一、威灵仙提取方法与抗疟作用研究（论文文献综述）
鞠成国,张强,唐婷婷,王巍[1]（2021）在《不同来源威灵仙抗炎镇痛谱效关系研究》文中提出目的研究不同来源威灵仙抗炎镇痛谱效关系。方法采用小鼠耳肿胀及扭体实验比较不同来源威灵仙抗炎镇痛效果。采用HPLC法建立不同来源威灵仙色谱指纹图谱,以偏最小二乘回归分析法研究谱效相关性。结果 11批样品的特征指纹图谱中有38个特征峰,其中23个为共有峰,与抗炎作用呈较大正相关的有P22>P29>P31,呈较大负相关的有P20>P36>P16>P14>P2>P33>P30;与镇痛作用呈较大正相关的有P36>P32>P13>P17>P16,呈较大负相关的有P26>P4>P1>P22>P2>P30。结论威灵仙抗炎与镇痛的物质基础不同。
金春美[2]（2021）在《五种天然活性成分抗弓形虫作用的研究》文中研究指明目的:探讨五种天然活性成分:双氢青蒿素、常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元的抗弓形虫活性,同时评价几个系列衍生物的抗弓形虫效果。研究方法:首先,根据本实验室构建的抗弓形虫感染药物筛选模型,利用噻唑蓝比色法（MTT）评价受试化合物对宿主细胞的保护作用并检测其抗弓形虫作用选择性;接下来,通过构建弓形虫急性感染小鼠模型,选择活性较优的化合物后,将小鼠随机分为正常组、感染模型组、阳性对照药组（螺旋霉素1组和螺旋霉素2组）、天然化合物组和天然化合物衍生物组。在小鼠腹腔内注射2×103个RH株速殖子,感染4h后给予药物治疗,每日灌胃给药一次,在RH株速殖子感染小鼠4天后,采集小鼠腹水,计算小鼠腹腔内速殖子数目,以检测受试化合物抑制小鼠腹腔内速殖子的增殖情况。同时通过测定一系列指标:体重增长、肝指数、脾指数以及利用赖氏测定法测定眼球血血清中谷氨酸-丙酮酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸氨基转氨酶（AST）的水平,分析这些化合物在治疗RH株速殖子感染的同时对肝脏脾脏的损伤;通过酶循环法测定小鼠肝脏中谷胱甘肽（GSH）的水平,通过硫代巴比妥酸法测定小鼠肝脏中丙二醛（MDA）的水平,检测化合物是否由氧化应激的原因导致肝脏的损伤。结果:抗弓形虫感染药物筛选模型结果显示:具有抗疟作用的双氢青蒿素体外选择性高于对照药物螺旋霉素,对宿主细胞具有一定的保护作用;具有抗菌作用的天然产物常春藤皂苷元、松萝酸和牛蒡子苷元的体外选择性高于对照药物螺旋霉素,熊果酸的体外选择性与螺旋霉素基本相当,这四个抗菌天然产物对宿主细胞具有一定的保护作用,尤其是常春藤皂苷元,相比于螺旋霉素毒性降低了约3.3倍。弓形虫急性感染小鼠模型实显示:抗疟化合物双氢青蒿素的体内抗弓形虫作用与同剂量下的螺旋霉素相当;抗菌类天然产物常春藤皂苷元、熊果酸和松萝酸的体内抗弓形虫作用与同等剂量下的螺旋霉素相当,而牛蒡子苷元的体内抗弓形虫作用效果优于同等剂量下的螺旋霉素。小鼠的肝脏、脾脏和生长发育指标显示:对照组螺旋霉素能有效抑制弓形虫感染后的氧化应激反应,但是却造成了一定程度的肝脏损伤、脾脏肿大及体重的明显降低。具有抗疟作用的化合物双氢青蒿素显着降低了感染弓形虫后的血清转氨酶水平,并明显增加了GSH含量。双氢青蒿素降低肝脏损伤的效果优于螺旋霉素,对小鼠的体重增长具有一定的抑制作用,但优于螺旋霉素,同时抑制脾肿大的作用与螺旋霉素相当。具有抗菌作用的天然产物常春藤皂苷元具有十分显着的抑制肝脏损伤及降低肝脏氧化应激的作用,同时对小鼠体重有明显的抑制作用。熊果酸可明显增加感染后小鼠GSH水平,同时对ALT水平无明显影响,但可显着降低感染后的AST水平。松萝酸显着增加了感染后小鼠的ALT水平,并且松萝酸治疗后的小鼠相比于感染模型组在抗氧化水平提高的同时出现了脾脏缩小的现象。相比于感染模型组,牛蒡子苷元可减弱肝脏的肿大,但是显着增加了血清中ALT含量,经牛蒡子苷元治疗后小鼠肝脏中GSH水平显着降低,MDA含量相比于感染模型显着降低但仍显着高于正常组值。衍生物J2、J4、J6,J12和J15显示出比其先导化合物更有效的体外抗弓形虫作用,并且对宿主细胞的毒性较低,体内抗弓形虫作用与同剂量下的螺旋霉素相当。衍生物J2在降低肝脏损伤的效果上同其先导化合物双氢青蒿素基本一致。衍生物J2其降低氧化应激的水平优于双氢青蒿素。衍生物J4降低AST的效果以及对体重的影响同先导化合物松萝酸一致,但在ALT和MDA水平上的效果强于松萝酸,同时可使脾脏由缩小发展为脾脏肿大。相比于先导物熊果酸,衍生物J6和J12小鼠体重增量出现了更明显的降低现象,并且衍生物J12明显降低了ALT。衍生物J15同牛蒡子苷元的抗弓形虫效果基本一致结论:本研究提示,所选五种天然活性成分双氢青蒿素、常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元在体内外具有低毒、高效的抗弓形虫活性;相比于现有药物螺旋霉素,天然活性成分常春藤皂苷元对弓形虫感染引起的肝损伤均起到了很好的保护作用和较低的毒副作用,有进一步发展成为抗弓形虫先导物的潜力。衍生物J2、J4、J6、J12和J15的体内外抑制弓形虫作用同先导物基本相当;相比于螺旋霉素,只有在熊果酸中接入4-硝基苯基-1,2,4-三唑结构后的衍生物对弓形虫感染引起的肝损伤起到了更好的保护作用。
许晨新[3]（2020）在《威灵仙水溶性成分及其体外透皮行为研究》文中研究说明威灵仙为毛茛科铁线莲属植物威灵仙（Clematis chinensis Osbeck.）、棉团铁线莲（Clematis hexapctala Pall.）或东北铁线莲（Clematis manshurica Rupr.）的干燥根及根茎,临床用于治疗风湿痹痛,肢体麻木,筋脉拘挛,屈伸不利。已有关于威灵仙化学成分及其活性作用的研究报道甚多,但其有效成分仍未明确。深入研究阐释其药效物质基础对于威灵仙的科学开发与质量控制有着重要意义。本文根据威灵仙临床水煎剂外敷给药的用法,开展威灵仙水溶性成分的化学物质基础研究;在此基础上采用体外透皮模型研究其水溶性成分的体外透皮行为,初步筛选其活性成分,为进一步研究揭示威灵仙药效物质提供科学依据。本论文首先开展了威灵仙药材的HPLC指纹图谱研究。在前期研究基础上,优化建立了水回流提取最佳工艺和HPLC分析方法,基于15批不同产地、基原和市场来源的药材,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》建立其对照指纹图谱,共标示16个指纹峰。研究结果表明,不同产地、基原和市场来源威灵仙水提物的整体化学成分组成相似。构建的威灵仙HPLC指纹图谱特征性明显,可用于混伪品的区分。在此基础上研究阐释指纹图谱的物质基础。运用UPLC-Q-TOF和HPLC方法对指纹图谱的化学组成进行定性定量分析。结合文献数据及标准品比对共鉴定出指纹图谱中的8个标示谱峰共计12个成分,包括8个酚酸类化合物和4个三萜皂苷。其中,3个异绿原酸化合物为首次在威灵仙中报道;建立了同时测定8种酚酸类化合物的HPLC分析方法,并进行了方法学验证。咖啡酸和化合物HX是所有批次药材的共有成分。药店来源药材的总酚酸含量明显低于药材市场来源药材。最后,本论文基于体外透皮特性开展了威灵仙活性成分的筛选研究。采用HPLC指纹图谱分析方法考察威灵仙水提物的体外透皮行为,通过优化模型参数和试验条件,发现主要透皮成分为化合物HX。在此基础上,考察了浓度及p H值对化合物HX透皮行为的影响。结果表明采用脱脂小鼠腹部皮肤,以10%乙醇-生理盐水为接受液,透皮时间8 h后,威灵仙水提物的主要透皮成分为化合物HX,其透皮量与浓度呈正相关,与p H值呈负相关。本论文研究结果对于深入研究揭示威灵仙的药效物质基础提供了可靠的科学资料,具有一定的科学价值。
公程程[4]（2017）在《甘川铁线莲（Clematis akebioides）化学成分的研究》文中研究表明甘川铁线莲（Clematis akebioides）为毛茛科（Ranunculaceae）铁线莲属（Clematis）植物,广泛分布于热带和亚热带地区,在我国主要分布于西藏、云南、青海、四川和甘肃等地。甘川铁线莲作为常用的民族药物,有着广泛的应用历史,《藏本草》记载,甘川铁线莲地上部分可治“培根”病,对慢性胃病、腹部痞块、肠痈、炭疽、疮疡久溃不敛等具有良好的功效。为了更好地研究甘川铁线莲的化学成分分布及其药物活性物质基础,本研究采用柱色谱分离法结合高速逆流色谱法研究了甘川铁线莲乙醇提取物的化学成分。采用硅胶、SephadexLH-20、MCI等分离材料,从甘川铁线莲的乙醇提取物中共分离得到了 19个化合物,根据其理化性质,结合现代波谱技术,鉴定了这19个化合物的结构,分别为β-谷甾醇（G1）、173-ethoxyphaeophytin b（G2）、槲皮素（G3）、咖啡酸（G4）、山奈酚（G5）、labd-13-ene-8α,15-diol（G6）、Enodicytol（G7）、7,3’,4’-三羟基异黄酮（G8）、异阿魏酸（G9）、7,4’-二羟基黄酮（G10）、4,4’-二羟基-α-古柯间二酸（G11）、琥珀酸（G12）、异东莨菪素（G13）、东莨菪素（G14）、滨蒿内酯（G15）、β-胡萝卜苷（G16）、Ent-16β,17-dihydroxy-kauran-19-oic acid（G17）、芦丁（G18）和5-轻甲基-2-呋喃甲醛（G19）。本研究同时采用高速逆流色谱（HSCCC）法对常规柱色谱难以分离的提取物开展了化学成分的分离研究。通过溶剂系统、流动相流速和主机转速等条件的优化,从甘川铁线莲乙酸乙酯萃取相EC-2和EC-4馏分部中分离制备了 9个化合物,除常规方法已分离得到的两个化合物外,另分离得到了7个结构类似、极性相近的化合物。根据其理化性质,结合NMR、MS等手段,鉴定为原儿茶酸（G20）、原儿茶醛（G21）、3,4-二羟基苯乙酮（G22）、对羟基苯甲酸（G23）、香草酸（G24）、反式对香豆酸（G25）和阿魏酸（G26）。应用柱色谱及HSCCC法,从甘川铁线莲醇提物中共分离得到26个单体化合物,所分离的化学成分隶属于萜类、黄酮类、留体类、有机酸类、香豆素类等类型,其中24个化合物（除G1和G16外）为首次从甘川铁线莲中分离得到,化合物G2、G6、G11、G17首次从铁线莲属中分离得到。研究结果丰富了天然药物化学研究范畴,为甘川铁线莲药物深入研究开发奠定了理论基础;HSCCC的应用,为天然产物有效成分的分离提供了一种快速、经济、有效的方法。
张倩[5]（2016）在《大叶铁线莲全草中的化学成分研究》文中指出毛茛科铁线莲属植物应用广泛,主要用于祛风除湿、解毒消肿。药理研究表明本属植物具有抗炎、抗肿瘤的作用。本属植物大叶铁线莲主要分布于我国的陕西、江苏、山东、河北、湖南、湖北等地区,常见于山坡沟谷、林边及路旁的灌丛中资源丰富。迄今为止,其化学成分未见报道。本课题首次对大叶铁线莲的全草进行化学成分及初步药理活性的研究,以期获得结构新颖且活性好的化合物,为大叶铁线莲的应用及研究提供理论基础和依据。本课题采用75%的乙醇提取,利用正反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等分离方法从全草中得到单体化合物,根据其理化性质和波谱技术鉴定化学结构；采用碱水解并分离获得次生产物（次级苷）。共鉴定了27个单体化合物,其中,从正丁醇层萃取部位分离并鉴定了22个化合物,分别为：木栓酮（1）,表木栓醇（2）,β-谷甾醇（3）,金丝桃苷（4）,异荭草素（5）,刺楸皂苷G（6）,红毛七皂苷D（7）,yemuoside YM32 （8）,huzhangoside B （9）,clematiganoside A （10）,huzhangoside C （11）,flaccidoside Ⅱ （12）,3-O-a-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-a-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（13）,刺楸皂苷B（14）, clemargenoside B （15）,刺五加苷A1（16）,3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）,3-O-β-D-吡喃木糖-（1→3）-a-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（18）,3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-βD-吡喃葡萄糖-齐墩果-18-烯-28-酸-O-fβ-D-吡喃葡萄糖-（1-→6）-βD-吡喃葡萄糖苷（19）,3β-O-α-L-.吡喃阿拉伯糖-齐墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（20）,3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→3）-a-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果-18-烯-28-酸-O-a-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（21）和3β,23-二羟基-齐墩果-18-烯-28-酸-O-a-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β--D-吡喃葡萄糖苷（22）。把化合物7、9、19、20和21经过碱水解得到的产物分别是：3-O-a-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤苷（7a）,saponin CP4 （9a）,3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-黄莲木酸苷（19a）,3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-黄莲木酸苷（20a）和3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→4）-a-L-吡喃阿拉伯糖-黄莲木酸苷（21a）。所有化合物均从该植物中首次得到,其中皂苷19～22是新化合物,分别命名为大叶铁线莲皂苷A（19）、大叶铁线莲皂苷B（20）、大叶铁线莲皂苷C（21）和大叶铁线莲皂苷D（22）,化合物19a、20a和21a是新的人工产物,化合物8是从本属植物中首次得到。将9个原生皂苷和5个经碱水解获得的次级皂苷用MTT法进行抗肿瘤活性的筛选,采用阿霉素为阳性对照,发现5个28位羧基游离的单糖链次级苷7a、9a、19a、20a和21a对乳腺癌MDA-MB-231细胞有不同程度的细胞毒性,其中9a的细胞毒性最为显着,且9a对胃癌SGC-7901细胞的毒性也很突出,同时还发现次级苷7a、9a、19a、20a和21a对MDA-MB-231细胞的毒性强于SGC-7901细胞,而9个双糖链原生苷和1个3位羟基游离的单糖链皂苷均无活性。结果表明：齐墩果烷型三萜皂苷具有肿瘤细胞毒性的必要条件之一是28位羧基游离的单糖链结构。这进一步验证了文献中对该类型皂苷构效关系的报道。研究提示：对于主要含双糖链三萜皂苷的中草药提取物,通过简单的碱水解方式制备具有抗肿瘤作用的制剂可能会是一条可行的途径。课题创新性及研究意义：1.首次对大叶铁线莲全草的化学成分进行了比较系统的研究,鉴定了27个单体化合物,其中齐墩果烷型皂苷22个（包括5个次级苷）、木栓烷型三萜2个、黄酮苷2个、植物甾醇1个,初步对其化学成分有了认识。2.化学新颖性：发现了4个新化合物,它们苷元的双键位于18（19）位,在本属植物中比较罕见,且其中一个化合物（21）的3位糖链连接顺序在该属植物皂苷中首次发现；另有1种化合物从该属植物中首次获得：所有化合物均从该植物中首次分离得到。另外,通过对部分化合物的碱水解得到5个次级皂苷,其中3个为新的人工产物。3.对部分单体化合物进行肿瘤细胞毒活性筛选,初步讨论了受试样品的构效关系,并提出将以双糖链三萜皂苷为主要成分的样品通过碱水解方式开发为抗癌新药的思路。4.本课题为合理利用大叶铁线莲的药用资源提供了科学依据,为进一步研究其活性物质积累了实验材料,为扩大药源提供了新的资料,同时也为开发抗肿瘤新药提供了有价值的先导化合物。
梁文,王敏,张文凯,周桃玉[6]（2015）在《威灵仙提取液的Q235钢缓蚀性能》文中研究说明实验研究了威灵仙提取液的制备及其对模拟工业循环冷却水中Q235钢的缓蚀性能。紫外吸收光谱、电化学极化曲线、阻抗谱以及腐蚀失重等实验结果表明,综合考虑溶出率与缓蚀率,80℃水溶提取效果好于醇、酸助提;提取液投加量为7.52×10-3 g/m L时对Q235钢的缓蚀率达92.1%、腐蚀速率降至0.043 0 mm/a;缓蚀类型属于阳极型腐蚀抑制。
徐亚[7]（2015）在《中药6类新药复方灵仙止咳口服液的制剂工艺及质量标准研究》文中研究表明目的:复方灵仙止咳口服液为来源于临床的有效方剂,本课题在长期临床实践的基础上,拟对该有效方剂按照国家食品药品监督管理局颁发的《中药、天然药物注册分类及申报资料要求》进行中药复方6类新药的开发。方法:以君药威灵仙的有效成分常春藤皂苷元和齐墩果酸含量、出膏率、转移率等为指标,采用正交试验优选复方灵仙止咳方威灵仙提取与精制工艺;采用多因素、多指标控制法优选口服液的成型工艺;采用加速试验和室温留样观察相结合的方法,进行复方灵仙止咳口服液的稳定性观察。按照实验室生产参数进行了三批中试放量生产。为控制复方灵仙口服液的产品质量,对其质量标准草案进行研究,采用薄层色谱法对方中各药的有效成分分别进行了鉴别,并采用高效液相色谱法测定了成品中2个有效成分的含量,除此之外,还对本品的最低装量、重金属、砷盐和微生物限度做了考察。结果:复方灵仙止咳口服液最优制备工艺为:威灵仙、薄荷、石菖蒲及郁金药材,加入药材总量12倍水,以水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时,收集挥发油,加入吐温-80增溶,备用。母液过滤,滤渣加入10倍水煎煮3次,每次2小时,合并煎煮液与提油母液,3500r/min离心20min除去沉淀,将上清液浓缩至密度为1.05g/cm3;加入95%乙醇使含醇量达65%,冷藏静置后取出,滤过,滤液减压回收乙醇至无醇味;将增溶后的挥发油、单糖浆、甜菊糖和苯甲酸钠与药液混合均匀,并定容至药液浓度为1g·mL-1。而通过三批中试生产,确定实验室建立的生产参数基本稳定,适于大生产。实验表明,质量标准草案建立中所采用的薄层色谱鉴别方法,斑点显色清晰,阴性药液均无干扰;采用高效液相色谱法测定了成品中4个有效成分的含量,阴性药液均无干扰,线性关系考察表明:常春藤皂苷元以对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,回归方程为y=6077.8x-573.93。常春藤皂苷元的线性范围在22.16554.00μg·mL-1（r=1）之间,平均回收率为101.99%（RSD2.28%）。齐墩果酸以对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,回归方程为y=5785.6x+617.74。齐墩果酸的线性范围在16.24406.00μg·mL-1（r=1）之间,平均回收率为96.42%（RSD1.31%）。结论:本论文主要进行了以下几个方面的复方灵仙口服液的新药开发工作:首先是采用《中国药典》2010版方法,对处方中各药味的质量进行了全面检测;第二是设计了处方中各个药物的提取工艺路线,通过工艺评价、化学评价及药效评价相结合,初步筛选出提取适宜路线;第三,以多个有效成分的含量为评价指标,优化了复方灵仙口服液的制备方法,包括对处方工艺进行了单因素考察优化,及正交实验最终确定了复方灵仙口服液的提取工艺、精制工艺和成型工艺;第四,对复方灵仙口服液的质量标准草案进行了研究,主要包括性状鉴别,薄层鉴别,最低装量检查,微生物,砷盐及重金属检查和含量测定。结果表明,所研究的制备工艺及质量评价方法稳定,可行。
刘艳红,周小平,刘荣华[8]（2013）在《东北铁线莲药理作用研究进展》文中认为本文综述了近年来对东北铁线莲药理作用方面的研究进展,为今后东北铁线莲的研究开发提供参考。
李璐[9]（2013）在《Mincle基因克隆表达及威灵仙质量分析》文中研究指明1目的Mincle是巨噬细胞表达感知组织损伤引发炎症的受体,研究该蛋白有助于寻找治疗自体免疫性疾病的新途径。威灵仙为为毛茛科铁线莲属植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck.、棉团铁线莲C. hexapetala Pall.和东北铁线莲C. mandshurica Rupr.的干燥根及根茎,具有祛风除湿、通络止痛的功效,为治风湿痹痛之要药,现代药理表明其具有显着抗炎活性。本研究拟对威灵仙进行质量检查、定性和定量分析,为有效控制威灵仙质量提供依据；并利用现代基因工程技术对Mincle基因进行克隆,通过大肠杆菌进行诱导表达蛋白,为考察威灵仙与Mincle蛋白的相互作用,从中药中寻找和筛选抗炎药物提供理论与实践基础。2方法2.1威灵仙质量分析参照《中国药典》2010年版,对威灵仙药材进行定性和定量分析。采用薄层鉴别对威灵仙酸水解成分进行鉴别；采用RP-HPLC法测定齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量；并采用HPLC法建立威灵仙药材的指纹图谱。2.2利用基因工程技术原核表达Mincle蛋白克隆目的基因：提取经LPS活化的小鼠巨噬细胞的总RNA并反转录,根据GenBank公布的Mincle mRNA序列,设计特异性PCR引物进行PCR扩增,得到Mincle-1和Mincle-2目的基因。构建克隆质粒：PCR产物经回收纯化后连接pMD18-T,转化E.coli DH5a感受态细胞,通过氨苄青霉素抗性筛选阳性重组子,并通过酶切鉴定、序列比对等方法验证。构建原核表达质粒：用相应引物对携带Mincle-2的克隆质粒进行PCR扩增并进行双酶切处理,回收纯化后连接原核表达载体pET-14b和pET-16b,转化E.coli DH5a感受态细胞,通过氨苄青霉素抗性筛选阳性重组子,并通过酶切鉴定、序列比对等方法验证。表达与纯化融合蛋白：将携带Mincle-2的原核表达质粒转化E.coli BL21,通过氨苄青霉素抗性筛选以及酶切验证获得阳性菌落；接种单菌落,用IPTG诱导表达,纯化融合蛋白后,利用SDS-PAGE对融合蛋白进行分析鉴定。3结果3.1威灵仙质量分析建立了薄层鉴别的方法,薄层色谱斑点清晰、分离度好。建立了齐墩果酸、常春藤皂苷元的含量测定方法,来自两广的粉灵仙常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量均大于0.30%,达到《中国药典》2010年版规定的限度,10批威灵仙的常春藤皂苷元含量在0.008%-0.193%之间,均不符合《中国药典》2010年版规定0.3%的限度。分别构建了来自两广的粉灵仙药材和威灵仙的指纹图谱,其中粉灵仙HPLC指纹图谱标定了13个共有峰,各批次样品平均相似度大于0.817；粉灵仙指纹图谱与威灵仙图谱进行了对比,两者之间相似度较低。3.2Mincle蛋白表达目的基因扩增：PCR产物大小与预期一致,可初步判断目的基因Mincle-1、 Mincle-2扩增成功。构建克隆质粒：单、双酶切,琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明,成功构建了携带Mincle-1和Mincle-2的克隆质粒pMDl8T-Mincle-1、pMD18T-Mincle-2。构建原核表达质粒：酶切验证和序列比对结果表明,成功构建了携带Mincle-1和Mincle-2的原核表达质粒pET14b-Mincle-2、pET16b-Mincle-2,相应的N-末端含His6标签融合蛋白的理论分子量为22kDa。表达与纯化融合蛋白：SDS-PAGE分析结果表明携带pET16b-Mincle-2和pET14b-Mincle-2的大肠杆菌E.coli BL21经IPTG诱导表达后,均有表达预期大小（22kDa）的融合蛋白,并以包涵体的形式存在。包涵体经变性后纯化得到的融合蛋白产物表观分子量为22kDa,与预期融合蛋白大小吻合。4结论4.1威灵仙质量分析建立威灵仙薄层鉴定、含量测定方法及指纹图谱方法,方法稳定可靠,可为威灵仙药材内在质量控制提供科学依据。薄层鉴定和含量测定结果提示来自两广地区的粉灵仙指标性成分含量较其他商品威灵仙高；粉灵仙及威灵仙的指纹图谱提示粉灵仙中大极性物质含量较高；为后续试验选取优良的药材提供理论基础。4.2Mincle蛋白表达成功克隆鼠源Mincle基因,构建克隆质粒和原核表达质粒,并进行诱导表达及蛋白纯化,得到的融合蛋白为包涵体,变性后纯化得到的融合蛋白产物大小与预期吻合,为Mincle蛋白与威灵仙主要成分相互作用研究打下坚实的基础。
孙晓博[10]（2011）在《单叶铁线莲总皂苷提取纯化工艺及抗类风湿关节炎的初步研究》文中认为一、目的建立单叶铁线莲总皂苷（Total saponins of Radix Clematidis Henryi, TsCH） TsCH的含量测定方法,研究适宜TsCH提取和纯化的工艺条件,考察TsCH的抗炎活性及作用机制,充分利用单叶铁线莲资源,开发以TsCH为主要成分治疗类风湿关节炎的中药新药。二、方法l.TsCH的含量测定选用齐墩果酸为对照品,采用比色法,以5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸为显色剂,在550nm处测定吸光度。以齐墩果酸的量（mg）为横坐标,以吸光度（A）为纵坐标,制作标准曲线,计算得回归方程,进行方法学考察。2.TsCH微波提取工艺以TsCH转移率为指标,将微波提取法与加热回流提取法及超声提取法进行比较；在单因素实验的基础上,运用正交实验设计,筛选最佳微波提取工艺。3.TsCH的纯化工艺采用静态吸附-解吸和动态吸附-洗脱考察相结合的方法,筛选5种不同性质的大孔树脂；根据筛选出来的树脂进行动态吸附洗脱参数的考察。4.TsCH对类风湿关节炎大鼠作用的考察雌性SD大鼠48只,随机分为5组：正常对照组,模型对照组,阳性对照（甲氨蝶呤,1 mg·kg-1·w-1）组,TsCH高、低剂量组（150、50mg·kg-1·d-1）。除正常对照组外,其余注射Ⅱ型胶原造模。灌胃给药,持续5周,观察动物一般情况及体重,测定足趾容积和厚度。5周后处死动物,腹主动脉采血测定血清中免疫球蛋白G （IgG）、白介素-1β（IL1-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量；取大鼠踝关节组织切片,检查关节组织病理学。三、结果l.TsCH的含量测定所得回归方程为Y=3.5913X+0.0077,相关系数R2=0.9994,线性范围0.036～0.216 mg。以此计算TsCH的含量。方法学实验结果显示,显色在120min内吸收值稳定,RSD为1.97%,精密度和重复性良好,RSD分别1.04%和3.11%；平均回收率为97.90%（n=9）, RSD为2.08%。2.TsCH微波提取工艺结果表明,以70%乙醇为提取溶剂,微波功率300W,料液比1：26,提取3次,每次提取6 min,TsCH的转移率可达95%左右。3.TsCH的纯化工艺根据静态吸附、洗脱实验初步确立了D-101型大孔树脂为分离TsCH的树脂,动态考察所得纯化工艺参数为：上样浓度为0.2 g生药·mL-1, pH值为5,以1 BV/h的流速上样,4 BV蒸馏水2 BV/h的流速洗脱杂质,4 BV 70%乙醇以2 BV/h的流速洗脱总皂苷。研究结果表明,未纯化前总固物中总皂苷的含量为29.95%,纯化后总固物中的TsCH含量为71.56%,精制度达238.92%,转移率达到86.03%。4.TsCH对类风湿关节炎大鼠作用的考察观察TsCH对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠的影响。结果发现,注射Ⅱ型胶原两次,21天后造模成功。与模型组相比,TsCH能明显降低关节炎指数评分,减小足趾容积,足趾厚度有降低趋势；能降低血清中IgG、IL1-β、TNF-α水平；关节组织病理学检查显示TsCH对减轻滑膜增生和炎细胞浸润表现出了较好的作用趋势；TsCH对RA大鼠的疗效具有剂量依赖性关系。四、结论1本文研究确定的TsCH的制备工艺方法效率高、选择性好,为TsCH的工业化生产提供了参考。2通过Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠模型动物实验表明TsCH对II型胶原诱导型关节炎大鼠能缓解症状和改善病变,对类风湿关节炎有防治作用。
二、威灵仙提取方法与抗疟作用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、威灵仙提取方法与抗疟作用研究（论文提纲范文）
（1）不同来源威灵仙抗炎镇痛谱效关系研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试药 |
| 1.2 动物 |
| 1.3 试剂 |
| 1.4 仪器 |
| 1.5 方法 |
| 1.5.1 威灵仙给药溶液及阳性药溶液制备 |
| 1.5.2 耳肿胀抗炎实验 |
| 1.5.3 冰醋酸扭体镇痛实验 |
| 1.5.4 HPLC指纹图谱建立 |
| (1)供试品溶液制备 |
| (2)色谱条件 |
| (3)方法学考察 |
| 1.5.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 抗炎镇痛作用结果 |
| 2.2 方法学考察结果 |
| 2.3 HPLC指纹图谱建立 |
| 2.4 谱效关系分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 提取条件及色谱条件的选择 |
| 3.2 抗炎镇痛作用谱效关系分析 |
| 4 结论 |
（2）五种天然活性成分抗弓形虫作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写对照 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 弓形虫及弓形虫病研究进展 |
| 1.1.1 弓形虫及其感染途径 |
| 1.1.2 弓形虫病与器官损伤 |
| 1.1.3 弓形虫病的治疗药物 |
| 1.2 天然活性成分的选择 |
| 1.3 五种天然活性成分的药理作用研究进展 |
| 1.3.1 双氢青蒿素 |
| 1.3.2 常春藤皂苷元 |
| 1.3.3 熊果酸 |
| 1.3.4 松萝酸 |
| 1.3.5 牛蒡子苷元 |
| 1.4 衍生物的设计 |
| 1.5 研究思路与意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 细胞株 |
| 2.1.2 弓形虫株 |
| 2.1.3 药品与试剂 |
| 2.1.4 主要仪器及来源 |
| 2.1.5 主要试剂及其配置 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 RH株的体内传代 |
| 2.4 弓形虫悬液的制备 |
| 2.5 抗弓形虫作用选择性实验 |
| 2.5.1 检测原理 |
| 2.5.2 溶液的配置 |
| 2.5.3 HeLa细胞分组和检测方法 |
| 2.6 体内抗弓形虫活性实验 |
| 2.6.1 体内抗弓形虫活性实验分组 |
| 2.6.2 腹水中速殖子抑制率的检测 |
| 2.6.3 体指数及肝脾指数的检测 |
| 2.6.4 血清转氨酶的检测 |
| 2.6.5 肝脏中GSH和MDA的检测 |
| 2.7 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 抗弓形虫作用选择性 |
| 3.1.1 双氢青蒿素的抗弓形虫作用选择性 |
| 3.1.2 常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元的抗弓形虫作用选择性 |
| 3.1.3 衍生物的抗弓形虫作用选择性 |
| 3.2 腹腔内弓形虫速殖子抑制率 |
| 3.2.1 双氢青蒿素对小鼠腹腔内弓形虫速殖子的抑制率 |
| 3.2.2 常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元对小鼠腹腔内弓形虫速殖子的抑制率 |
| 3.2.3 衍生物对小鼠腹腔内弓形虫速殖子的抑制率 |
| 3.3 .体重增量及肝脾指数 |
| 3.3.1 双氢青蒿素的体重增量和肝脾指数结果 |
| 3.3.2 常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元的体重增量和肝脾指数结果 |
| 3.3.3 衍生物的体重增量和肝脾指数结果 |
| 3.4 .血清转氨酶含量 |
| 3.4.1 双氢青蒿素的血清转氨酶含量结果 |
| 3.4.2 常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元的血清转氨酶含量结果 |
| 3.4.3 衍生物的血清转氨酶含量结果 |
| 3.5 肝脏中GSH和 MDA含量 |
| 3.5.1 双氢青蒿素的GSH和MDA含量结果 |
| 3.5.2 常春藤皂苷元、熊果酸、松萝酸和牛蒡子苷元的GSH和MDA含量结果 |
| 3.5.3 衍生物的GSH和MDA含量结果 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
（3）威灵仙水溶性成分及其体外透皮行为研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 威灵仙概述 |
| 1.2 化学成分研究进展 |
| 1.2.1 皂苷类化合物 |
| 1.2.2 黄酮类化合物 |
| 1.2.3 挥发类成分 |
| 1.2.4 木脂素类化合物 |
| 1.2.5 其他类 |
| 1.3 药理作用研究 |
| 1.3.1 抗炎及镇痛作用 |
| 1.3.2 抗肿瘤作用 |
| 1.3.3 抑菌、抗菌作用 |
| 1.3.4 其他作用 |
| 1.4 威灵仙的中医临床应用 |
| 1.4.1 祛风除湿,通络止痛 |
| 1.4.2 解毒消肿 |
| 1.4.3 和胃除哽 |
| 1.4.4 利胆排石 |
| 1.5 透皮吸收研究现状 |
| 1.5.1 透皮试验方法研究 |
| 1.6 研究目标与内容 |
| 第2章 威灵仙指纹图谱研究 |
| 2.1 仪器、试剂与药材 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 药材与试剂 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.2.1 色谱条件 |
| 2.2.2 供试品溶液的制备 |
| 2.2.3 指纹图谱方法学考察 |
| 2.2.4 指纹图谱的建立与相似度评价、指纹峰的相关性分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 色谱条件的优化 |
| 2.3.2 提取工艺的优化 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 基于指纹图谱的物质基础研究 |
| 3.1 仪器与材料 |
| 3.1.1 试验试剂 |
| 3.1.2 试验仪器 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 色谱条件 |
| 3.2.2 质谱条件 |
| 3.2.3 威灵仙水提液的制备 |
| 3.2.4 对照品溶液的制备 |
| 3.2.5 方法学考察 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 成分鉴别 |
| 3.3.2 质谱裂解规律解析 |
| 3.3.3 方法学验证 |
| 3.3.4 样品含量测定 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 威灵仙体外透皮行为研究 |
| 4.1 试验器材、设备 |
| 4.1.1 试验试剂耗材 |
| 4.1.2 试验器材 |
| 4.1.3 试验设备 |
| 4.2 试验动物 |
| 4.3 方法与结果 |
| 4.3.1 威灵仙水提物的制备 |
| 4.3.2 HPLC分析方法 |
| 4.3.3 离体鼠皮的制备 |
| 4.3.4 体外透皮行为研究 |
| 4.3.5 化合物HX体外透皮行为研究 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附图一 负离子模式下威灵仙水提液中11个成分的二级质谱图 |
| 致谢 |
| 发表文章专利目录 |
（4）甘川铁线莲（Clematis akebioides）化学成分的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词一览 |
| 鉴别反应一览 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 铁线莲属植物概述 |
| 1.1.1 资源分布 |
| 1.1.2 植物学特征 |
| 1.2 铁线莲属植物化学成分研究 |
| 1.2.1 三萜类 |
| 1.2.2 有机酸类 |
| 1.2.3 黄酮类 |
| 1.2.4 木脂素类化合物 |
| 1.2.5 其他类化合物 |
| 1.3 铁线莲属植物相关药理活性的研究 |
| 1.3.1 抗菌作用 |
| 1.3.2 抗肿瘤作用 |
| 1.3.3 抗炎、镇痛作用 |
| 1.3.4 保肝作用 |
| 1.3.5 免疫抑制作用 |
| 1.3.6 其他作用 |
| 1.4 高速逆流色谱技术简介 |
| 第二章 甘川铁线莲化学成分的分离 |
| 2.1 材料仪器 |
| 2.1.1 药材 |
| 2.1.2 仪器与化学试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 化合物结构鉴定 |
| 2.4 化合物物理常数及光谱数据 |
| 第三章 高速逆流色谱在甘川铁线莲化学成分分离中的应用 |
| 3.1 材料仪器 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 仪器和试剂 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 高速逆流色谱分离制备 |
| 3.2.2 高效液相色谱分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 高速逆流色谱实验条件的优化 |
| 3.3.2 化合物的结构鉴定 |
| 3.4 化合物物理常数及光谱数据 |
| 第四章 结论 |
| 4.1 主要结论 |
| 4.2 硅胶柱色谱法与HSCCC分离法的比较 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 硕士学位期间主要科研成果 |
| 附录 (部分化合物图谱) |
（5）大叶铁线莲全草中的化学成分研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一章 大叶铁线莲全草中的化学成分研究 |
| 1 从大叶铁线莲中提取分离并鉴定的化合物 |
| 2 化合物的结构解析 |
| 第二章 实验部分 |
| 1 实验仪器与材料 |
| 2 提取分离 |
| 3 薄层酸水解 |
| 4 皂苷的碱水解 |
| 5 糖基衍生化和气相色谱分析 |
| 6 理化常数与波谱数据 |
| 第三章 抗肿瘤生物活性测试 |
| 1 实验的主要仪器、细胞株与材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果与讨论 |
| 小结 |
| 1 大叶铁线莲全草中的化学成分研究及抗肿瘤活性筛选 |
| 2 课题创新性及研究意义 |
| 3 实验中遇到的问题 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）威灵仙提取液的Q235钢缓蚀性能（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 仪器和试剂 |
| 1.2 提取液的制取 |
| 1.3 电化学实验 |
| 1.4 腐蚀失重实验 |
| 1.5 光谱测试 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 提取液制备的影响因素 |
| 2.2 缓蚀性能极化曲线参数 |
| 2.3 缓蚀性能失重试验 |
| 2.4 缓蚀性能阻抗谱 |
| 3 结论 |
（7）中药6类新药复方灵仙止咳口服液的制剂工艺及质量标准研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 引言 |
| 2 西医学对PIC的认识及治疗 |
| 3 中医学对PIC的认识及治疗 |
| 4 感冒后咳嗽治疗现状 |
| 5 灵仙处方组成 |
| 第一章 威灵仙不同基源品种的比较研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 第二章 复方灵仙止咳口服液药材的质量检测 |
| 1 仪器、材料与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 3 小结与讨论 |
| 第三章 复方灵仙止咳方提取工艺的初步筛选 |
| 1 仪器与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 3 复方灵仙口服液提取工艺初筛小结与讨论 |
| 第四章 复方灵仙止咳方的提取工艺优化 |
| 1 仪器、材料与试剂 |
| 2 复方灵仙止咳方提油工艺优化 |
| 3 正交实验优化复方灵仙止咳方口服液水提工艺 |
| 4 正交实验优化复方灵仙止咳方醇沉工艺 |
| 5 复方灵仙止咳口服液成型工艺的研究 |
| 6 复方灵仙止咳口服液中试生产 |
| 7 小结与讨论 |
| 第五章 复方灵仙止咳口服液的质量标准草案研究 |
| 1 仪器、材料与试剂 |
| 2 药品成品的质量标准草案 |
| 3 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 1 处方简介 |
| 2 处方组成药物研究概况 |
| 3 研究背景与意义 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（8）东北铁线莲药理作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 抗肿瘤作用 |
| 2 解痉与抗氧化作用 |
| 3 抗菌抑菌作用 |
| 4 抗炎镇痛作用 |
| 5 免疫抑制作用 |
| 6 抑制黑色素作用 |
| 7 利胆作用 |
| 8 其它作用 |
（9）Mincle基因克隆表达及威灵仙质量分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 威灵仙研究现状 |
| 1.2 中药抗炎机制研究现状 |
| 1.3 Mincle受体研究现状 |
| 1.4 小结 |
| 2 本研究工作的总体思路、主要研究方法和预期结果 |
| 第一章 威灵仙药材质量分析 |
| 1 水分测定 |
| 1.1 实验材料与设备 |
| 1.2 方法与结果 |
| 2 薄层鉴别 |
| 2.1 实验材料与设备 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 小结 |
| 3 含量测定 |
| 3.1 实验材料与设备 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 小结 |
| 4 指纹图谱 |
| 4.1 实验材料与设备 |
| 4.2 方法与结果 |
| 4.3 指纹图谱小结 |
| 第二章 Mincle受体基因克隆表达 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 小鼠巨噬细胞培养结果 |
| 2.2 巨噬细胞总RNA提取结果 |
| 2.3 Mincle基因的PCR扩增结果 |
| 2.4 重组质粒pMD18T-Mincle-1及pMD18T-Mincle-2的鉴定结果 |
| 2.5 构建重组质粒pET16b-Mincle-2结果 |
| 2.6 构建重组质粒pET14b-Mincle-2结果 |
| 2.7 Mincle-2基因在大肠杆菌中的诱导表达及包涵体的制备、纯化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 人源Mincle基因克隆失败 |
| 3.2 促融合蛋白可溶性表达 |
| 4 小结 |
| 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 1.1 威灵仙质量分析 |
| 1.2 Mincle蛋白表达 |
| 2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录Ⅰ相关试剂盒使用说明 |
| 附录Ⅰ-1：RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas)说明书 |
| 附录Ⅰ-2：DNA Fragment Purification Kit(Takara)DNA片段回收试剂盒说明书 |
| 附录Ⅰ-3：GeneJETTM Gel Extraction Kit(Fermentas)试剂盒说明书 |
| 附录Ⅰ-4 天根离心柱型质粒小提试剂盒使用说明 |
| 附录Ⅱ 测序及序列比对结果 |
| 附录Ⅱ-1：重组质粒pMD18T-Mincle-1测序峰图 |
| 附录Ⅱ-2：重组质粒pMD18T-Mincle-2测序峰图 |
| 附录Ⅱ-3：pMD18T-Mincle-1与Mincle基因序列比对结果(DNAMAN) |
| 附录Ⅱ-4: pMD18T-Mincle-2与Mincle基因序列比对结果(DNAMAN) |
| 在学期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（10）单叶铁线莲总皂苷提取纯化工艺及抗类风湿关节炎的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 目录 |
| 前言 |
| 第一章 单叶铁线莲总皂苷含量测定方法的建立 |
| 1 仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂与药品 |
| 2 方法 |
| 2.1 对照品溶液的配制 |
| 2.2 样品溶液的制备 |
| 2.3 检测波长的确定 |
| 2.4 标准曲线的制定 |
| 2.5 样品含量测定 |
| 2.6 方法学的考察 |
| 3 结果 |
| 3.1 检测波长的确定 |
| 3.2 标准曲线和回归方程的建立 |
| 3.3 方法学考察试验 |
| 3.4 TsCH含量测定方法的确定 |
| 4 讨论 |
| 第二章 单叶铁线莲总皂苷提取工艺的研究 |
| 1 仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂与药品 |
| 2 方法 |
| 2.1 原药材处理 |
| 2.2 对照品和与标准曲线的制备 |
| 2.3 样品液的制备和样品含量测定 |
| 2.4 微波提取工艺条件单因素考察 |
| 2.5 正交实验优选TsCH微波提取工艺参数 |
| 2.6 不同提取工艺的比较 |
| 3 结果 |
| 3.1 标准曲线 |
| 3.2 微波提取条件对 TsCH转移率的影响 |
| 3.3 正交实验优选 TsCH微波提取工艺参数 |
| 3.4 加热回流提取、超声提取、微波提取方法的比较 |
| 4 讨论 |
| 第三章 单叶铁线莲总皂苷纯化工艺的研究 |
| 1 仪器与试剂 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂与药品 |
| 2 方法 |
| 2.1 对照品溶液的制备和标准曲线的绘制 |
| 2.2 上样液的制备与含量测定 |
| 2.3 大孔吸附树脂的预处理 |
| 2.4 树脂的筛选 |
| 2.5 大孔吸附树脂对TsCH的动态吸附性能研究 |
| 2.6 工艺重复验证实验 |
| 2.7 树脂使用次数对纯化性能的影响 |
| 3 结果 |
| 3.1 标准曲线的制备 |
| 3.2 上样液里总皂苷的含量测定 |
| 3.3 不同大孔吸附树脂对TsCH静态吸附-解析性能的比较 |
| 3.4 泄露曲线 |
| 3.5 D101大孔吸附树脂对TsCH的动态吸附-洗脱研究 |
| 3.6 工艺重复性验证实验 |
| 3.7 树脂使用次数对纯化性能的影响 |
| 4 讨论 |
| 第四章 单叶铁线莲总皂苷对类风湿关节炎大鼠的治疗作用及机制的初步研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验用药物的制备 |
| 2.2 类风湿关节炎大鼠模型构建 |
| 2.3 实验动物分组与给药 |
| 2.4 观察指标与检测方法 |
| 2.5 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般情况及体重变化 |
| 3.2 关节炎指数观察结果 |
| 3.3 足趾容积测定结果 |
| 3.4 足趾厚度测定结果 |
| 3.5 血清IgG、血清细胞因子测定结果 |
| 3.6 关节组织病理学检查结果 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间主要的研究成果 |
四、威灵仙提取方法与抗疟作用研究（论文参考文献）
- [1]不同来源威灵仙抗炎镇痛谱效关系研究[J]. 鞠成国,张强,唐婷婷,王巍. 现代中药研究与实践, 2021(05)
- [2]五种天然活性成分抗弓形虫作用的研究[D]. 金春美. 延边大学, 2021(02)
- [3]威灵仙水溶性成分及其体外透皮行为研究[D]. 许晨新. 淮阴工学院, 2020(02)
- [4]甘川铁线莲（Clematis akebioides）化学成分的研究[D]. 公程程. 东南大学, 2017(05)
- [5]大叶铁线莲全草中的化学成分研究[D]. 张倩. 第四军医大学, 2016(03)
- [6]威灵仙提取液的Q235钢缓蚀性能[J]. 梁文,王敏,张文凯,周桃玉. 工业水处理, 2015(05)
- [7]中药6类新药复方灵仙止咳口服液的制剂工艺及质量标准研究[D]. 徐亚. 安徽中医药大学, 2015(04)
- [8]东北铁线莲药理作用研究进展[J]. 刘艳红,周小平,刘荣华. 江西中医学院学报, 2013(06)
- [9]Mincle基因克隆表达及威灵仙质量分析[D]. 李璐. 广州中医药大学, 2013(S1)
- [10]单叶铁线莲总皂苷提取纯化工艺及抗类风湿关节炎的初步研究[D]. 孙晓博. 中南大学, 2011(01)