粥样硬化发生发展存在可能相关性。最新一项研究发现H.pylori感染病人的血清外泌体内携带CagA蛋白,提示了CagA可能被外泌体递送至循环导致胃外疾病。然而,H.pylori感染胃上皮细胞释放的外泌体是否携带CagA蛋白尚不清楚。因此,本课题旨在探究H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体携带H.pylori关键毒力因子CagA是否参与动脉粥样硬化的发生发展。研究目的:（1）研究H.pylori感染是否诱导动脉粥样硬化形成或促进动脉粥样硬化进展;（2）研究H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体是否促进巨噬细胞源泡沫细胞形成和动脉粥样硬化进展;（3）研究H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA是否促进巨噬细胞源泡沫细胞形成和动脉粥样硬化进展。研究方法与结果:第一部分:（1）本研究首先使用C57BL/6野生型（WT）小鼠作为动物模型。将WT小鼠给予H.pylori PMSS1菌株灌胃造模4周并恢复两周后,分别给予正常饮食和高脂肪/高胆固醇饮食16周。H.pylori PMSS1菌株灌胃造模后,利用免疫荧光染色显示,H.pylori灌胃组小鼠胃粘膜组织内H.pylori定植率100%,PBS灌胃组小鼠H.pylori定植率为0。（2）主动脉血管组织大体油红O染色和主动脉根部HE染色显示,NCD饮食条件下,PBS组和H.pylori感染组WT小鼠在16周后均未观察到动脉粥样硬化斑块的形成。（3）主动脉血管组织大体油红O染色显示,HFCD饮食条件下,PBS组和H.pylori感染组WT小鼠在16周后均未观察到动脉粥样硬化斑块的形成。然而,主动脉根部横断面HE染色发现,H.pylori感染组WT小鼠主动脉附着缘出现了早期斑块形成,而PBS组WT小鼠均未出现斑块形成。（4）我们进一步使用载脂蛋白E敲除小鼠(ApoE-/-)作为动物模型。将ApoE-/-小鼠给予H.pylori PMSS1菌株灌胃造模4周并恢复两周后,给予高脂肪饮食8周或16周。主动脉血管组织大体油红O染色显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉整体斑块面积和斑块占全内膜的面积百分比显着增加。主动脉根部横断面HE染色进一步提示,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉根部斑块面积显着高于PBS组ApoE-/-小鼠。（5）主动脉根部斑块油红O染色显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉根部斑块油红O染色区域与斑块面积比显着增加。（6）免疫荧光组织化学染色显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉根部斑块内巨噬细胞含量显着增加;与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠斑块内平滑肌细胞含量和I型胶原含量组间无统计学意义;但在H.pylori感染16周后,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠显着降低斑块内平滑肌细胞含量和I型胶原含量。组织化学分析还显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉根部斑块有更大的坏死核心和更薄的纤维帽。（7）与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8和16周后体重以及血清的总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白浓度组间差异无统计学意义。（8）免疫荧光组织化学染色显示,HFCD饮食条件下,PBS组WT小鼠16周后主动脉弓并无斑块形成,无巨噬细胞（CD68标记巨噬细胞）浸润和脂滴（Bodipy 493/503染料标记脂滴）的积累。H.pylori感染WT小鼠16周后再主动脉附着缘出现了早期斑块形成,斑块内主要是巨噬细胞浸润并且出现明显的脂滴蓄积。免疫荧光组织化学染色显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,H.pylori感染组ApoE-/-小鼠8周和16周后主动脉根部斑块内显着增加巨噬细胞的脂滴蓄积和泡沫化形成。第二部分:（1）我们首先通过建立能够模拟体内的H.pylori感染胃上皮细胞体外模型,将H.pylori PMSS1与人胃上皮细胞系GES-1（MOI=1:50）共培养12 h后,去除共培养上清,无菌PBS溶液反复洗涤4次以去除细胞外及黏附在细胞表面的H.pylori;加入去除外泌体的完全培养基,并加入庆大霉素以阻止细胞外和黏附在细胞表面的H.pylori的生长;待孵育48 h后收集细胞上清,进一步采用标准的超速离心法提取对照组GES-1释放的外泌体（GES-EVs）和H.pylori感染GES-1后释放的外泌体（Hp-GES-EVs）。（2）我们采用PKH26标记Hp-GES-EVs,与巨噬细胞系Raw264.7细胞在37℃条件下共孵育6 h。通过激光共聚焦显微镜观察结果显示,大量外泌体被摄取并定位于巨噬细胞的胞浆内。（3）我们采用PBS+oxLDL（50μg/ml）、GES-EVs+oxLDL（50μg/ml）和Hp-GES-EVs+oxLDL（50μg/ml）分别刺激巨噬细胞24h,然后进行油红O染色检测三组细胞的泡沫细胞形成比例和细胞内脂质积累情况。结果表明:Hp-GES-EVs组巨噬细胞内脂滴积累及泡沫细胞形成比例较Control组（PBS处理）和GES-EVs组显着增多,而Control组（PBS处理）和GES-EVs组的细胞内脂滴积累及泡沫细胞形成比例组间无明显差异。（4）我们将上述分组的巨噬细胞通过胆固醇检测试剂盒分别检测总胆固醇及游离胆固醇,两者之差为胆固醇酯。结果表明,与对照组相比,GES-EVs不影响细胞内的总胆固醇和胆固醇酯的含量,而Hp-GES-EVs显着增加细胞内总胆固醇、胆固醇酯的含量。（5）我们选择16周高脂肪饮食喂养已形成较大斑块的ApoE-/-小鼠作为动物模型。通过尾静脉分别注射200μL Dil标记的外泌体（0.1μg/μL）和对照组的Dil染料观察其体内分布。注射24 h后,置于小动物活体成像仪内,采用Ex/Em549 nm/565 nm进行荧光扫描,并拍摄X光片。结果显示,Hp-GES-EVs注射24h后,荧光强度蓄积在胸主动脉区域,而对照组无明显荧光强度蓄积。（6）我们迅速处死上述分组小鼠并采用PBS进行心脏灌流去除血液循环中的Dil标记的外泌体,取出主动脉和主动脉弓,避光条件下制备冰冻切片,置于共聚焦显微镜下观察主动脉和主动脉弓斑块内是否摄取荧光标记的外泌体（Dil-EVs）。结果显示,注射荧光标记的Hp-GES-EVs小鼠的主动脉弓斑块内分布较多的Dil-EVs,主要分布在巨噬细胞分布的脂质核心内,并可见细胞吞噬Dil-EVs（图）。（7）我们分别通过尾静脉注射PBS、GES-EVs和Hp-GES-EVs,每周注射两次,8周后处死动物。大体油红O染色显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉整体斑块面积和斑块占全内膜的面积百分比无明显统计学意义,而Hp-GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉整体斑块面积和斑块占全内膜的面积百分比显着增加,动脉粥样硬化严重程度增加。主动脉根部横断面HE染色进一步提示,Hp-GES-EVs组ApoE-/-小鼠的斑块面积显着高于GES-EVs组ApoE-/-小鼠和PBS组ApoE-/-小鼠。（8）我们通过油红O染色检测主动脉根部的粥样斑块。结果显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块油红O染色区域与斑块面积百分比无明显统计学意义,而Hp-GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块油红O染色区域与斑块面积显着增加。（9）通过免疫荧光组织化学染色的方法标记巨噬细胞特异性标志物CD68和脂滴特异性染料Bodipy 493/503。结果显示,与PBS组ApoE-/-小鼠相比,GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块内巨噬细胞内脂滴含量无显着差异,而Hp-GES-EVs组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块捏巨噬细胞内脂滴含量显着增加。第三部分:（1）我们通过免疫印迹检测H.pylori感染胃上皮细胞和所释放的外泌体内CagA的表达。结果显示,CagA表达在H.pylori感染的细胞和所释放的外泌体内,而不存在未感染的细胞和所释放的外泌体中。（2）我们采用PBS+oxLDL（50μg/ml）和rCagA（5μg/ml）+oxLDL（50μg/ml）分别刺激巨噬细胞24h,然后进行油红O染色检测两组细胞的泡沫细胞形成比例和细胞内脂质积累情况。结果表明:rCagA组巨噬细胞内脂滴积累及泡沫细胞形成比例较Vehicle组（PBS处理）显着增多。我们又进一步通过胆固醇检测试剂盒分别检测总胆固醇及胆固醇酯。结果表明,与对照组相比,rCagA显着增加细胞内总胆固醇、胆固醇酯的含量。（3）我们分别采用PBS和rCagA（5μg/ml）刺激巨噬细胞24 h后,添加荧光标记的Dil-oxLDL（20μg/ml）,直接观察巨噬细胞对脂蛋白的摄取。结果显示,两组细胞荧光强度无统计学差异,提示rCagA不增强巨噬细胞脂质摄取过程。进一步地,我们采用NBD标记的胆固醇（NBD-cholesterol）分别示踪检测由ApoA-I和HDL介导的胆固醇流出。结果显示,rCagA显着降低ApoA-I和HDL介导的胆固醇流出率。（4）我们通过免疫印迹和PCR检测介导摄取和流出的受体的蛋白和mRNA表达情况。与上述结果一致地是,免疫印迹结果显示,rCagA呈浓度依赖模式降低胆固醇流出受体ABCA1、ABCG1和SR-BI的表达,而不影响介导脂质摄取受体CD36、MSR1和LOX-1的表达。采用RT-PCR技术在mRNA水平检测ABCA1、ABCG1及SR-BI的表达,结果与蛋白表达相一致。结果显示,rCagA（5μg/ml）刺激巨噬细胞3h即可显着下调ABCA1、ABCG1和SR-BI的表达。（5）我们采用ApoE-/-小鼠腹腔注射rCagA,一周三次,12周后处死动物。大体油红O染色显示,与Saline组ApoE-/-小鼠相比,腹腔注射rCagA组ApoE-/-小鼠主动脉整体斑块面积和斑块占全内膜的面积百分比显着增加,动脉粥样硬化严重程度增加。主动脉根部横断面HE染色进一步提示,rCagA组ApoE-/-小鼠的主动脉弓斑块面积显着高于Saline组ApoE-/-小鼠。（6）我们通过油红O染色检测主动脉根部的粥样斑块的脂质含量。结果显示,与Saline组ApoE-/-小鼠相比,rCagA组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块油红O染色区域与斑块面积显着增加。免疫荧光组织化学染色的方法标记巨噬细胞特异性标志物CD68和脂滴特异性染料Bodipy 493/503。与Saline组ApoE-/-小鼠相比,rCagA组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块内巨噬细胞内脂滴含量显着增加。（7）我们留取主动脉血管组织匀浆裂解,免疫印迹结果显示,与Saline组ApoE-/-小鼠相比,rCagA组ApoE-/-小鼠主动脉血管组织内ABCA1、ABCG1和SR-BI的蛋白表达下调。进一步地,采用RT-PCR技术在mRNA水平检测ABCA1、ABCG1及SR-BI的表达,结果与蛋白表达相一致。（8）免疫荧光组织化学染色显示,与Saline组ApoE-/-小鼠相比,rCagA组ApoE-/-小鼠主动脉斑块有更大的坏死核心和更薄的纤维帽。（9）免疫印迹结果显示,rCagA刺激巨噬细胞可显着下调PPARγ和LXRα的蛋白表达。研究结论:通过本研究我们得到以下结论:（1）H.pylori感染主要依赖于加剧巨噬细胞源泡沫细胞形成从而促进动脉粥样硬化的斑块进展和不稳定性;（2）H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA介导H.pylori感染的促动脉粥样硬化作用;（3）机制方面,CagA通过下调转录因子PPARγ/LXRα,并由此抑制胆固醇流出受体ABCA1/ABCG1/SR-BI的表达,阻断巨噬细胞胆固醇流出,从而加重巨噬细胞泡沫化;这一研究进一步揭示了CagA阳性幽门螺杆菌感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA在巨噬细胞泡沫化中的作用及机制,为解释H.pylori感染与动脉粥样硬化及相关心脑血管事件发生提供了可能机制,为预防和减少H.pylori感染相关的心脑血管事件的发生提供了新的证据。
张陈欢[5]（2019）在《巨细胞病毒感染及内皮抑素水平与缺血性脑卒中不良预后的关系》文中研究指明背景随着经济的发展,生活方式的转变,脑卒中的发病率越来越高,又因为脑卒中高致死率、高致残率的特点,脑卒中在全国和全世界都已经成为重大的公共卫生挑战。以往的研究表明传统的危险因素不能完全解释缺血性脑卒中病后死亡、残疾、心血管事件的发生。近年来的研究发现感染和血管生成可能对脑卒中的预后产生影响。我们的研究分为两部分,第一部分利用《感染因子和急性炎症标志物对急性缺血性脑卒中预后的影响（IIPAIS）》项目,研究巨细胞病毒（HCMV）感染对缺血性脑卒中短期不良预后的影响,第二部分在中国急性缺血性脑卒中降血压试验（CATIS）的基础上进行,研究血管生成抑制剂内皮抑素（ES）对缺血性脑卒中长期不良预后的影响。第一部分研究目的在已经完成研究对象纳入、基线资料收集及发病后14天（或出院）随访的IIPAIS项目基础上,探讨HCMV感染与缺血性脑卒中短期不良预后（死亡、心血管事件、死亡和严重残疾的复合结局及死亡和心血管事件的复合结局）的关系。对象与方法本研究部分将参加IIPAIS试验的缺血性脑卒中患者作为研究对象,共1 150人纳入本研究,问卷收集人口统计学资料、生活方式资料、个人疾病史及脑卒中家族史。并收集了血液常规检测指标,HCMV-IgM抗体含量使用全自动酶联免疫分析仪检测。在患者发病后14天（或出院时）进行随访,不良预后包括死亡、心血管事件、死亡和严重残疾的复合结局及死亡和心血管事件的复合结局。采用Logistic回归模型分析血清HCMV-IgM水平与发病后14天（或出院时）不良结局的关联强度。计算比值比（OR）和相应的95%置信区间（CI）。利用限制立方样条结合Logistic回归模型评估血浆ES水平与不良预后的剂量反应关系。同时,根据性别、年龄（<65 vs≥65岁）、入院收缩压（<140 vs ≥140 mm Hg）以及入院NIHSS评分（<4 vs ≥4）将研究对象进行分层,在每一层中分别分析血清HCMV-IgM与发病14天（或出院时）不良预后的关系。同时,我们还计算净重分类改善指数（NRI）和综合判别指数（IDI）来评价血清HCMV-IgM对急性缺血性脑卒中患者短期不良预后的预测能力。研究结果本研究共纳入急性缺血性脑卒中首发患者1150例,男性787例（68.43%）,女性363例（31.57%）,平均年龄62.39±11.19岁。发病14天（或出院）时,19例研究对象死亡,23例发生心血管事件,351例发生死亡和严重残疾的复合结局,40例发生死亡和心血管事件的复合结局。与血清HCMV-IgM最低四分位组患者相比,最高四分位组患者发病14天（或出院时）死亡和严重残疾的复合结局（OR 1.65;95%CI 1.03-2.64）及死亡和心血管事件的复合结局（OR 5.72;95%CI 1.24-26.36）的发生风险显着增加。限制性立方样条显示,血清HCMV-IgM与死亡和严重残疾的复合结局（线性趋势检验P=0.031）的风险存在剂量反应关系。将血清HCMV-IgM加入传统的预测模型,能够显着提高模型对缺血性脑卒中患者发病14天（或出院时）死亡的预测能力（NRI%22.41,P=0.022;IDI%2.08,P=0.024）。研究结论本研究结果显示,HCMV感染可以增加缺血性脑卒中患者短期死亡和严重残疾复合结局及死亡和心血管事件复合结局的发生风险,在传统模型上加入血清HCMV-IgM水平可以提高模型对缺血性脑卒中短期死亡的预测能力。第二部分研究目的本研究部分在已完成的CATIS临床试验的基础上,探讨血浆ES水平与缺血性脑卒中长期不良预后（死亡、心血管事件、死亡和严重残疾的复合结局及死亡和心血管事件的复合结局）的关系。对象与方法本研究纳入来自于CATIS的研究对象3463人,入院24小时内收集的基线资料包括人口统计学特征、生活方式危险因素、临床特征、疾病史、缺血性脑卒中亚型和用药史等。并对研究对象第一次常规的血液学检查资料进行收集,血浆ES的检测采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。在患者发病后3个月进行随访,不良预后包括死亡、心血管事件、死亡和严重残疾的复合结局及死亡和心血管事件的复合结局。采用Logistic回归模型分析血浆ES水平与发病后3个月不良结局的关联强度。计算比值比（OR）和相应的95%置信区间（CI）。利用限制立方样条结合Logistic回归模型评估血浆ES水平与研究结局的剂量反应关系。同时,根据性别、年龄（<65 vs ≥65岁）、入院收缩压（<160vs≥160mm Hg）以及入院NIHSS评分（<4vs≥4）将研究对象分为多个亚组,在每一亚组中分别分析血浆ES水平与缺血性脑卒中发病后3个月不良预后的关系。同时,我们还计算净重分类改善指数（NRI）和综合判别指数（IDI）来评价血浆ES水平对急性缺血性脑卒中患者长期不良预后的预测能力。研究结果经过3个月随访,81例患者死亡,101例患者发生心血管事件,401例患者发生死亡和严重残疾的复合结局,139例患者发生死亡和心血管事件的复合结局。与血浆ES水平最低四分位组的患者相比,最高四分位组的缺血性脑卒中患者发病3个月死亡的风险显着增加（OR 2.57;95%CI 1.25-5.27）。血浆ES水平与死亡（P=0.008）及死亡和严重残疾的复合结局（P=0.044）存在剂量反应关系。将血浆ES水平加入传统的预测模型,能够显着提高模型对缺血性脑卒中患者发病3个月死亡风险的预测能力（NRI%13.97,P=0.028;IDI%1.41,P=0.011）。研究结论我们的结果表明,较高的血浆ES水平与缺血性脑卒中长期不良预后相关。传统模型中加入血浆ES水平能够改善模型对脑卒中患者的不良预后的预测能力。
马晓旭[6]（2019）在《巨细胞病毒感染及IL-6、IL-8与急性冠脉综合征相关性研究》文中指出目的:本研究通过采取酶联免疫吸附法、化学发光法检测对照组及急性冠脉综合征（ACS）患者血清巨细胞病毒IgG、IgM抗体、IL-6及IL-8水平,以探讨巨细胞病毒感染及IL-6、IL-8与急性冠脉综合征的关系。研究方法:（1）研究对象:选取于2018年9月至2019年2月期间在大连医科大学附属第二医院心内科因“胸痛”为主诉入院的患者,根据心电图、心肌标志物测定结果及典型临床症状,明确诊断为:不稳定型心绞痛组（UA）32例、急性心肌梗死组（AMI）22例,即急性冠脉综合征组共54例。选取同期因“胸痛”入院,完善冠脉造影检查正常的患者51例,为对照组。在105例入选者中,男性57例,女性48例,年龄范围在37-89岁,所有入组患者既往均否认冠心病病史,入院后均行冠脉造影检查。入组患者采用Gensini评分对各支冠状动脉狭窄程度进行定量评定并进行分组。在ACS组中,根据冠脉造影Gensini积分水平分为轻度病变组（1-19分,10例）,中度病变组（20-39分,14例）,重度病变组（≥40分,30例）。将ACS组分为HCMV-IgG阳性组和HCMV-IgG阴性组,其中HCMV-IgG阳性组49例,HCMV-IgG阴性组5例。（2）排除标准:临床及造影资料不全、严重心力衰竭（LVEF<35%）、肝肾功能不全、甲状腺疾病、急性炎症性疾病、凝血功能障碍、风湿免疫疾病、恶性肿瘤及血液病患者、心脏瓣膜疾病、心肌病及其他类型器质性心脏病者,近期接受重大手术者。（3）生化检查:收集所有患者如下指标:血凝常规、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白（CTNI）、proBNP、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、人巨细胞病毒抗体（HCMV-IgG和HCMV-IgM）、IL-6及IL-8。研究结果1.与对照组HCMV-IgG阳性率（58.82%）相比较,ACS组中HCMV-IgG阳性率（90.74%）显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组HCMV-IgG滴度水平（2.00±1.64）相比较,ACS组中HCMV-IgG滴度水平（3.46±1.57）显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）。其中将ACS组分为AMI组及UA组,与对照组HCMV-IgG滴度水平（2.00±1.64）相比较,UA组HCMV-IgG滴度水平（3.12±1.33）显着升高,AMI组HCMV-IgG滴度水平（3.95±1.77）显着升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;但UA组与AMI组间HCMV-IgG滴度无统计学意义（P>0.05）。对照组与ACS组HCMV-IgM阳性率无统计学差异,均为0%。2.与对照组TC（3.91±0.72）、LDL-C（1.81±0.65）相比较,ACS组TC（4.79±1.20）、LDL-C（2.36±0.76）显着升高;而与对照组HDL-C（1.51±0.50）相比较,ACS组HDL-C（1.23±0.36）显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。将ACS组分为AMI组及UA组,与对照组IL-6（2.89±1.15）、IL-8（54.66±74.66）相比较,UA组IL-6（4.18±2.17）、IL-8（74.84±35.95）显着升高;与UA组IL-6（4.18±2.17）相比较,AMI组IL-6（7.65±4.20）显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）;UA组IL-8（74.84±35.95）与AMI组IL-8（110.79±76.36）相比较,差异无统计学意义（P>0.05）。3.将HCMV-IgG滴度、IL-6、IL-8、TC、LDL-C、HDL-C、性别、吸烟、年龄、体重指数、高血压病、糖尿病一同纳入二元logistic回归模型,发现IL-8、胆固醇、高血压病、糖尿病、年龄是ACS发生、发展的独立危险因素（P<0.05）,（危险系数分别为1.015、3.135、5.794、13.05和1.091）。进一步绘制巨细胞病毒IgG滴度、IL-6、IL-8的ROC曲线,结果为巨细胞病毒IgG滴度的ROC曲线下面积为0.714;IL-6的ROC曲线下面积为0.773;IL-8的ROC曲线下面积为0.738,提示HCMV-IgG滴度、IL-6、IL-8对急性冠脉综合征有中等程度的诊断价值,IL-6的诊断价值最为显着,其次为IL-8,再次为HCMV-IgG。4.将ACS组进一步分为HCMV-IgG阳性组和HCMV-IgG阴性组,与IgG阴性组IL-6（2.20±0.45）、IL-8（28.54±19.08）、TC（3.46±0.53）、LDL-C（1.33±0.26）相比较,IgG阳性组IL-6（5.94±3.56）、IL-8（95.71±57.27）、TC（4.92±1.17）、LDL-C（2.46±0.71）显着升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与IgG阴性组HDL-C（1.70±0.34）相比较,IgG阳性组HDL-C（1.19±0.33）显研究结果:着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.ACS患者体内血清HCMV-IgG滴度水平、IL-6、IL-8水平较对照组升高,并且与Gensini评分呈正相关。2.血清IL-8、胆固醇、高血压病、糖尿病、年龄是影响ACS发生的独立危险因素。3.血清HCMV-IgG、IL-6及IL-8水平对急性冠脉综合征有中等程度的诊断价值。
王飞[7]（2017）在《乙肝病毒感染对冠心病患者支架植入术后双联抗血小板疗效的影响》文中提出目的:探讨乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）感染的冠心病（Coronary artery disease,CAD）患者接受经皮冠状动脉介入治疗术（Percutaneous coronary intervention,PCI）后阿司匹林和氯批格雷双联抗血小板治疗（Dual antiplatelet therapy,DAPT）疗效的影响。方法:本研究前瞻性入选在南京医科大学第一附属医院心内科冠脉中心行PCI治疗冠心病患者1742名,所有患者入选前均服用阿司匹林（100mg/天）及氯吡格雷（75mg/天）≥5天。入院后行输血前八项检查,证实乙肝表面抗原（Hepatitis B surface antigen^HBsAg）阳性的患者为乙肝病毒感染组,HBsAg阴性患者为非乙肝病毒感染组。所有患者均经光学比浊法（Light transmittance aggregometry,LTA）检测血小板聚集功能,分别以1mmol/L花生四烯酸诱导的血小板聚集率（Arachidonic acid induced platelet aggregation,PLAA）和 5μmol/L 二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率（Adenosine diphosphate induced platelet aggregation,PLADP）表示阿司匹林与氯吡格雷的实验室抗血小板效果,并对两组患者氯吡格雷药物代谢相关基因ABCB1、CYP2C19、CYP3A5、PON1进行基因多态性检测;两组患者均接受持续抗血小板治疗至术后一年,于术后第1个月,第6个月和第12个月通过电话及门诊进行随访,记录临床事件。一年随访相关临床事件包括:心源性死亡、非致死性心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑卒中、靶血管血运重建（Target vessel revascularization,TVR）;安全性事件:包括TIMI主要及次要出血。结果:经检查共有HBsAg阳性患者109名,列为HBV感染组,HBsAg阴性患者1633名,列为非HBV感染组。其中HBV感染组中有4名,非HBV感染组中有45名患者未完成一年随访,实际每组入组人数分别为105名和1588名。住院期间理化指标检查发现两组患者对应的天冬氨酸转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）和血小板计数有统计学差异[（73.4±113.4 vs.53.1±92.5,/P=0.036）及（180±60.2 vs.193.4±62.5,P=0.035）];但是两组患者在性别、年龄、心功能、吸烟史、诊断、既往史、氯吡格雷药物代谢相关基因分型等临床资料上,以及冠脉造影和PCI指标上均无统计学意义（P>0.05）。两组间住院期间PLADP分别为（37.56±15.55）%及（30.02±14.16）%,HBV 感染组 PLADP 显着高于非HBV感染组（P<0.01）;而两组PLAA值无统计学差异[（5.05±7.95）%vs.（4.24±6.17）%,P=0.215];将 PLADP>40%定义为氯吡格雷低反应性（Clopidogrel low response,CLR）,将 PLAA>20%定义为阿司匹林抵抗（Aspirin resistance,AR）,发现HBV感染组CLR比例要高于非HBV感染组（46.7%vs.22.3%,P<0.01）。而AR发生率两组间无统计学差异（1.9%vs.1.1%,P=0.758）;细胞色素P450系统药物代谢酶CYP2C19基因多态性与CLR存在相关性,强代谢型与中间代谢型发生 CLR 的几率较低（OR:0.29;95%CI:0.20-0.41,P<0.01&OR:0.69;95%CI:0.58-0.81,P<0.01）,而弱代谢型基因是CLR的独立危险因素,（OR:1.38;95%CI:1.25-1.53,P<0.01）;一年随访显示结果两组心源性死亡发生率（0.95%vs.1.0%,P=0.652）、心肌梗死发生率（2.9%vs.1.1%,P=0.240）、不稳定性心绞痛发生率（9.5%vs.5.2%,P=0.056）、缺血性脑卒中发生率（1.9%vs.0.9%,P=0.261）以及TVR发生率（4.8%vs.4.4%,P=0.941）均无统计学意义,但HBV感染组患者总体临床事件发生率要高于非HBV感染组（20.0%vs.12.5%）,具有统计学意义（P=0.028）;与影响冠心病预后的传统危险因素类似,存在CLR的患者也有较高的发生临床事件的风险（OR:1.40;95%CI:1.10-1.78,P<0.01）;而两组出血事件发生率上无统计学差异（16.2%vs.18.8,P=0.502）。结论:感染HBV的冠心病患者在接受双联抗血小板治疗时,CLR发生率高于非HBV感染者;在冠状动脉支架植入术后,HBV感染患者总体临床事件风险显着高于非HBV感染者。
苏怀勇[8]（2016）在《人巨细胞病毒感染与原发性高血压的关系研究》文中认为背景及目的高血压是最常见的慢性病,是动脉硬化的独立危险因素。它所引起的心、脑、肾脏等靶器官的损害已成为影响人们生存质量的主要原因,同时也给社会和家庭带了沉重的经济负担。随着心血管流行病学和循证医学的进展,近年来我国高血压的防治取得了一定的进步,但面临的高血压的防治任务仍然非常艰巨,目前对高血压的发病机制仍然不甚清楚,随着病理学和病理生理学研究的不断深入,人们发现炎症反应在高血压疾病的发生发展中发挥着十分重要的作用。许多研究发现HCMV能够导致血管内皮细胞凋亡,血管平滑肌细胞大量增殖,使动脉内膜层增厚,血管管腔变窄,引发动脉硬化等血管病变。鉴于动脉硬化与高血压发生发展之间存在着密切的联系,而目前对HCMV感染与高血压发病之间的相关性研究甚少,因此,本研究通过选取原发性高血压患者作为研究对象,比较高血压患者与健康人群人巨细胞病毒的感染率及其血浆中和抗体水平,初步探讨HCMV感染与高血压的关系,为高血压的早期诊断和治疗提供依据。方法参照《2013中国高血压防治指南》作为原发性高血压的诊断标准,选择2014年1月至2014年12月在我院就诊的原发性高血压（1,2级）患者60例作为实验组,选取同期来我院进行体检的60例健康体检者作为对照组,分别测定两组研究对象的血压,并采集两组研究对象的空腹血液标本,进行以下检测：1、采用全自动生化分析仪对采集的患者的血液样本进行空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶、尿素氮、肌酐的检测,并详细记录检测结果；2、采用人巨细胞病毒核酸扩增荧光定量检测试剂盒测定采集的血液样本中的HCMV DNA;3、采用人巨细胞病毒IgG和IgM ELISA检测试剂盒测定血液样本中的HCMV IgG和IgM水平,并详细记录检测结果；4、对HCMV IgG阳性的血液标本进行HCMV特异性中和抗体的检测,并详细记录检测结果；5、采用SPSS19.0统计学软件包对数据进行统计学分析。服从正态分布的计量资料采用均数±标准差（x±S）表示,不服从正态分布的计量资料采用中位数±四分位数间距（M±Q）表示。计量资料采用t检验,计数资料用χ2检验进行统计学比较。所有检验均以α=0.05作为检验水准,p<0.05认为差异具有统计学意义。结果1.两组研究对象一般资料比较：比较高血压组患者与对照组的年龄、性别、血压、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶、尿素氮、肌酐,结果显示：两组研究对象的年龄、性别及高密度脂蛋白胆固醇、门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转氨酶、尿素氮、肌酐均无显着性差异,（P>0.05）；而高血压组患者的收缩压、舒张压、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均显着高于对照组,两组间比较有显着性差异（P<0.05）2.两组研究对象血液HCMV DNA的比较：高血压组HCMV DNA的检出率为71.67%,对照组HCMV DNA的检出率为55.00%,高血压组HCMV DNA的检出率高于对照组,两组间比较有显着性差异（P<0.05）。3.两组研究对象血浆HCMV IgG和IgM的比较：高血压组HCMV IgG和IgM的阳性率分别为70.00%和41.67%,对照组HCMV IgG和IgM的阳性率分别为56.67%和33.33%,高血压组HCMV IgG的阳性率高于对照组,两组间比较有显着性差异（P<0.05）,而两组的HCMV IgM比较没有显着性差异（P>0.05）。4.两组研究对象血浆中HCMV 特异性中和抗体的比较高血压组HCMV IgG阳性的血液样本中HCMV特异性中和抗体的50%中和滴度为（37.55±20.06）,对照组HCMV IgG阳性的血液样本中为（59.69±24.32）,高血压组HCMV特异性中和抗体的50%中和滴度低于对照组,两组间比较差异有显着性（P<0.05）。结论1.高血压患者的HCMV感染率高于健康人群,并且血糖异常率、总胆固醇异常率、低密度脂蛋白胆固醇及甘油三酯异常率亦高于健康人群；2.高血压患者HCMV IgG的阳性率显着高于健康人群,但是HCMV IgM则和健康人群没有差异；3.高血压患者HCMV特异性中和抗体滴度低于健康人群；4. HCMV感染可能是高血压发生的一个危险因素,通过检测HCMV可能为高血压事件的发生进行早期预防和早期诊治。
张君[9]（2016）在《人巨细胞病毒与2型糖尿病的相关性研究》文中研究表明研究背景及目的人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus, HCMV）属于β-疱疹病毒亚科的双链DNA病毒,基因大小约为236kb,大约有165个开放阅读框编码蛋白质。HCMV是引起人类感染性疾病的常见病原体之一。人类对HCMV普遍易感,在世界范围内HCMV感染的流行率为40%一100%,HCMV可通过胎盘、密切接触、注射、输血、性交或器官移植等途径感染。和其他疱疹病毒一样,HCMV感染机体后,可长期存在于机体内,无法清除；并在一生中潜伏性感染与活动性感染反复交替发生或可获得再感染。HCMV感染是否引起HCMV疾病与机体的免疫状态有关。在免疫正常的个体中,通常引起无症状感染或类似单核细胞增多症的轻微临床表现。然而,在新生儿、免疫功能低下或缺陷个体中,HCMV可导致严重的疾病。例如,HCMV可经胎盘由母亲传播给胎儿引起先天性HCMV感染,而先天性巨细胞病毒感染是导致新生儿先天畸形、智力低下、发育迟缓等严重后遗症的最常见病原体。据报道,10%的新生儿发生宫内感染后在出生时或在出生后一年内可出现HCMV疾病及症状,主要有听力受损、神经系统发育异常、肝肿大、脾肿大、出血及黄疸等,严重威胁着新生儿健康。此外,在免疫抑制的个体如接受器官移植术后患者中、免疫缺陷如人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的人群中,HCMV可引起严重而致命的机会性感染,可导致视网膜炎、肺炎、胃肠炎等疾病。2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）旧称非胰岛素依赖型糖尿病（Noninsulin-dependent diabetes mellitus,NIDDM）,约占糖尿病总发病率的90%-95%。由于人们生活方式的改变、生活水平的提高,目前糖尿病的发病率逐渐上升,糖尿病及其后续发生的并发症给人们的健康及整个社会的发展带来了严重的负担。在糖尿病的发生、发展过程中,慢性、持续的高血糖状态及长期代谢紊乱等可引起全身器官、组织功能障碍及衰竭,尤其是对视网膜、肾脏、神经及心血管系统的损害非常常见,严重威胁人类健康。T2DM早期主要表现为胰岛素抵抗伴胰岛素相对缺乏,晚期主要表现为胰岛素分泌不足伴胰岛素抵抗。与1型糖尿病不同的是,2型糖尿病患者的胰岛细胞功能还尚存在。目前,对T2DM病因认识还不足,T2DM是由多个基因及环境因素作用引起的病因复杂的疾病。经过长期的研究发现,下列因素与2型糖尿病的发生有关：基因遗传因素、脂蛋白a、高血糖症、胰岛淀粉样多肽、高同型半胱氨酸血症、凝血功能、雌激素缺乏、吸烟。然而,这些最常见的风险因素却没有占到糖尿病发病率的5-25%。因此,仍然存在其他有待研究的对糖尿病的发生起着主要作用的危险因素,其中主要包括炎症及感染。近年来研究发现病毒感染与糖尿病的发生有关。病毒感染可直接或通过免疫反应损伤胰岛β细胞最终导致糖尿病的发生。大量的研究结果表明,HCMV感染与1型糖尿病、移植后糖尿病的发生有关。然而,HCMV感染与2型糖尿病的相关性目前仍不明确,仅仅发现在2型糖尿病患者中,HCMV感染率较高,如在国内的研究中,HCMV在2型糖尿病人群中的感染率约为93%,在国外的一些研究中,HCMV在2型糖尿病患者中的感染率也较高,如美国为77%,荷兰为89.3%,捷克为77%。但HCMV活动性感染对2型糖尿病患者血糖调节,以及持续HCMV感染和反复HCMV活动对2型糖尿病的并发症的影响尚不清楚。本研究旨在通过调查人巨细胞病毒感染在2型糖尿病患者中的流行率,探讨人巨细胞病毒活动性感染对2型糖尿病患者血糖、C肽、糖化血红蛋白的影响；并通过测定反映HCMV长期感染的指标HCMV IgG滴度水平,研究HCMV IgG滴度水平与2型糖尿病患者并发症的相关性。研究方法1.病例资料收集2014年3月至6月在广州军区武汉总医院内分泌科住院治疗的222例2型糖尿病患者。2型糖尿病的诊断标准参照美国糖尿病协会2013年颁布的糖尿病诊断与分型指南。除外合并肿瘤、自身免疫性疾病、1型糖尿病患者。收集患者的一般资料包括：年龄、性别、体重指数（BMI）、糖尿病病程、糖尿病并发症（糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病动脉粥样硬化）、吸烟史、高血压病史。收集临床实验室检查资料,主要包括：空腹血糖、餐后2小时血糖、空腹C肽、餐后2小时C肽、糖化血红蛋白；甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等。2型糖尿病患者动脉粥样硬化的诊断主要通过血管彩超确诊。2.实验方法2.1聚合酶链反应检测HCMV DNA:采集上述222例2型糖尿病患者空腹静脉抗凝血5ml,运用人淋巴细胞分离液对抗凝血进行淋巴细胞分离,将分离得到的细胞用体液病毒DNA小量试剂盒提取病毒DNA,采用巢式PCR法扩增HCMV病毒IE片段来检测样本中的HCMV DNA,运用琼脂糖凝胶电泳方法鉴定PCR产物大小。2.2实时定量PCR根据GenBank上发表的HCMV基因序列,用Primer Premier 5.0软件针对HCMV病毒的IE基因保守区设计1对引物（目的片段大小为76bp）,采用SYBR GreenI-荧光定量PCR法对巢式PCR检测HCMVDNA阳性临床体液标本进行病毒载量测定。2.3化学发光法测定HCMV IgG滴度采集患者的非抗凝血标本3ml运用化学发光法检测HCMVIgG滴度。2.4统计学方法使用SPSS 20.0统计学软件进行数据处理。正态分布的计量资料以（χ2±s）表示,组间比较采用t检验；非正态分布的计量资料以（中位数,四分位间距）表示,组间比较采用非参数检验。计数资料用（n/%）形式表示,组间比较采用χ2检验。逻辑回归分析：以有无动脉粥样硬化为应变量（Y：无=0,有=1）；以下列因素作为自变量：年龄、性别、糖尿病病程、BMI、吸烟史、高血压病史、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。取双侧检验,P值<0.05表示差异有统计学意义。结果1.HCMV在2型糖尿病患者中的感染率及HCMV活动性感染与血糖调节的关系在本实验222例人群中,HCMV的感染率（IgG阳性率）高达99.0%（204/206）。应用巢式PCR方法检测T2DM人群中的HCMV DNA,其阳性率（活动性感染率）为22.3%（45/222）。通过比较HCMV DNA阳性及HCMV DNA阴性2型糖尿病患者临床指标发现,HCMV DNA阳性患者年龄显着低于DNA阴性患者人群（分别为54.1±14.9,59.1±13.2）（P=0.028）,提示HCMV活动性感染在年轻患者中常见。同时也分析了HCMV DNA阳性患者与DNA阴性患者的空腹血糖、餐后2小时血糖、糖化血红蛋白、空腹C肽、餐后2小时C肽,均无显着性差异。此外,通过比较HCMV DNA阳性2型糖尿病患者不同DNA病毒载量组间血糖、C肽、糖化血红蛋白等指标的差异后,空腹血糖、餐后2h血糖、空腹C肽、餐后2hC肽、糖化血红蛋白等指标在不同DNA病毒载量组间均无显着性差异,即DNA病毒载量与2型糖尿病患者血糖调节无显着性影响。2.HCMVIgG滴度与2型糖尿病并发症的关系化学发光法成功测得206例2型糖尿病患者的HCMVIgG滴度,其中204例患者提示HCMV既往感染（IgG滴度>1U/m1）,将IgG滴度水平按照统计学四分位数法分成四组：组1共51例患者（IgG滴度为：1-126 U/m1）,组2共51例患者（IgG滴度为：127-276 U/m1）,组3共45例患者（IgG滴度为：277-499 U/m1）,组4共57例患者（IgG滴度为：>500 U/m1）。比较不同IgG滴度水平组2型糖尿病患者并发症的发生率,结果发现：不同HCMV IgG滴度水平间糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变的发生率均无显着性差异（P值均>0.05）。但四组间2型糖尿病动脉粥样硬化的发生率有显着性差异（P=0.002）,组间比较结果显示：第一组与第二组、第一组与第四组糖尿病动脉粥样硬化的发生率均有显着性差异,P值分别为0.014和0.0004;然而第一组与第三组动脉粥样硬化的发生率没有显着性差异,P值为0.109。3.HCMVIgG滴度水平是2型糖尿病动脉粥样硬化的独立危险因素通过上述比较发现,IgG滴度水平与2型糖尿病动脉粥样硬化的发生率有关,实验进一步行逻辑回归分析探讨IgG滴度是否为糖尿病动脉粥样硬化的独立危险因。首先将是否存在动脉粥样硬化为应变量Y,将HCMVIgG滴度按照统计学四分位数方法分成四组（同上述）,调整年龄、性别、糖尿病病程、高血压病史、吸烟史、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等危险因素后,HCMV IgG滴度>500 U/ml和IgG滴度为127-276 U/ml与动脉粥样硬化显着相关；然而与IgG滴度低水平1-126 U/ml相比,IgG滴度为277-499U/ml动脉粥样硬化的发生风险度为2.6,95%可信区间为0.9-7.5。进一步将IgG滴度分成两组（IgG滴度1-126 U/ml、IgG滴度>127 U/ml）,调整所有危险因素后,结果显示IgG滴度大于127Um/ml可显着增加动脉粥样硬化的发生率,0R值为4.6（95%可信区间：1.9-11.3）。结论1.HCMV活动性感染对2型糖尿病患者血糖调节无显着性影响。2.高HCMVIgG滴度水平与2型糖尿病患者动脉粥样硬化的发生率有关,与糖尿病其他并发症的发生无关。3.HCMVIgG滴度大于127 U/ml可能为2型糖尿病患者动脉粥样硬化的独立危险因素。
周晓蕾,刘俭雄,黄静[10]（2015）在《人巨细胞病毒感染与颈动脉粥样硬化的相关性分析》文中认为目的检测动脉粥样硬化患者人巨细胞病毒感染情况,分析人巨细胞病毒感染与颈动脉粥样硬化发生的相关性,探讨病毒病因可能导致动脉粥样硬化的发病机制。方法选取142例动脉粥样硬化患者为观察组,同期选取70例健康体检患者为对照组,采用ELISA法检测其血清HCMV抗原,放射免疫法检测TNF-α含量,比较单支病变患者与多支病变患者HCMV感染率和TNF-α含量的差异。结果观察组HCMV感染检测阳性率为41.5%,高于对照组的18.6%,差异有统计学意义（χ2=11.038,P<0.05）,观察组中颈动脉单支病变HCMV感染阳性率32.8%,低于多支病变的48.1%,差异有统计学意义（χ2=3.381,P<0.05）,观察组中HCMV感染阳性患者的TNF-α为（3.03±0.36）μg/L,高于HCMV感染阴性患者的（1.24±0.30）μg/L,差异有统计学意义（t=18.254,P<0.01）。且TC、TG、HDL-C及LDL-C水平均高于感染阴性患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论人巨细胞病毒感染可能会导致患者的血脂异常及血管内皮细胞损伤,从而参与颈动脉粥样硬化的发生与发展。
二、动脉粥样硬化程度与巨细胞病毒感染的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、动脉粥样硬化程度与巨细胞病毒感染的关系（论文提纲范文）
（1）外周血中HCMV-MIR-UL112-3p水平与颈动脉IMT增加的相关性及HCMV引起脐静脉内皮细胞内皮-间质转化的分子机制（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 外周血中HCMV-MIR-UL112-3p水平与颈动脉IMT增加的相关性 |
| 1 前言 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 主要仪器和设备 |
| 2.2 主要试剂和耗材 |
| 2.3 病例选择与排除标准 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 一般资料收集 |
| 2.4.2 临床资料收集 |
| 2.4.3 颈动脉IMT测量方法 |
| 2.4.4 血清HCMV抗体及炎症因子水平检测 |
| 2.4.5 血浆中HCMV mi R-UL112-3p表达水平检测 |
| 2.4.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 人口统计学和临床概况 |
| 3.2 临床和实验室参数分析 |
| 3.3 外周血mi R-UL112-3p阳性与高IMT相关 |
| 3.4 HCMV与临床因素或生物学因素的相关性 |
| 4.讨论 |
| 4.1 HCMV感染、炎症因子与AS的相关性 |
| 4.2 HCMV感染、临床参数与AS的相关性 |
| 4.3 HCMV mi RNA与 AS的相关性 |
| 4.4 本研究的不足之处 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 HCMV通过MMP-2 促进内皮-间质转化后脐静脉内皮细胞中的TGF-β1活化 |
| 1 前言 |
| 1.1 HCMV感染对血管中主要细胞的影响 |
| 1.2 内皮间质转化与动脉粥样硬化 |
| 1.3 HCMV感染影响TGF-β1 的表达和活性 |
| 1.4 本研究的假说 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 主要仪器和设备 |
| 2.2 主要试剂和耗材 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞和病毒 |
| 2.3.2 细胞复苏 |
| 2.3.3 细胞传代 |
| 2.3.4 HCMV的培养和滴度测定 |
| 2.3.5 间接免疫荧光 |
| 2.3.6 MMP-2 sh RNA转染 |
| 2.3.7 RNA提取、逆转录和荧光定量PCR检测 |
| 2.3.8 免疫印迹(Western blot) |
| 2.3.9 免疫共沉淀 |
| 2.3.10 TGF-β1含量检测 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 HCMV可以在HUVEC细胞中增殖但不受ra TGF-β1 的影响 |
| 3.2 HCMV能够感染被TGF-β1 诱导发生End MT的 HUVEC |
| 3.3 HCMV可以诱导发生End MT的 HUVEC细胞中TGF-β1 活化 |
| 3.4 新生成激活状态TGF-β1 的量与TGF-β1及HCMV的感染量呈正相关 |
| 3.5 MMP-2 参与了HCMV感染引起发生End MT的血管内皮细胞上调活化TGF-β1 |
| 4 讨论 |
| 4.1 HCMV感染与血管内皮损伤 |
| 4.2 HCMV通过MMP-2 激活TGF-β1 促进血管内皮细胞End MT |
| 4.3 本研究的创新之处 |
| 4.4 本研究的不足之处 |
| 5.结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 HCMV 感染与冠心病的研究现状和进展 |
| 参考文献 |
（2）基于医疗大数据对运气交接节气的探索（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 文献综述一 二十四节气在中医学中的应用 |
| 1. 二十四节气起源 |
| 2. 二十四节气在中医学中的应用 |
| 3. 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 五运六气交接时刻的研究方法探讨 |
| 1. 经文解读 |
| 2. 天文历法溯源 |
| 3. 气象数据分析 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 基于医疗大数据对运气交接节气的探索 |
| 前言 |
| (一) 以急诊患者禀赋特点分析运气交接节气 |
| 1 临床资料 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| (二) 以急诊患者疾病特点判断运气交接节气 |
| 1 临床资料 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 讨论 |
| 1 关于研究的理论基础与可信度分析 |
| 2 与同类研究比较 |
| 3 研究意义 |
| 4 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录1 以立春为运气起始节气的禀赋特点比较 |
| 附录2 2016-2018年大寒前后3节气的高发疾病 |
| 简历 |
（3）瑞舒伐他汀联合普罗布考对冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:炎症介导的动脉粥样硬化与冠心病的关系 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）幽门螺杆菌感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA促进巨噬细胞源性泡沫细胞形成和动脉粥样硬化进展的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 动脉粥样硬化 |
| 1.1.1 动脉粥样硬化概述 |
| 1.1.2 单核/巨噬细胞在动脉粥样硬化中的作用 |
| 1.1.3 巨噬细胞泡沫化在动脉粥样硬化中的作用 |
| 1.1.4 病原菌感染与动脉粥样硬化 |
| 1.2 幽门螺杆菌 |
| 1.2.1 幽门螺杆菌概述 |
| 1.2.2 幽门螺杆菌毒力因子 |
| 1.2.3 幽门螺杆菌感染与胃外疾病 |
| 1.2.4 幽门螺杆菌感染与动脉粥样硬化 |
| 1.3 外泌体 |
| 1.3.1 外泌体的概述 |
| 1.3.2 外泌体的生物合成与分泌 |
| 1.3.3 外泌体的组成与功能 |
| 1.3.4 外泌体在动脉粥样硬化中的作用 |
| 1.3.5 外泌体在感染性疾病中的作用 |
| 1.4 小结与假设 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 菌株、细胞株 |
| 2.1.2 主要试剂及耗材 |
| 2.1.2.1 细胞培养及细菌培养所需试剂 |
| 2.1.2.2 生化试剂及耗材 |
| 2.1.2.3 实验试剂盒 |
| 2.1.2.4 实验抗体 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 溶液配制 |
| 2.1.4.1 细胞培养基配制 |
| 2.1.4.2 细菌培养基配制 |
| 2.1.4.3 冻存液配制 |
| 2.1.4.4 免疫荧光组化相关溶液配制 |
| 2.1.4.5 Western blot相关溶液配制 |
| 2.1.5 实验动物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细菌、细胞培养 |
| 2.2.1.1 细菌培养 |
| 2.2.1.2 细胞培养 |
| 2.2.2 动物模型建立与分组 |
| 2.2.2.1 幽门螺杆菌感染动物模型的建立 |
| 2.2.2.2 动脉粥样硬化动物模型的建立 |
| 2.2.2.3 实验动物分组 |
| 2.2.3 小鼠体重、血样采集及血脂检测 |
| 2.2.4 组织病理学实验 |
| 2.2.4.1 组织取材步骤 |
| 2.2.4.2 大体血管组织的制备 |
| 2.2.4.3 主动脉弓冰冻切片的制备 |
| 2.2.4.4 HE染色 |
| 2.2.4.5 油红O染色 |
| 2.2.4.6 天狼猩红染色 |
| 2.2.4.7 免疫荧光组织化学染色 |
| 2.2.4.8 组织病理学测量 |
| 2.2.5 血管组织及细胞的总蛋白提取 |
| 2.2.6 血管组织及细胞的总RNA提取 |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹法检测 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR检测 |
| 2.2.9 巨噬细胞脂质摄取与胆固醇流出实验 |
| 2.2.10 外泌体的提取与鉴定 |
| 2.2.10.1 超速离心法 |
| 2.2.10.2 透射电镜鉴定 |
| 2.2.10.3 纳米粒子追踪分析 |
| 2.2.10.4 外泌体的浓度与蛋白分子标志物检测 |
| 2.2.11 外泌体示踪 |
| 2.2.11.1 外泌体荧光染料标记 |
| 2.2.11.2 体外细胞摄取荧光标记外泌体实验 |
| 2.2.11.3 体内示踪荧光标记外泌体 |
| 2.2.12 数据分析与统计 |
| 第三章 实验结果分析与讨论 |
| 3.1 H.pylori感染对WT小鼠和ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变的影响 |
| 3.1.1 H.pylori感染胃内定植鉴定 |
| 3.1.2 H.pylori感染不能直接诱发NCD饮食喂养的WT小鼠的斑块形成 |
| 3.1.3 H.pylori感染促进HFCD饮食喂养的WT小鼠早期斑块形成 |
| 3.1.4 H.pylori感染促进Apo E-/-小鼠斑块增长 |
| 3.1.5 H.pylori感染增加Apo E-/-小鼠斑块的脂质含量 |
| 3.1.6 H.pylori感染加剧Apo E-/-小鼠斑块的易损性 |
| 3.1.7 H.pylori感染不改变Apo E-/-小鼠体重和血清脂质 |
| 3.1.8 H.pylori感染诱发WT小鼠斑块内巨噬细胞源泡沫细胞形成 |
| 3.1.9 H.pylori感染促进Apo E-/-小鼠斑块内巨噬细胞源泡沫形成 |
| 3.1.10 小结与讨论 |
| 3.2 H.pylori感染胃上皮细胞来源的外泌体促进巨噬细胞源泡沫细胞形成 |
| 3.2.1 GES-EVs和 Hp-GES-EVs的鉴定 |
| 3.2.2 巨噬细胞可摄取Hp-GES-EVs |
| 3.2.3 .Hp-GES-EVs促进巨噬细胞泡沫化形成 |
| 3.2.4 Hp-GES-EVs可被摄取进入Apo E-/-小鼠主动脉斑块的脂质核心区域 |
| 3.2.5 Hp-GES-EVs促进Apo E-/-小鼠斑块增长 |
| 3.2.6 Hp-GES-EVs增加Apo E-/-小鼠斑块的脂质含量 |
| 3.2.7 Hp-GES-EVs促进Apo E-/-小鼠斑块内巨噬细胞源泡沫细胞形成 |
| 3.2.8 小结与讨论 |
| 3.3 外泌体蛋白CagA介导Hp-GES-EVs促巨噬细胞泡沫化作用 |
| 3.3.1 Hp-GES-EVs携带Hp毒力蛋白CagA |
| 3.3.2 rCagA促进巨噬细胞源泡沫细胞形成 |
| 3.3.3 rCagA降低巨噬细胞的胆固醇流出率 |
| 3.3.4 rCagA下调胆固醇流出受体ABCA1/ABCG1/SR-BI的表达 |
| 3.3.5 rCagA促进Apo E-/-小鼠斑块增长 |
| 3.3.6 rCagA增加Apo E-/-小鼠斑块的脂质含量 |
| 3.3.7 rCagA促进Apo E-/-小鼠斑块内巨噬细胞源泡沫细胞形成 |
| 3.3.8 rCagA下调血管斑块组织内胆固醇流出受体的表达 |
| 3.3.9 rCagA加剧Apo E-/-小鼠斑块的易损性 |
| 3.3.10 rCagA下调转录因子PPARγ/LXRα |
| 3.3.11 小结与讨论 |
| 全文总结 |
| 主要创新点 |
| 参考文献 |
| 附录1 作者简历 |
| 附录2 攻读硕士期间发表论文 |
| 致谢 |
（5）巨细胞病毒感染及内皮抑素水平与缺血性脑卒中不良预后的关系（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 巨细胞病毒感染与缺血性脑卒中短期不良预后的关系 |
| 研究对象与方法 |
| 一、研究对象 |
| 二、基线资料收集 |
| 三、随访调查 |
| 四、质量控制 |
| 五、统计分析 |
| 结果 |
| 一、不同血清HCMV-IgM水平的缺血性脑卒中患者基线特征 |
| 二、血清HCMV-IgM水平与缺血性脑卒中短期不良预后的关系 |
| 三、血清HCMV-IgM对缺血性脑卒中短期不良预后的预测作用 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 ES与缺血性脑卒中长期不良预后的关系 |
| 研究对象与方法 |
| 一、研究对象 |
| 二、技术路线 |
| 三、基线资料收集 |
| 四、血浆ES的检测 |
| 五、随访和研究结局 |
| 六、统计分析 |
| 结果 |
| 一、不同血浆ES水平的缺血性脑卒中患者基线特征 |
| 二、血浆ES水平与缺血性脑卒中长期不良预后的关系 |
| 三、血浆ES水平对缺血性脑卒中长期不良预后的预测作用 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论文 |
| 中英文缩略词语对照表 |
| 致谢 |
（6）巨细胞病毒感染及IL-6、IL-8与急性冠脉综合征相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 一、研究对象 |
| (一)入选标准 |
| (二)排除标准 |
| 二、研究方法 |
| (一)一般资料收集 |
| (二)标本收集 |
| (三)诊断标准 |
| (四)主要仪器设备及方法 |
| 三、统计方法 |
| 结果 |
| 一、各组一般临床资料的比较 |
| 二、ACS组与对照组HCMV-IgG阳性率、HCMV-IgM阳性率的比较 |
| 三、各组间HCMV-IgG滴度水平的比较 |
| 四、各组间血清IL-6、IL-8水平比较 |
| 五、急性冠脉综合征组HCMV-IgG阳性组与阴性组IL-6、IL-8及血脂水平比较 |
| 六、急性冠脉综合征发生的多因素分析 |
| 七、急性冠脉综合征组HCMV-IgG滴度、IL-6、IL-8与Gensini评分的相关性分析 |
| 八、巨细胞病毒IgG滴度、IL-6、IL-8的ROC曲线下面积分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）乙肝病毒感染对冠心病患者支架植入术后双联抗血小板疗效的影响（论文提纲范文）
| 缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（8）人巨细胞病毒感染与原发性高血压的关系研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章 |
| 致谢 |
| 附件 |
（9）人巨细胞病毒与2型糖尿病的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 人巨细胞病毒的简要概况 |
| 1.2 2型糖尿病的简要概况 |
| 1.3 人巨细胞病毒导致糖尿病的可能机制 |
| 1.4 人巨细胞病毒感染与2型糖尿病的研究现状 |
| 1.5 立题依据与研究目的 |
| 第二章 人巨细胞病毒与2型糖尿病的相关性研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论与结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 攻读学位期间的成果 |
| 致谢 |
（10）人巨细胞病毒感染与颈动脉粥样硬化的相关性分析（论文提纲范文）
| 1资料与方法 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
四、动脉粥样硬化程度与巨细胞病毒感染的关系（论文参考文献）
- [1]外周血中HCMV-MIR-UL112-3p水平与颈动脉IMT增加的相关性及HCMV引起脐静脉内皮细胞内皮-间质转化的分子机制[D]. 陈刚. 安徽医科大学, 2020(04)
- [2]基于医疗大数据对运气交接节气的探索[D]. 加倩. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]瑞舒伐他汀联合普罗布考对冠心病合并糖尿病患者颈动脉斑块的影响[D]. 李翔. 新乡医学院, 2020(12)
- [4]幽门螺杆菌感染胃上皮细胞来源的外泌体蛋白CagA促进巨噬细胞源性泡沫细胞形成和动脉粥样硬化进展的作用及机制研究[D]. 杨帅. 华中科技大学, 2019(03)
- [5]巨细胞病毒感染及内皮抑素水平与缺血性脑卒中不良预后的关系[D]. 张陈欢. 苏州大学, 2019(04)
- [6]巨细胞病毒感染及IL-6、IL-8与急性冠脉综合征相关性研究[D]. 马晓旭. 大连医科大学, 2019(04)
- [7]乙肝病毒感染对冠心病患者支架植入术后双联抗血小板疗效的影响[D]. 王飞. 南京医科大学, 2017(05)
- [8]人巨细胞病毒感染与原发性高血压的关系研究[D]. 苏怀勇. 山东大学, 2016(02)
- [9]人巨细胞病毒与2型糖尿病的相关性研究[D]. 张君. 南方医科大学, 2016(02)
- [10]人巨细胞病毒感染与颈动脉粥样硬化的相关性分析[J]. 周晓蕾,刘俭雄,黄静. 中国热带医学, 2015(03)